石斌
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：南京军区福州总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺腺癌细胞DR4基因启动子甲基化与TRAIL敏感性的相关性研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨DR4基因启动子甲基化水平与肺腺癌细胞株对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)敏感性之间的相关性。方法选取未经5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理和10μmol/L 5-Aza-CdR处理3 d后的肺腺癌细胞A549、LTEP-α-2,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,倒置显微镜下观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率;采用RT-PCR法、免疫印迹法和甲基化特异性PCR(MSP)法分别检测肺腺癌细胞株(A549、LTEP-α-2)DR4基因mRNA、蛋白表达和启动子区甲基化状态。结果肺腺癌细胞(A549、LTEP-α-2)对低浓度TRAIL高度耐受,提高TRAIL浓度(15.625、31.25、62.5、125、250、500μg/ml)作用细胞24、48 h后,细胞生长受到不同程度抑制,且呈剂量和时间依赖性;经5-Aza-CdR处理后,TRAIL对肺腺癌细胞的增殖抑制作用均较处理前显著增强(P<0.05),倒置显微镜下细胞形态表现出变圆、皱缩甚至脱落等特征。应用5-Aza-CdR处理后,125μg/ml TRAIL诱导肺腺癌细胞的凋亡率较处理前明显升高(P<0.05)。A549、LTEP-α-2细胞存在DR4 mRNA及蛋白的低表达,其基因启动子处于甲基化状态;经5-Aza-CdR处理后,肺腺癌细胞中DR4 mRNA及蛋白的表达均显著升高(P<0.05),其基因启动子处于非甲基化状态。结论 5-Aza-CdR可以逆转DR4基因启动子甲基化状态,上调基因表达,增强TRAIL诱导肺腺癌细胞凋亡的能力,从而逆转TRAIL耐药。5-Aza-CdR联合TRAIL可能是治疗肺腺癌的一种新策略。
- 綦晓艳王文武石斌徐瑶张妍陈曦欧阳学农
- 关键词：肺腺癌细胞株
- 人胃癌二甲双胍耐药细胞株及其应用
- 本发明披露了一种新的人胃癌二甲双胍耐药细胞株，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，保藏编号：CCTCC C2014163。本发明可以用于研究人胃癌二甲双胍耐药细胞形态学及生物学特点、研究肿瘤耐药机制...
- 房文铮于观贞洪峻峰欧阳学农石斌于娜英林青
- 文献传递
- 5-氮杂胞苷和顺铂联合TRAIL诱导肺癌A549细胞凋亡及其机制探讨被引量：3
- 2015年
- 目的 :探讨5-氮杂胞苷、顺铂联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的作用及可能的分子机制。方法:用5-氮杂胞苷单药、TRAIL单药、5-氮杂胞苷+TRAIL以及5-氮杂胞苷+顺铂+TRAIL联合用药分别作用A549细胞后,采用MTT法和FCM法分别检测细胞增殖抑制率和细胞凋亡率。采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测5-氮杂胞苷处理前后A549细胞中死亡受体(4death receptor 4,DR4)m RNA及蛋白表达量的变化。甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)法检测5-氮杂胞苷处理前后A549细胞中DR4基因的启动子甲基化状态。结果 :5-氮杂胞苷+TRAIL组A549细胞的增殖抑制率及凋亡率均明显高于TRAIL单药组(P值均<0.05),而5-氮杂胞苷+顺铂+TRAIL组A549细胞的增殖抑制率及凋亡率均明显高于5-氮杂胞苷+TRAIL组(P值均<0.05)。A549细胞在经5-氮杂胞苷处理前,其DR4基因启动子呈甲基化状态,DR4 m RNA及蛋白表达水平均较低;经5-氮杂胞苷处理后,DR4基因启动子呈非甲基化状态,DR4表达水平明显提高,并呈时间依赖性(P值均<0.05)。结论 :5-氮杂胞苷可以逆转DR4基因启动子的甲基化状态,使其表达上调,增强TRAIL诱导A549细胞凋亡的作用,逆转细胞对TRAIL的耐药性。同时,亚毒性剂量的顺铂可进一步增强TRAIL对A549细胞的凋亡诱导作用。提示5-氮杂胞苷、顺铂联合TRAIL可能成为治疗肺癌的一种新策略。
- 綦晓艳王文武石斌陈曦欧阳学农
- 关键词：TNF相关凋亡诱导配体细胞凋亡
- 人胃癌二甲双胍耐药细胞株及其应用
- 本发明披露了一种新的人胃癌二甲双胍耐药细胞株，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，保藏编号：CCTCC NO：C2014163。本发明可以用于研究人胃癌二甲双胍耐药细胞形态学及生物学特点、研究肿瘤耐...
- 房文铮于观贞洪峻峰欧阳学农石斌于娜英林青
