李天寿
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 促血管生成素-1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的构建携带小鼠促血管生成素-1(Ang-1)基因的重组腺病毒载体并鉴定。方法化学合成小鼠Ang-1基因经PCR扩增后亚克隆至穿梭质粒,重组质粒转化感受态细胞,所得转化子经PCR电泳分析并测序鉴定,携带外源基因的腺病毒穿梭质粒与携带腺病毒大部分基因组的辅助包装质粒共转染人胚肾细胞系HEK 293细胞,反复冻融获取重组腺病毒,终点稀释法测定重组腺病毒滴度,所得腺病毒转染293T细胞48 h收集培养上清,通过Western Blot分析Ang-1蛋白的表达。结果 PCR产物电泳分析可见大小约1.5 kbp的特征性条带,测序结果显示基因序列与Gen Bank提供的Ang-1序列一致,经HEK293细胞包装后腺病毒滴度为1×109pfu/ml,转染293T细胞后培养上清Western Blot分析可见大小58 k D特征性条带,即转染后能分泌正确大小的重组Ang-1蛋白。结论 Ang-1基因重组腺病毒载体可成功构建,为进一步研究Ang-1蛋白对造血干细胞动员及血管新生的作用提供实验依据。
- 李天寿李桥川苏丽华聂胤超杨鹏程
- 关键词：促血管生成素-1腺病毒基因重组小鼠
- 鼠面颊采血方法探究被引量：3
- 2016年
- 目的探究小鼠面颊采血法在连续检测小鼠血液指标的动物实验中的应用。方法采用面颊采血方法，对10只9周龄小鼠进行采血，2～3d重复采血1次，记录采血量，观察采血后小鼠反应。结果面颊采血法每次采血量可达0．3～0．6ml，采血后不影响小鼠正常活动，每隔2—3d可重复采血。结论面颊采血具有采血量大、操作简单易行、舒适度好、更加符合动物伦理等优点。
- 张帅帅李天寿藏美蓉邱录贵
- 关键词：动物血量小鼠
- 血管生成素1在G-CSF诱导的造血干/祖细胞动员中的表达变化被引量：4
- 2015年
- 目的 探讨G-CSF诱导的造血干/祖细胞（HSPC）动员过程中血管生成素1（Ang1）在小鼠骨髓的表达变化及导致其变化的机制.方法 采用流式细胞术检测小鼠动员前及动员后外周血Lin Scal＋cKit＋（LSK）细胞比例变化,并应用ELISA、免疫组化、RQ-PCR等方法检测G-CSF动员不同时间点小鼠外周血和骨髓标本,观察Ang1、骨钙素（OCN）基因及蛋白水平变化,显微镜下计数骨髓标本成骨细胞数量.结果 G-CSF动员5d小鼠外周血LSK细胞比例为（0.61±0.05）％,相对于对照组的（0.04±0.01）％显著增高（P＜0.05）;稳态小鼠OCN及Ang1 mRNA在骨内膜细胞表达高于骨髓有核细胞;动员后骨内膜细胞OCN及Ang1 mRNA相对表达量对照组（28.64±8.61及2.84±0.95）、G-CSF动员3d组（12.55±7.06及0.93±0.30）及动员5d组（4.75±1.62及0.92±0.22）均下降;动员后骨内膜成骨细胞数量显著减少,骨髓组织Ang1蛋白表达下降;对照组、动员3d及5d组外周血OCN及Ang1浓度分别为（24.11±3.17）及（2.24±0.52）ng/ml、（9.96±2.16）及（1.21±0.38）ng/ml和（8.43±2.62）及（0.90±0.24）ng/ml,动员3d及5d组均明显低于对照组,差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.结论 在G-CSF介导的HSPC动员过程中,骨髓微环境中成骨细胞数量下降、功能减低,进而导致骨髓Ang1表达下降,导致骨髓对HSPC的趋化和黏附能力下降,有利于HSPC动员的发生.
- 李天寿李桥川李斯丹聂胤超邱录贵
- 关键词：血管生成素1成骨细胞造血干细胞动员
