谭磊 作品数:41 被引量:92 H指数:5 供职机构: 湖南农业大学动物医学院 更多>> 发文基金: 湖南省自然科学基金 国家自然科学基金 湖南省科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
一种基于CRISPR/Cas9技术实现HMGCR基因敲除的方法 一种基于CRISPR/Cas9技术实现HMGCR基因敲除的方法,是设计两个针对HMGCR基因的CRISPR/Cas9靶标序列,体外合成gRNA单链,经过退火处理获得两个gRNA双链DNA目的插入片段,并分别插入PX459... 王爱兵 刘谭彬 郭时印 谭磊 雷新诺 王乃东 胡意 李亚兰 杨凌宸 杨毅文献传递 孔雀源蛔虫分子鉴定及其遗传进化分析 2022年 本研究的主要目的是通过分析遗传变异探讨孔雀源蛔虫与其他蛔虫种群的遗传关系。本研究中,以湖南省益阳市楠蓝孔雀生态养殖场的8只孔雀小肠中采集蛔虫样品为研究对象,通过PCR方法对其线粒体cox1基因部分(pcox1)序列和nad1基因部分(pnad1)序列以及核糖体ITS序列进行扩增、测序和分析,并利用邻接法(Neighbor joining)基于3个基因位点构建孔雀源蛔虫和其它蛔虫的进化树,分析其种系发育关系。测序结果显示,8只孔雀源蛔虫样品的pcox1、pnad1和ITS基因序列长度分别为442、512、1023~1029 bp,碱基差异分别为0.00%~0.45%、0.00%~0.39%和0.00%~0.87%,系统进化分析均显示8只孔雀源蛔虫与已知鸡蛔虫分离株聚类形成同一分支,与其他蛔虫所属分支分隔较远,说明本研究获得的8只孔雀源蛔虫均被鉴定为鸡禽蛔虫(Ascaridia galli),其研究结果可为孔雀蛔虫病的防控提供指导。 贺峻琳 龚腾芳 谭磊 李芬 刘伟关键词:线粒体DNA 芷江鸭消化道寄生虫感染情况调查 被引量:1 2015年 为了解芷江县鸭寄生虫种类以及寄生虫病流行特点,为寄生虫病防治提供一定的依据和参考。文章采用完全蠕虫学剖检和粪便检查两种方法,对芷江县的小河口、吴家垄、麻英塘、公平、蟒塘溪、冷水溪六个鸭场不同日龄雏鸭、成鸭共计120只进行寄生虫病学检查。结果显示:被调查地区鸭群寄生虫感染率较高,多数存在复合感染,其感染主要以吸虫和绦虫为主,吸虫、绦虫、线虫感染率分别为68.33%、70%、41.7%。 侯强红 谭磊 王先坤 邓兴珍 刘伟关键词:寄生虫 感染率 流行病学 基于LAMP-CRISPR/Cas12a可视化检测PCV2核酸的试剂盒及方法 一种基于LAMP‑CRISPR/Cas12a可视化检测PCV2核酸的试剂盒,包括CRPSPR‑Cas12检测体系和LAMP扩增引物,是将LAMP检测方法和CRPSPR‑Cas12检测方法相结合,建立的可实现猪圆环病毒2型... 王爱兵 谭磊 廖帆 雷磊 段德勇 杨毅 湛洋 王乃东 雷红宇 邓治邦 王玉格 胡意一种检测曼氏迭宫绦虫的引物组、试剂盒及其使用方法 本发明公开了一种检测曼氏迭宫绦虫的引物组、试剂盒及其使用方法,其中,引物组包括:外引物cox1‑F3:TTTACTGTGGGGTTGGAC;外引物cox1‑B3:CAAGCAGAAAGAATTATACCAGT;内引物co... 刘伟 高帅鹏 靳元春 柳亦松 李昌恒 谭磊文献传递 基于ITS基因分析黑斑蛙裂头蚴种系发育关系 <正>为了研究黑斑蛙裂头蚴种系发育关系,本研究利用聚合酶链式反应(PCR)对黑斑蛙裂头蚴湖南株核糖体DNA内转录间隔区(ITS)进行扩增与测序,应用ClustalX 2.0程序对序列进行比对,再利用Mega4.0程序进行... 谭磊 周湘 刘雪松 孔小鲜 刘毅 刘伟文献传递 猪流行性腹泻病毒检测方法的研究进展 被引量:15 2019年 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种高度接触性传染病。该疫病的爆发流行,给养猪业造成巨大的经济损失。因此,灵敏、快速检测诊断PEDV感染是实施病毒防控措施的关键环节。本文对于近年来检测PEDV的实验室方法进行了总结,包括病毒分离培养鉴定、病毒电镜形态检查、血清中和试验(SNT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学(IHC)、间接免疫荧光试验(IFA)、免疫层析法(IC)、核酸原位杂交技术(ISH)、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)、逆转录-环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP)、纳米颗粒辅助聚合酶链式反应(nanoPCR)等,并分别介绍了不同检测方法在应用中的优缺点,为有效诊断及防治猪流行性腹泻病毒感染提供技术指导。 李亚兰 袁晓民 湛洋 杨凌宸 杨凌宸 谭磊 胡意 郭时印 谭磊关键词:病原学检测 免疫学检测 分子生物学技术 基于nad5基因分析黑斑蛙裂头蚴种系发育关系 被引量:5 2015年 为分析黑斑蛙裂头蚴种系发育关系,本研究利用PCR对黑斑蛙裂头蚴湖南省分离株线粒体DNA烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位5基因(nad5)部分序列进行扩增和测序,分析其遗传变异情况。并利用软件Clustal X 2.0对其序列进行分析,研究黑斑蛙裂头蚴与其它绦虫的种群遗传关系。测序结果显示,所扩增的nad5部分序列长度一致,均为510 bp,湖南省各分离株之间相应序列的相似性在97%以上,湖南分离株与基因库中其它裂头蚴nad5序列的相似度均低于89%。由于黑斑蛙裂头蚴nad5序列种内相对保守,种间差异较大,因此可以作为黑斑蛙裂头蚴种间遗传变异研究的分子标记,从而为黑斑蛙裂头蚴的分子流行病学和进一步的分类鉴定奠定了基础。 李晖 王先坤 邓兴珍 刘谭彬 谭磊 刘伟关键词:线粒体DNA 犬乳头瘤病毒研究概况 被引量:2 2021年 犬病毒性乳头瘤(Canine viral papillomatosis)是由犬乳头瘤病毒(Canine papillomavirus,CPV)引起的一种犬传染病,主要感染犬皮肤和黏膜的鳞状上皮(如口腔、唇周、生殖器及皮肤),表现为疣或“花椰菜样”的乳头状瘤,恶化时可转化为鳞状细胞癌。目前国内外对于该病毒的基础、预防及临床研究甚少,对该病毒及所致疾病的认识不足,因此,对CPV的基本生物学特性、现有报道的流行情况、临床症状、检测方法以及目前预防性疫苗研发状况进行综述,为未来深入研究CPV理论基础、临床检测和疫苗研发提供参考。 李亚兰 冯园 杨雅娣 胡意 谭磊 谭磊 杨凌宸 邓治邦关键词:生物学特性 临床症状 预防性疫苗 稳定干扰IFITM1表达的细胞系建立及对PRV、PCV2、TGEV在细胞内复制的影响 被引量:1 2020年 为构建稳定干扰(IFITM1)基因表达的猪空肠上皮细胞系J2-KD(knockdown,KD),并研究干扰IFITM1表达后对伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染的影响。应用基因克隆技术,构建pLKO.1-EGFP-Puro-IFITM1重组载体,与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞,产生绿色荧光蛋白标记的表达IFITMshRNA的慢病毒,48 h后收集病毒上清。用收获的慢病毒感染猪小肠上皮细胞(J2细胞)后,经过嘌呤霉素筛选及细胞有限稀释法,通过RT-PCR鉴定后,获得稳定干扰IFITM1基因的细胞系,并由MTT法验证干扰IFITM1表达对J2细胞生长无影响,将成功构建的干扰IFITM1表达的J2稳定细胞系命名为J2-KD。分别用PCV2、PRV和TGEV感染J2-KD细胞,用实时荧光定量PCR方法检测病毒的复制情况。结果显示,成功建立了稳定干扰IFITM1表达的J2细胞系(J2-KD);在J2-KD细胞中PCV2和TGEV病毒复制拷贝数出现升高,而PRV出现降低的现象。表明,干扰IFITM1基因明显抑制PRV病毒复制,而促进TGEV和PCV2的复制,这为进一步研究猪源IFITM1蛋白功能及阐明其抗病毒分子机制奠定了基础。 贺佳怡 王爱兵 杨凌宸 颜可欣 谭磊 王教顺 袁晓民关键词:稳定细胞系 伪狂犬病病毒 猪传染性胃肠炎病毒