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罗莎
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2
被引量:4
H指数:2
供职机构:
四川大学华西公共卫生学院
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国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
张立实
四川省食品安全监测与风险评估重...
杨辉
国家食品安全风险评估中心
闫九明
四川大学华西公共卫生学院
贾贞超
四川大学华西公共卫生学院
方海琴
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两种胚胎干细胞实验模型评价邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯胚胎发育毒性的比较研究
被引量:2
2016年
目的:建立并应用小鼠胚胎干细胞实验(mEST)模型与人胚胎干细胞实验(hEST)模型评价邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)的胚胎发育毒性。方法参照欧洲替代方法研究中心(ECVAM)的标准操作方法,建立mEST、hEST模型,并选用ECVAM推荐的已知强胚胎发育毒性物质5-氟尿嘧啶(5-FU)和无胚胎毒性物质青霉素G(PN-G)进行模型验证,在模型验证有效的基础上,以15.6、31.2、62.5、125.0、250.0、500.0、1000.0μg/ml 浓度的DEHP分别染毒小鼠胚胎干细胞D3(mESC-D3)、Balb/c小鼠成纤维细胞3T3(3T3)及人胚胎干细胞H9(hESC-H9)7 d,采用CCK-8法检测不同浓度DEHP染毒后mESC-D3、3T3及hESC-H9细胞存活百分数和半数增殖抑制浓度(IC50)。根据细胞毒性实验结果,使用15.6、31.2、62.5、125.0、250.0、500.0μg/ml 浓度的DEHP分别处理分化的mESC-D3、hESC-H9细胞10 d,采用Real-time PCR检测不同浓度DEHP作用下,分化标志基因心肌细胞肌球蛋白重链(α-MHC)的表达情况,拟合效应曲线,得出半数分化抑制浓度(ID50)。并将ID50、IC50代入线性判别函数公式进行计算与比较。结果细胞生长状态良好,免疫荧光染色可见未分化hESC-H9细胞高表达、干性关键转录因子八聚体结合转录因子(OCT4)、阶段特异性胚胎抗原(SSEA-4)及肿瘤排斥抗原(Tra-1-60),细胞处于未分化状态。拟胚体大小均一、形态一致,可重复性高。采用ECVAM推荐已知发育毒性物质(5-FU和PN-G)对模型进行验证,所建模型有效,可用于受试物胚胎发育毒性的评价。DEHP对mESC-D3的IC50为210.0μg/ml、ID50为246.8μg/ml及对3T3的IC50为197.3μg/ml,代入线性判别函数公式得出函数Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ值分别为7.78、7.58、-7.79,因Ⅰ〉Ⅱ〉Ⅲ,mEST模型评价DEHP为无胚胎发育毒性。DEHP对hESC-H9的IC50为184.8μg/ml,ID50为84.3μg/ml及对3T3的IC50为195.4μg/ml,代入线性�
罗莎
方海琴
杨辉
张立实
贾旭东
关键词:
胚胎干细胞
食用竹炭粉的急性毒性与致突变性研究
被引量:2
2015年
目的:评价食用竹炭粉的急性毒性和致突变性。方法:采用大鼠急性经口毒性试验、Ames试验、大鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠体内彗星试验,参考经济合作与发展组织(OECD)相关方法进行。急性毒性试验以20 mL/kg进行灌胃;Ames试验设每皿0.008、0.04、0.2、1、5 mg剂量组,另设空白、溶剂、阳性对照;微核试验设2.81、5.62、11.24 g/kg剂量组,另设溶剂、阳性对照;彗星试验设2.81、5.62、11.24 g/kg剂量组,另设溶剂、阳性对照。结果:本实验所用食用竹炭粉(平均粒径为16.596μm)对雌、雄性SD大鼠的LD_(50)均大于11.24 g/kg;Ames试验、大鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠体内彗星试验结果均为阴性。结论:微米级食用竹炭粉对大鼠的经口急性毒性属无毒级,对鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型菌株和大、小鼠体细胞无致突变作用。
钟雨婷
贾贞超
闫九明
罗莎
卢叶丹
张立实
关键词:
急性毒性
致突变性
小鼠
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