隋娟
- 作品数:8 被引量:11H指数:2
- 供职机构:新乡医学院更多>>
- 发文基金:河南省教育厅科学技术研究重点项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生文化科学更多>>
- 凌霄花有效部位的制备及其抗抑郁用途
- 本发明涉及凌霄花有效部位及其抗抑郁用途,可有效解决抑郁症的临床治疗问题,其解决的技术方案是:将凌霄花加10倍重量质量浓度为50%~90%的乙醇浸泡30min,超声提取1h,过滤得滤液;药渣再加入8倍、质量浓度为50%~9...
- 于海川吴娇隋娟翟鹏飞张轶王侠段巨洪
- Jurkat T细胞电穿孔转染条件的优化被引量:1
- 2015年
- 目的优化人急性淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat T细胞)的电转染条件。方法通过选择不同的电压、质粒浓度、细胞状态等转染参数,采用不同条件组合后用电穿孔法将质粒转入Jurkat T细胞。通过锥虫蓝拒染实验和荧光显微镜分析转染效率。结果 Jurkat T细胞在电压150 V条件下转染效率达到(62.10±2.13)%;处于对数生长期的细胞转染效率较高;质粒浓度低于0.5 g·L-1时影响转染效率;短时期内温度对转染效率的影响不大。结论本实验通过选择优化Jurkat T细胞的转染参数、控制影响因素,可有效提高Jurkat T细胞电转染效率。
- 张高丽隋娟刘喜红李平法
- 关键词:JURKATT细胞电转染转染效率
- 调控因子在巨核细胞分化中的重要作用
- 2015年
- 巨核细胞生成经历了骨髓多能干细胞向巨核细胞的分化决定以及巨核系祖细胞的继续分化和发育成熟。这一过程涉及多个基因有序开启和关闭的复杂而又精密的调控,包括胞质、胞核的一系列变化。在髓系细胞分化过程中,红系细胞和巨核系细胞是由同一种前体细胞分化而来,其分化机制目前还未完全被揭示。转录水平的调控是巨核细胞分化研究的重点,文章主要对巨核细胞分化过程相关转录因子的研究进展进行综述。
- 隋娟张高丽仝温温乔婷婷李平法于海川
- 关键词:转录因子基因表达调控
- 凌霄花有效部位的制备及其抗抑郁用途
- 本发明涉及凌霄花有效部位及其抗抑郁用途,可有效解决抑郁症的临床治疗问题,其解决的技术方案是:将凌霄花加10倍重量质量浓度为50%~90%的乙醇浸泡30min,超声提取1h,过滤得滤液;药渣再加入8倍、质量浓度为50%~9...
- 于海川吴娇隋娟翟鹏飞张轶王侠段巨洪
- 文献传递
- 电穿孔转染法与脂质体转染法对K562和HepG2细胞转染效率的影响被引量:7
- 2015年
- 目的通过对电穿孔转染法和脂质体转染法在K562、HepG2细胞中的转染效率比较,探索最佳的细胞转染方法和条件。方法以K562、Hep G2细胞为研究对象,采用电穿孔转染法和脂质体转染法分别转染带有绿色荧光的质粒PEGFP-N1和无荧光的质粒p CDNA3.1、p CDNA3.1-EOS基因,荧光显微镜下观察PEGFP-N1转染效果,计算转染效率;收集各培养组细胞,裂解后提取蛋白,采用Western blot方法检测基因转染后的蛋白表达。结果当脉冲20 ms、电阻90Ω、电压150 V时进行电穿孔,转染质粒PEGFP-N1,K562细胞可以得到较高的转染率;当脉冲20 ms、电阻90Ω、电压250 V时,转染质粒PEGFP-N1,Hep G2细胞可以得到较高的转染效率。在K562细胞和Hep G2细胞中,电穿孔转染法的转染效率均显著高于脂质体转染法(P<0.05)。电穿孔转染法转染PEGFP-N1后K562细胞和Hep G2细胞的存活率显著低于脂质体法(P<0.05)。Western blot结果显示电穿孔转染法蛋白表达量高于脂质体转染法(P<0.05)。结论最佳条件下电穿孔转染法是一种高效的基因转染方法,对比较难转染的悬浮细胞效果更佳。
- 隋娟张高丽李平法于海川
- 关键词:电穿孔脂质体转染K562细胞
- 脂滴与免疫应答反应关系的研究进展被引量:1
- 2015年
- 脂滴是一个复杂且活动旺盛的多功能细胞器,基本功能主要参与脂类合成和贮存,脂滴相关蛋白参与了多种脂质关联生物学过程,包括细胞信号转导、脂代谢的调控、膜运输、炎症相关蛋白的合成与分泌等。近年来关于脂滴与免疫应答反应的研究表明,根据细胞所处的阶段或状态不同脂滴存在不同的亚群,发挥特异性细胞功能。病原微生物的感染与细胞内脂积累密切相关,在免疫因子合成、抗原递呈、自噬等免疫过程中脂滴参与并起到关键的作用。本文针对脂滴在免疫应答反应方面的最新研究进行综述。
- 张高丽隋娟李平法于海川
- 关键词:脂滴抗原提呈自噬免疫反应
- 基于CRISPR/Cas9技术的GATA-1基因敲除K562细胞系的构建被引量:2
- 2016年
- GATA-1(GATA binding protein-1)在造血分化过程是最重要的转录调控因子,在红细胞和巨核细胞中特异性高表达,并通过调节相关基因的转录在红系和巨核系造血细胞的分化发育过程中发挥重要作用。该研究采用CRISPR/Cas9技术将K562细胞中的GATA-1基因敲除,建立了GATA-1基因敲除K562细胞株。首先,设计了4个CRISPR的靶向位点,利用p GL3-U6-sg RNA-PGKpuromycin质粒构建了4个导向RNA(single guide RNA,sg RNA)载体。利用电穿孔的方法将sg RNA载体与Cas9载体p ST1374-NLS-fl ag-linker-Cas9共转K562细胞。转染48 h,经定点PCR和T7EN1内切酶酶切鉴定后,采用细胞有限稀释法嘌呤霉素筛选,定点测序和Western blot检测结果显示,成功构建了GATA-1基因敲除K562细胞株,命名为K562-KO GATA-1。使用联苯胺染色和流式细胞术的方法检测血型糖蛋白A(glycophorin A,CD235a)发现,与正常K562细胞相比,K562-KO GATA-1细胞株经Hemin诱导红系分化明显受到抑制。综上,该研究建立了敲除GATA-1的K562细胞系,可用于后续的造血分化相关研究。
- 于海川吴娇翟鹏飞姚瑞宁马月月隋娟
- 关键词:K562细胞红系分化
- Eos蛋白在红系和巨核系分化中的功能研究
- 背景: 造血分化是生物体内重要的生理过程,不仅涉及造血干细胞(Hematopoietic stemcells,HSC)的自我更新、各链系祖细胞的定向分化,还包括祖细胞向成熟血细胞分化和发育的全过程。红系分化和巨核系分化...
- 隋娟
- 关键词:红系分化
- 文献传递