雍雪飞 作品数:4 被引量:3 H指数:1 供职机构: 成都生物制品研究所有限责任公司 更多>> 发文基金: 四川省科技支撑计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 化学工程 更多>>
发酵罐酸洗钝化对百日咳杆菌生长和产毒的影响 2020年 目的:探讨发酵罐酸洗钝化对百日咳杆菌生长和产毒的影响。方法:定期对百日咳发酵罐进行酸洗钝化处理,去除其表面附着的代谢螯合物。通过检测后续培养收获物菌浓度(550 nm吸光度值)、一次盐析沉淀量、发酵产物中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)和丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)含量,比较分析酸洗钝化对发酵培养和产毒的影响。结果:对处理前后各连续10批相关指标进行比较,处理后菌体550 nm吸光度均值由4.663提高至5.490,一次盐析沉淀量均值由4.84 g/L提高至5.90 g/L,PT平均含量达到3.3μg/ml,FHA平均含量达到7.6μg/ml,处理前后各连续10批菌体浓度和一次盐析沉淀量数据采用t检验计算出P值分别为0.03和0.05,差异均有统计学意义。结论:定期对发酵罐进行酸洗钝化可有效改善百日咳杆菌发酵及产毒水平。 杨坤 杨勇 吴永超 张飞伟 闵宪捷 杨希飞 雍雪飞 刘少祥 潘海龙关键词:百日咳 发酵 钝化 培养条件对百日咳杆菌发酵中百日咳毒素及丝状血凝素表达的影响 2021年 目的探讨培养条件对百日咳杆菌发酵中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)和丝状血凝素(filamentous haemagglutinin,FHA)表达的影响。方法采用300 L全自动发酵罐进行百日咳杆菌发酵培养,培养基为百日咳S-S培养基,搅拌通气培养,培养量200 L,温度3537℃,培养时间40 h,接种比例1∶121∶15。试验分为高PT表达组(搅拌转速为160 r/min,搅拌叶片为直叶,有挡板,培养020及2140 h的通气量分别为600和400 L/min)、高FHA表达组(搅拌转速为220 r/min,搅拌叶片为弯叶,无挡板,培养020及2140 h的通气量分别为400和600 L/min)及对照组(搅拌转速为180 r/min,搅拌叶片为直叶,有挡板,通气量为500 L/min),每组平行培养3批培养物。于培养结束时采用ELISA法检测PT及FHA含量。结果高PT表达组PT含量平均值达3.16μg/mL,比对照组(平均值2.23μg/m L)提升了41.7%(P<0.05);高FHA表达组FHA含量平均值达21.37μg/mL,比对照组(平均值11.00μg/mL)提升了94.3%(P<0.05)。结论百日咳发酵工艺中,高搅拌剪切力和较低的溶氧水平有利于PT的表达,低剪切力和高溶氧水平有利于提高FHA的产量。 杨勇 吴永超 张飞伟 杨坤 闵宪捷 刘佐军 雍雪飞 刘少祥 潘海龙关键词:百日咳毒素 丝状血凝素 百日咳杆菌 发酵 醛化鹅红细胞用于百日咳菌液血凝滴度测定的可行性研究 2024年 目的初步评价醛化鹅红细胞用于百日咳菌液血凝滴度测定的可行性,并确定其使用有效期.方法以新鲜鹅红细胞为对照,筛选出测定百日咳菌液血凝滴度的最佳醛化鹅红细胞浓度.用3批醛化鹅红细胞分别检测3批百日咳菌液血凝滴度,考察与新鲜鹅红细胞检测结果的一致性.观察不同放置期的醛化鹅红细胞发生溶血的情况,并考察血凝滴度检测结果与新鲜鹅红细胞的一致性.结果用于百日咳菌液血凝滴度测定的最佳醛化鹅红细胞浓度为0.33%.不同批次醛化鹅红细胞检测百日咳菌液血凝滴度的结果均与新鲜鹅红细胞检测结果一致.醛化鹅红细胞在2~8℃存放90 d仍能准确检测百日咳菌液血凝滴度,120 d后发生溶血现象.结论0.33%的醛化鹅红细胞可用于百日咳菌液血凝滴度测定,醛化鹅红细胞使用有效期为90 d. 杨坤 谭大权 杨勇 吴永超 闵宪捷 李世玲 黄丹 雍雪飞 蒲俊楠 张飞伟关键词:百日咳 血凝集试验 溶血 麻疹病毒沪-191株在鸡胚成纤维细胞中连续传代的遗传稳定性 被引量:3 2013年 目的研究麻疹病毒沪-191株在鸡胚成纤维细胞中连续传代的遗传稳定性。方法将麻疹病毒沪-191株原始种子批(P25)在鸡胚成纤维细胞上传代2次(P27)作为主种子批,继续传代3次(P30)作为工作种子批,继续传代至33(P33)和35(P35)代。对P25、P27、P30、P33和P35病毒基因组进行基因序列分析,并对所有代次病毒进行滴度测定。结果麻疹病毒沪-191株在鸡胚成纤维细胞中从25代传至35代,其滴度维持在5.0~5.875 lgCCID50/ml之间;P25、P27、P30、P33、P35 5个代次病毒的全基因组序列未发生任何核苷酸和氨基酸改变。结论麻疹病毒沪-191株在鸡胚成纤维细胞连续传代,病毒滴度均一,基因组序列未发生改变,遗传稳定性良好。 杨会强 康庄 倪谦枝 刘宇虹 温雪如 刘瑛 雍雪飞 刘杰 孙艳 汪伟 吴永林 李玉华关键词:麻疹病毒 基因组