萧飒
- 作品数：24 被引量：53H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省农业科技攻关项目陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 长链非编码RNA——病毒与宿主相互作用中的新型调控因子被引量：1
- 2020年
- 长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一类长度>200 nt的非编码RNA,在多种生物学过程中发挥重要调控作用。近年来研究表明,lncRNAs可被病毒诱导表达,其作为一类新型的调控因子介导宿主与病毒相互作用,通过病原识别受体,以不同机制激活或抑制天然免疫应答反馈病毒感染。本文阐述了lncRNAs介导病毒与宿主相互作用中的调控机制,归纳了它们在宿主抗病毒天然免疫应答过程中的调控网络,以期为研究lncRNAs在抗病毒中的作用提供参考,为揭示病毒的致病机制和发现新的抗病毒靶标奠定基础。
- 赵学亮刘海金萧飒王兴龙杨增岐
- 关键词：长链非编码RNA病毒天然免疫
- 抗人膀胱癌单链抗体的构建及表达的研究被引量：1
- 2001年
- 目的 为膀胱癌的导向诊断和治疗提供免疫原性更低的单链抗体。 方法 从 1株分泌鼠抗人膀胱癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株BDI 1中分离出总RNA ,逆转录cDNA ,并以此为模板用聚合酶链反应技术扩增VH 和VL 基因 ,分别克隆入pUC19质粒 ,进行序列分析。将VH 和VL 插入表达载体pFUW80中 ,并转化大肠埃希菌JM83,诱导表达出抗人膀胱癌单链抗体。用免疫竞争抑制酶联免疫吸附测定法鉴定免疫活性。用固相化的金属离子亲和层析柱纯化抗人膀胱癌单链抗体。 结果VH 全长 36 6bp ,属于小鼠重链可变区Ⅱ亚类 ;VL 全长 32 4bp ,属于小鼠K轻链IV亚类。表达产物可抑制原单抗BDI 1与人膀胱癌细胞结合的活性。纯化的单链抗体是分子量约 2 90 0 0的单一蛋白条带。 结论 抗人膀胱癌单链抗体被成功地构建并表达。
- 张民俞莉章黄华梁萧飒蒋欣顾方六
- 关键词：膀胱肿瘤基因表达调控聚合酶链反应酶联免疫吸附测定单链抗体
- 用于研究NDV RNA编辑特性的微型基因组系统及差异性表达两种外源基因的方法
- 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及用于研究NDVRNA编辑特性的微型基因组系统及差异性表达两种外源基因的方法。本发明提供的重组基因在NDV中可产生多个转录本，并且使两种目标基因的表达产生恒定比例的差异，编辑位点上游目标...
- 萧飒孟繁星田健霞杨增岐刘海金党如意
- 抗人膀胱癌单克隆抗体重、轻链可变区基因体外扩增、克隆及序列分析被引量：2
- 1996年
- 应用人工合成的两套引物，从分泌抗人膀胱癌特异性单抗的杂交瘤细胞ＢＤＩ－１中提取总ＤＮＡ。以之作模板，经ＰＣＲ法扩增出重、轻链可变区基因片段。将扩增产物分别插入ＰＵＣ１９质粒，筛选出阳性克隆，用链终止法进行ＤＮＡ序列测定。结果表明：重链可变区基因全长３６６ｂｐ，编码１２２个氨基酸，属于小鼠重链可变区的ＳｕｂｇｒｏｕｐＩＩ，由种系基因中的ＶＨ与Ｄ基因的Ｄｓｐ２．２及ＪＨ４基因重排而成；轻链可变区基因全长３２４ｂｐ，编码１０８个氨基酸，属于小鼠轻链可变区的ＳｕｂｇｒｏｕｐＩＶ，由种系基因中的Ｖκ与Ｊκ４基因重排而成。与已发表的抗体可变区基因序列比较。
- 萧飒俞莉章顾征刘喜富郭应禄顾方六王勇陈艾宋海燕林晴黄华梁
- 关键词：基因表达调节单克隆抗体轻链
- 禽脑脊髓炎病毒VP1蛋白纳米抗体的筛选及活性检测被引量：4
- 2016年
- 禽脑脊髓炎病毒(avian encephalomyelitis virus,AEV)VP1蛋白作为诱饵蛋白,采用酵母双杂交技术对非免疫双峰驼纳米抗体酵母文库进行筛选。随机选择15个用QDO/X/A平板筛选到的纳米抗体(Nanobody or VHH)阳性克隆,经过酵母共转验证、序列测定分析,最终选择在QDO/X/A平板显强阳性且序列正确的8株VHHs在E.coli BL21(DE3)中进行表达、纯化;间接ELISA结果表明,筛选出的8株纳米抗体均与AEV标准抗原具有反应原性,其中2株纳米抗体VHH4、VHH9的活性高于阳性对照。这一结果为AEV的检测与病原研究奠定了一定的基础。
- 范文涛杜恩岐高小龙萧飒李志军范莉莉郝华芳王兴龙党如意张淑霞杨增岐
- 关键词：禽脑脊髓炎病毒VP1蛋白
- 抗人CD3单链抗体与改形单域抗体的表达被引量：9
- 1996年
- 设计并化学合成含有适当酶切位点及连接肽的寡核苷酸序列,与一定的背景载体连接并改造成适用于单链抗体表达的载体:外分泌型pWAI80和融合蛋白型pROH80从分泌抗人CD3单克隆抗体的杂交瘤细胞UCHT1中,经PCR扩增出轻、重链可变区基因V_H和V_K,并插入上述表达载体中构建成单链抗体基因.通过对鼠OKT3结合位点的结构模拟,并比较人、鼠抗体家族性保守序列,设计出改形OKT3的基因序列.化学法部分合成8个寡核苷酸片段,应用重叠PCR技术扩增出完整改形重链基因V_H,并克隆、酶切和测序鉴定.将所克隆V_H基因插入表达载体pCOMB3和 pGEX-4T-1中进行表达.经 IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和 Western blot分析以及 ELISA检测,结果发现分泌型表达产物及 M13基因Ⅲ-V_H改形单域抗体融合蛋白具有与CD3单抗竞争抑制的活性;而融合型单链抗体及改形单域抗体表达产物主要以包涵体形式存在,占细菌总蛋白的 30％左右.
- 刘喜富萧飒顾征王勇陈艾林晴张卫国黄华梁孙健陈润生沈倍奋陈兴
- 关键词：CD3单链抗体分子设计基因表达
- 禽脑脊髓炎病毒XY13株的分离鉴定及遗传进化分析被引量：3
- 2017年
- 采集患病雏鸡脑组织样品制成组织悬液进行SPF鸡胚传代,通过免疫组化试验、动物试验、RT-PCR扩增VP1基因片段对病原进行鉴定,并对基因序列进行遗传进化分析,结果分离了1株禽脑脊髓炎病毒(AEV),命名为XY13株。免疫组化结果显示脑组织切片中存在大量的深棕黄色着色区域;动物试验中雏鸡出现了震颤、共济失调等禽脑脊髓炎(AE)临床症状,剖检发现脑组织软化、有散在出血点;RT-PCR扩增出的目的片段长度为288bp,编码96个氨基酸;序列分析表明AEV XY13株分离株与参考毒株的核苷酸同源性为74.6%~99.7%,氨基酸同源性为76.0%~97.9%;进化树分析表明AEV XY13与SX株的处于相同的分支,与1143、YL、L2Z株同处于一个较大的分支上,而与VanReokel、NH-937和204C株则处于不同的分支上,表明亲缘关系较远;进化距离预测结果表明AEV XY13株与1143、L2Z、SX和YL株的进化距离均小于0.011,而与NH-937、Van Reokel和204C株的进化距离则大于0.060。结果表明:本分离株为AEV,与目前已知的AEV毒株在进化关系上存在一定的差异。
- 李志军范莉莉张惠文杨增岐萧飒王兴龙党如意张淑霞
- 关键词：禽脑脊髓炎病毒免疫组化
- 新城疫病毒对水禽致病性的研究进展被引量：4
- 2021年
- 新城疫(Newcastle disease,ND)是由ND病毒(NDV)引起的一种禽类急性、高度接触性传染病。根据对鸡的致病力可将NDV分为3种不同类型,即速发型(强毒株)、中发型(中强毒株)和缓发型(弱毒或无毒株)[1]。家禽感染NDV以呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血、腺胃乳头出血和溃疡等为典型特征。过去人们普遍认为NDV可以感染水禽,但没有致病性。
- 孟繁星李永山牟素菁金忠元萧飒
- 关键词：新城疫病毒下痢致病力强毒株
- 新城疫病毒F蛋白纳米抗体的筛选及活性鉴定被引量：8
- 2016年
- 旨在筛选新城疫病毒(NDV)F蛋白的纳米抗体,并对筛选的抗体活性进行初步鉴定。以NDV F蛋白中和表位构建诱饵,利用酵母双杂交技术对双峰驼天然重链抗体可变区(VHH)酵母双杂交文库进行筛选,获得4株VHH抗体序列。挑选其中2株最符合VHH特征的进行原核表达与纯化,并对2株VHH活性进行鉴定。ELISA结果显示,VHH1与VHH2与NDV病毒的反应性显著高于阴性对照(P<0.05),表明VHH与NDV病毒反应活性良好;Western blot结果显示,2株VHH可特异性识别F蛋白;细胞中和试验结果表明,2株VHH抗体均具有一定的中和活性。以上结果提示本研究成功筛选出2株活性较好的抗NDV F蛋白的VHH抗体,为VHH在NDV防控中的应用奠定了基础。
- 高小龙胡湘云付向晶王燕平仝丽娜王海新王兴龙张淑霞萧飒杜恩岐杨增岐
- 关键词：新城疫病毒F蛋白酵母双杂交
- 大鼠细小病毒VP2原核表达及间接ELISA方法建立被引量：3
- 2018年
- 本研究以大鼠细小病毒(Rat parvovirus,RPV)VP2基因的原核表达产物为抗原建立检测RPV抗体的间接ELISA方法。通过比对分析大鼠细小病毒不同毒株的VP2蛋白序列,我们筛选出了RPV株VP2蛋白上长度为378 bp的特异性成熟肽序列,随后构建了pET30a原核表达体系,借助His标签对重组表达产物进行纯化,以纯化鉴定后的表达产物为抗原,免疫Balb/c小鼠制备多抗血清并建立检测大鼠细小病毒血清抗体的间接VP2-ELISA方法。结果显示,抗原包被质量浓度为0.28μg/mL,阳性判定标准初步定为OD450≥0.5,与H-1株和KRV株的阳性血清存在一定的交叉反应,批内试验变异系数小于10%。本研究建立的RPV VP2-iELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于大鼠细小病毒感染的血清抗体检测。
- 霍娜姚威于婉琪魏晓锋萧飒陈鸿军
- 关键词：VP2原核表达间接酶联免疫吸附试验
