陈慧 作品数:5 被引量:5 H指数:1 供职机构: 延边大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 更多>>
阻断淀粉样前体蛋白-C端片段毒性通路对Cofilin磷酸化的影响 被引量:1 2015年 目的本研究欲探讨阻断淀粉样前体蛋白-C端片段(Amyloid Precursor Protein C Terminal Fragments,APP-CTFs)毒性通路对Cofilin磷酸化的影响方法大鼠胚鼠大脑皮层神经元细胞培养,采取3种方法阻断APPCTFs毒性通路。1APP-695转染后γ-内切酶抑制剂DAPT处理2利用YENPTY段删除的pEGFP-APP C99,C57转染至大鼠神经元细胞3GSK-3β抑制剂LiCl处理,3种方法阻断后,均采用蛋白印迹方法检测Ph-cofilin蛋白水平。结果 DAPT处理组与未处理组比较Ph-cofilin蛋白表达水平降低(P<0.05)。转染YENPTY段删除的pEGFPAPP CTFs组未能明显增强磷酸化Cofilin的蛋白表达水平(P>0.05),虽然转染APP-CT99,57-pEGFP组与空载体对照组相比较,Ph-Cofilin蛋白表达水平明显增加(P<0.05)。LiCl处理组与非处理组相比,Ph-Cofilin蛋白表达无明显改变(P>0.05)。结论提示APP-CTFs诱导的Cofilin磷酸化过程与APP-CTFs核转移毒性通路有关,但与其诱导的GSK-3β-Tau毒性通路无关。 陈慧 许妍姬关键词:COFILIN 淀粉样前体蛋白-C端片段对胚鼠原代皮层神经元cofilin磷酸化的影响 2015年 目的探讨淀粉样前体蛋白-C端游离片段(APP-CTFs)对ADF/cofilin的影响及作用机制。方法 APP-CT99-pEGFP转染胎鼠原代皮层细胞,采用细胞免疫组化方法和蛋白印迹方法观察磷酸化cofilin和LIMK1的分布形态和表达水平。处理S3肽,LIMK1的特异性竞争性抑制剂后再观察磷酸化cofilin表达。结果细胞免疫组化实验结果,转染APP-CT99-pEGFP的细胞中,磷酸化cofilin和LIMK1在细胞质和细胞核中均有分布,与空载体转染组比较分布较高。S3肽处理后,磷酸化cofilin的表达水平减少。蛋白印迹实验结果,转染APP-CT99-pEGFP的细胞中,磷酸化cofilin和LIMK1蛋白水平增高,与空载体转染组比较具有显著性差异(P<0.05)。S3肽处理后,磷酸化cofilin蛋白水平降低。结论 APP-CTFs通过LIMK1激酶调控cofilin磷酸化。 李光哲 程琳 陈慧 元红花 许妍姬关键词:COFILIN 磷酸化 淀粉样前体蛋白C端片段对细胞骨架状态的影响 2016年 【目的】探讨大鼠胚胎神经元内转染淀粉样前体蛋白C端片段对细胞骨架状态的影响。【方法】大鼠胚胎大脑皮层获得原代神经元进行培养,利用APP-C端片段、APLP2-C端片段基因重组质粒转染到神经元当中,用免疫染色的实验方法,观察肌动蛋白(actin)、微管蛋白(tubulin)、微管相关蛋白(MAP2),磷酸化丝切蛋白(Ph-cofilin)的形态,并用Western Blotting方法测定了Ph-cofilin水平,每组实验重复测量十次。【结果】APP/APLP2-CTFs转染组与对照组相比有明显的向细胞外伸展的F-actin的重新聚合,细胞四周伸出的突触有所收缩;tubulin的结构发生紊乱;轴突当中的MAP2蛋白表达显著减弱,而且APP-C99组的MAP2蛋白的表达水平最低。蛋白印迹和免疫组化结果均显示APP/APLP2-CTFs转染组与对照组相比Ph-cofilin水平有所增高(P <0.05)。【结论】转染淀粉样前体蛋白C端片段可以诱导细胞骨架蛋白和状态的改变。 许敢峰 刘芳 陈慧 许妍姬关键词:ACTIN TUBULIN MAP2 淀粉样前体蛋白-C端片段对cofilin磷酸化的影响 目的老年性痴呆患者脑组织除老年斑和神经原纤维缠结之外,还包含Hirano bodies,是由肌动蛋白和其结合蛋白cofilin构成的节状结构,但cofilin-肌动蛋白节状结构形成的具体机制还未阐明。在人非肌型cofil... 程琳 陈慧 许妍姬关键词:COFILIN LIMK1 磷酸化 文献传递 超声辅助提取强抗氧化性的紫苏叶工艺条件研究 被引量:4 2014年 [目的]研究超声波辅助提取紫苏叶抗氧化性的最佳工艺条件。[方法]采用乙醇浓度分别为60%、70%、80%、90%;提取料液比分别为1∶10、1∶20、1∶30、1∶40 g/ml;超声时间分别为10、20、30、40 min;超声功率分别为200、250、300、350 W的单因素试验和正交试验L9(34)优选超声波辅助提取紫苏叶抗氧化性的工艺条件。[结果]单因素试验的最佳结果为:乙醇浓度70%,料液比1∶30 g/ml,超声时间20 min,超声功率350 W;超声波辅助提取紫苏叶抗氧化性物质的最佳工艺条件为:料液比1∶30 g/ml,乙醇浓度80%,超声功率200 W,超声时间20 min;在此条件下,紫苏叶对DPPH自由基的清除率高达84.56%。[结论]在合适的提取条件下,紫苏叶的抗氧化活性较高。 陈慧 许妍姬 崔承弼 崔香淑关键词:紫苏叶 超声波 抗氧化性