邓敏
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：广州医科大学附属肿瘤医院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广州市科技计划项目广州市属高校科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人CDK14基因表达荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用被引量：2
- 2017年
- 目的建立一种人细胞周期蛋白依赖性激酶14(CDK14)基因表达荧光定量PCR检测方法。方法利用Trizol法提取不同人肺癌细胞株中总RNA,以β-Actin和CDK14分别为内参和目的基因,分别设计特异性扩增引物,建立人CDK14基因表达荧光定量PCR检测系统并评估其检测性能。同时将其应用于不同细胞系siRNA干扰前后的CDK14基因相对表达水平检测。结果经电泳分析、熔解曲线、产物测序确认人CDK14基因表达荧光定量PCR检测系统已建立,其特异性良好,重复性佳(CV=7.13%),线性范围较宽(CDK14与β-Actin分别在Ct值范围22.47~32.96与15.14~27,55间具有良好的相关性,r^2=0.9844。)。利用该体系检测发现:在HCC827 D5和H1650细胞中CDK14基因高表达;在1~3号干扰片段中,1号片段为有效片段。结论人CDK14基因表达荧光定量PCR检测方法已成功建立。
- 罗凯黎谢梦丹石兴源贾晓婷王倩邓敏仇秦威张志杰贺智敏
- 关键词：基因实时荧光定量PCR
- ErbB3、IGF1R在乳腺癌Herceptin耐受中的作用及机制
- 2017年
- 目的探讨与表皮生长因子受体3（ErbB3）、胰岛素样生长因子I受体（IGFIR）在乳腺癌Herceptin耐受中的作用机制。方法在Hereeptin敏感的ErbB2阳性乳腺癌细胞株SKBR3、BT474中外源性增加HRG（表皮生长因子受体ErbB3配体）、IGF2（胰岛素样生长因子I受体IGF1R配体）后，用四唑氮化合物（MTS）法检测细胞对Herceptin的敏感性；在Herceptin耐受的乳腺癌细胞SKBR3／POOL2、BT474／HR20中采用HRG、IGF2中和抗体阻断其与相应的受体结合，MTS法检测细胞对Herceptin的敏感性。在ErbB2阳性乳腺癌细胞BT474中外源性加入HRG、IGF2，免疫共沉淀及蛋白印迹检测与ErbB2蛋白结合的ErbB3及IGF1R蛋白表达量的改变。结果在Herceptin敏感的乳腺癌细胞中，HRG、IGF2处理组较对照组细胞对Herceptin的敏感性明显下降；而在Herceptin耐受的乳腺癌细胞中，HRG、IGF2抗体处理组较对照组对Herceptin的敏感性增加。在ErbB2阳性乳腺癌细胞中加入HRG、IGF2后，与ErbB2结合的ErbB3以及IGF1R的表达增加。结论ErbB2／ErbB3及ErbB2／IGF1R异源二聚体的形成增加了乳腺癌对ErbB2靶向药物Herceptin的耐受。
- 张瑞鑫邓敏柳柏林罗凯贺智敏
- 关键词：受体受体药物耐受性
- 低浓度二甲双胍诱导肝癌细胞衰老及其机制探讨被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨二甲双胍（Met）对肝癌细胞衰老的影响及其机制.方法 不同浓度（0、0.01、0.1、1、10和50 mmol/L） Met处理肝癌细胞HepG2细胞后,采用MTS法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡改变;通过衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-ga1）染色和衰老标记分子Dec1蛋白表达分析Met对细胞衰老的影响;蛋白质印迹法分析p-AMPK、p-ACC和AMPK蛋白的表达.结果 Met可以抑制HepG2细胞的增殖,且呈浓度依赖性;高浓度（10和50 mmol/L）Met促进肝癌细胞凋亡;低浓度（0.01、0.1和1 mmol/L） Met作用后,肝癌细胞呈现典型的大而扁平的衰老形态,SA-β-ga1染色阳性细胞显著增多,细胞周期停滞于G0/G1期,衰老标记分子Dec1蛋白表达明显上调.此外,低浓度Met可以促进p-AMPK和p-ACC蛋白表达,而对AMPK蛋白表达无明显影响.结论 高浓度Met促进肝癌细胞凋亡;低浓度Met则诱导肝癌细胞衰老,其作用机制可能与激活AMPK信号通路有关.该研究为以后利用诱导肝癌细胞衰老这种方式提高肝癌综合治疗水平,提供了重要实验依据.
- 刘季芳邓敏尹江贺智敏
- 关键词：二甲双胍肝肿瘤细胞衰老细胞凋亡
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂SNDX-275对乳腺癌BT474细胞增殖抑制作用被引量：4
- 2015年
- 目的明确组蛋白去乙酰化酶抑制剂SNDX-275对ErbB2阳性乳腺癌BT474细胞的增殖抑制作用及其机制。方法以磷酸盐缓冲液（PBS）处理的BT474细胞作为对照组、SNDX-275处理的BT474细胞作为实验组，使用终浓度为0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 μmol/L的SNDX-275处理细胞，利用MTS实验、克隆形成实验检测细胞增殖能力。采用Western blotting实验检测ErbB2、ErbB3、p-Akt的蛋白表达，实时荧光定量PCR检测miR-125a、miR-125b的表达。MTS实验检测SNDX-275对转染miR-125抑制剂的乳腺癌BT474细胞的增殖抑制作用。结果MTS实验检测结果发现SNDX-275能明显抑制细胞的增殖且具有浓度依赖性，4.0 μmol/L的SNDX-275对细胞的抑制率约（68.00±4.45）%。平板克隆实验结果表明，SNDX-275能明显抑制乳腺癌BT474细胞克隆的形成。Western blotting结果显示SNDX-275明显抑制ErbB2、ErbB3、p-AkT的表达。实时荧光定量PCR分析发现，与PBS处理的BT474细胞对比，2 μmol/LSNDX-275 BT474细胞分别上调miR-125a、miR-125b约3.22±1.17倍、5.42±0.38倍，差异均具有统计学意义（t=4.338,P=0.049；t=21.805,P=0.002）。MTS实验结果显示，与PBS对照组相比，SNDX-275组和转染miR-125抑制剂组对乳腺癌细胞BT474的抑制率分别为（56.97±3.56）%、（10.67±2.21）%，两组之间差异具有统计学意义（t=-10.993，P=0.008）。结论SNDX-275通过上调miR-125a、miR-125b抑制ErbB2-ErbB3-Akt信号通路，进而抑制ErbB2阳性乳腺癌BT474细胞的增殖。
- 尹江刘浩邓敏贺智敏
- 关键词：乳腺肿瘤细胞增殖微RNAS
- LncRNA ITGA9-AS1抑制乳腺癌细胞增殖并增强其对顺铂的敏感性被引量：5
- 2017年
- 长链非编码RNAs(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一类长度大于200 nt,无蛋白质编码功能的RNAs。近年来,lncRNAs在肿瘤发生发展中的作用备受关注。LncRNAs芯片分析结合后期实时荧光定量PCR验证发现,ITGA9-AS1在MCF-7细胞中的表达量显著高于耐药细胞MCF-7/5Fu,且其在乳腺癌细胞中的表达量显著低于正常乳腺上皮细胞。生物信息学预测,ITGA9-AS1无蛋白质编码功能。在乳腺癌细胞T47D中过表达ITGA9-AS1,可显著抑制该细胞的增殖和克隆形成能力,增加该细胞对化疗药物顺铂(cisplatin,cDDP)的敏感性。相反,在乳腺上皮细胞MCF-10A中敲低ITGA9-AS1的表达,能够明显增加该细胞的增殖能力和克隆形成能力,同时降低该细胞对cDDP的敏感性。总之,lncRNA ITGA9-AS1可抑制乳腺癌细胞增殖,增强乳腺癌细胞对化疗药物的敏感性。
- 贾小婷罗利云郑国沛邓敏贺智敏
- 关键词：化疗敏感性乳腺癌
