聂荣华
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 转化生长因子-β_1对大鼠血管平滑肌细胞产生基质金属蛋白酶9作用的实验研究被引量：3
- 2015年
- 目的:研究转化生长因子(TGF)-β1对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)产生基质金属蛋白酶(MMP)的调控作用。方法:原代培养大鼠动脉血管平滑肌细胞,用不同浓度(0、1、5、10 ng/m L)的TGF-β1干预血管平滑肌细胞,分别在干预后0、2、4、6、16、24 h裂解细胞提取蛋白和培养基上清,Western Blot检测其中MMP2和MMP9蛋白质的表达。结果:MMP9蛋白质表达随TGF-β1浓度增加而增加,并且随着干预时间的延长也增加,其中10 ng/m L TGF-β1刺激24 h后升高最明显(P<0.05),MMP2蛋白质表达却无明显改变。结论:10 ng/m L的TGF-β1刺激血管平滑肌细胞24 h后能产生大量的MMP9。
- 张浩王志维聂荣华
- 关键词：转化生长因子Β1基质金属蛋白酶9血管平滑肌细胞
- 活性氧在转化生长因子-β1刺激血管平滑肌细胞产生基质金属蛋白酶9中的作用研究
- 2015年
- 目的探讨活性氧在转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激血管平滑肌细胞(VSMC)产生基质金属蛋白酶9(MMP9)中的作用。方法取一批原代培养大鼠主动脉VSMC分为6组,分别按0、5、0、0.05、0.5、5 mmol/L给予抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)预干预细胞1 h,再用不同浓度TGF-β1(0、0、10、10、10、10 ng/ml)作用24 h,明胶酶谱法检测培养基上清中MMP的活性,裂解细胞蛋白质印迹检测细胞中MMP9的表达。另取一批VSMC原位装载2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐荧光探针,分为两组,A组予TGF-β1(10 ng/ml)干预,B组予NAC(5 mmol/L)预作用1 h后再予10 ng/ml TGF-β1干预,倒置荧光显微镜观察细胞内荧光强度。最后取一批VSMC分为6组:(1)对照组;(2)0.1 mmol/L过氧化氢(H2O2)组;(3)1 mmol/L H2O2组;(4)5 mmol/L NAC组;(5)5 mmol/L NAC+1 mmol/L H2O2组;(6)5 mmol/L NAC+1 mmol/L H2O2+10 ng/ml TGF-β1组。分别作用24 h后检测培养基上清中蛋白酶的活性和细胞中MMP9的表达。结果 NAC显著抑制VSMC在TGF-β1作用下MMP9的表达。TGF-β1作用30 min及60 min后细胞内荧光强度明显增加;而NAC预作用后荧光强度明显减弱。1 mmol/L H2O2使VSMC表达MMP9显著增高,NAC显著抑制这种作用。结论活性氧参与TGF-β1刺激VSMC表达的MMP9的过程。
- 张浩王志维聂荣华
- 关键词：活性氧基质金属蛋白酶血管平滑肌细胞
