俞海波 作品数:9 被引量:26 H指数:3 供职机构: 中南大学湘雅二医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
调节性T细胞在小鼠肥胖早期的数量变化及其对内脏脂肪巨噬细胞亚型的调节作用 被引量:1 2016年 目的探讨调节性T细胞(Tregs)在肥胖小鼠的变化及其对脂肪巨噬细胞的调节。方法建立C57BL/6小鼠的肥胖模型,分别在4、10和20周龄观察代谢指标,脾脏内Tregs和脂肪组织内M1/M2型巨噬细胞的数量。用雷帕霉素干预肥胖小鼠,观察其刺激Tregs后对代谢和脂肪炎症的影响。结果 C57BL/6小鼠在20周龄时建成早期肥胖模型,肥胖组小鼠的附睾旁脂肪质量和瘦素水平显著高于对照组(P<0.05),但两组血糖和胰岛素水平差异均无统计学意义(P均>0.05),同时,肥胖小鼠脂肪巨噬细胞数量增加,而Tregs呈下降趋势。雷帕霉素干预可使脾脏内Tregs数量显著增加,且伴有代谢紊乱的改善和脂肪M1/M2比例降低。结论肥胖早期Tregs数量的下降可能与脂肪巨噬细胞的浸润及亚型分布异常有关。 李霞 汤晓涵 唐丽丽 俞海波 谢志国 周智广关键词:肥胖 调节性T细胞 巨噬细胞 内脏脂肪组织 高糖和高脂饮食对小鼠肥胖和内脏脂肪的影响 被引量:14 2014年 目的探讨高脂和高糖饮食对小鼠肥胖和内脏脂肪的不同影响。方法将4周龄C57BL/6小鼠按随机数字表法分为正常饮食组、高脂饮食组和高糖饮食组,喂养至20周龄,比较各组体重、附睾旁脂肪重量、瘦素、脂肪肝程度、附睾旁脂肪组织巨噬细胞及其亚型的浸润和单核细胞趋化蛋白-1 mRNA的表达。结果 20周时高脂饮食组小鼠体重、附睾旁脂肪重量、瘦素水平较正常饮食组均显著升高(P均<0.05),油红O染色显示高脂饮食组肝脏脂肪浸润明显。20周时高糖饮食组在体重、附睾旁脂肪重量、瘦素水平与对照组相比差异均无统计学意义(P均>0.05)。高脂饮食组小鼠脂肪内巨噬细胞的浸润增加,且M2的比例较高糖饮食组显著降低(P<0.05)。高脂饮食组小鼠附睾旁脂肪中单核细胞趋化蛋白-1 mRNA的表达较正常饮食组显著上调(P<0.05),而高糖饮食组与正常饮食组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论高脂饮食,而不是高糖饮食,可导致肥胖和内脏脂肪组织内巨噬细胞的炎症浸润。 唐丽丽 汤晓涵 李霞 俞海波 谢志国 刘新元 周智广关键词:脂肪组织 高脂饮食 高糖饮食 肥胖 自身免疫糖尿病患者外周血单个核细胞miR-142和miR-143表达的研究 被引量:4 2019年 目的探讨自身免疫糖尿病患者(ADM),包括经典1型糖尿病(T1DM)和成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA),以及2型糖尿病患者(T2DM)和健康对照外周血单个核细胞(PBMC)的microRNA(miRNA)表达水平。方法收集2015年1月至2016年12月在中南大学湘雅二医院就诊的糖尿病患者及健康体检中心体检的健康对照人群,研究对象分为两批,分别进行高通量测序初筛差异表达的miRNA,以及对miR-142和miR-143的表达进行实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)验证。结果(1)T1DM患者、LADA患者、T2DM患者以及健康对照的PBMC中miRNA的表达存在差异;(2)与T2DM患者和健康对照相比,LADA和T1DM患者PBMC中的miR-142-5p表达下调,而miR-143-3p表达上调;(3)RT-qPCR验证实验显示,miR-142-5p在LADA患者中表达水平较T2DM患者显著下调。miR-143-3p在T1DM患者和LADA患者中表达量较T2DM患者和健康对照有升高趋势,但差异无统计学意义。结论(1)T1DM患者、LADA患者、T2DM患者以及健康对照的PBMC中miRNA的表达存在差异;(2)miR-142-5p和miR-143-3p的异常表达可能通过影响细胞凋亡和免疫细胞分化参与ADM发生发展。 谢志国 李蒙禹 俞海波 段仙兰 黄干 周智广关键词:自身免疫糖尿病 外周血单个核细胞 微小核糖核酸 初步探讨脐血多能干细胞对儿童青少年1型糖尿病患者免疫功能和NOD小鼠血糖的影响 俞海波 李霞 彭亚妮 张晓莉 肖潇雨 程靳 何斌斌 游晓萍 段仙兰 黄干 赵勇 周智广细胞免疫治疗的研究进展及应用 被引量:1 2017年 自身免疫性疾病(AID)和肿瘤的发病率高,严重影响患者的生存质量和寿命。近年来,细胞免疫治疗取得了巨大进展,已成为AID和肿瘤治疗的重要发展方向。越来越多的研究表明细胞免疫治疗能缓解甚至逆转AID和肿瘤的疾病进程。本文简要概述了细胞免疫治疗在AID和肿瘤研究中的进展和临床应用潜能。 俞海波 周智广关键词:免疫疗法 组织疗法 脐血多能干细胞免疫教育治疗青少年1型糖尿病 被引量:2 2017年 1型糖尿病(T1DM)是遗传易感因素与环境因素相互作用,主要由T细胞介导、多种免疫细胞参与反应,进而导致胰岛β细胞破坏和胰岛素缺乏的自身免疫性疾病。基础和临床研究发现,脐血多能干细胞通过细胞相互接触及分泌可溶性细胞因子,恢复T1DM患者的免疫平衡、诱导免疫耐受、阻止胰岛β细胞损伤和促进胰岛β细胞再生。近年来,本中心率先开展了脐血多能干细胞教育治疗35例来自国内外的青少年T1DM的临床研究,期望能为其治疗提供新手段。 彭亚妮 俞海波 赵勇 周智广关键词:多能干细胞 糖尿病 CASP1基因rs1785882多态性与汉族人群1型糖尿病相关性研究 2022年 目的探讨中国汉族人群半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(CASP1)基因单核苷酸多态性rs1785882与经典T1DM的相关性。方法本研究为病例对照研究,采用质谱法对就诊于中南大学湘雅二医院代谢内分泌科的510例经典T1DM患者(T1DM组)和本地区531名无血缘关系的健康对照(NC组)的CASP1基因rs1785882位点进行基因分型。比较两组基因型及等位基因频率分布。结果基因型TT、TA、AA在T1DM组分布频率为16.3%、47.8%、35.9%,在NC组分布频率为14.9%、46.7%、38.4%,两组间差异无统计学意义。等位基因T、A在T1DM组频率为40.2%、59.8%,在NC组频率为38.2%、61.8%,两组间差异无统计学意义。结论 CASP1基因rs1785882多态性与中国汉族人群经典T1DM不相关。 庞海鹏 孙肖霄 林健 罗说明 俞海波 黄干 李霞 谢志国 周智广关键词:糖尿病 多态性 单核苷酸 体外艾塞那肽对1型糖尿病患者外周血单个核细胞的免疫调节作用 被引量:3 2017年 目的 探讨体外艾塞那肽(Exendin-4)对1型糖尿病(T1DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)的免疫调节作用.方法 通过密度梯度离心法分离11例T1DM患者外周血PBMC,体外研究Exendin-4对PBMC的作用.通过Western blotting检测胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)的表达情况;根据检测PBMC中环磷酸腺苷(cAMP)的浓度设置不同Exendin浓度干预组(0、10、100 nmol/L)及拮抗剂组[50 nmol/L Exendin 9(39)+100 nmol/L Exendin-4];实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和细胞因子微球检测技术分别测定Exendin-4干预前后细胞因子[白细胞介素(IL)10、肿瘤坏死因子(TNF)α]在胞内和上清中的变化情况.两组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析.结果(1)T1DM患者PBMC表达GLP-1R,与对照组(0 nmol/L)相比,100 nmol/L Exendin-4干预组GLP-1R表达显著上升(1.97±0.24比1;t=13.89,P〈0.05),此种效应能够被GLP-1R阻断剂Exendin-9(39)阻断(0.56±0.10比1, t=15.68,P〈0.05).(2)与对照组相比,1、10、100 nmol/L浓度Exendin-4对T1DM患者PBMC活力无明显影响(F=0.362、0.393、0.374,均P〉0.05).(3)与对照组相比,10、100 nmol/L Exendin-4上调PBMC中cAMP水平(7.51±0.01比2.56±0.01,17.21±0.04比2.56±0.01,t=19.71、32.89,P〈0.05).(4)与对照组相比,Exendin-4显著下调PBMC细胞中TNF-α mRNA及上清液中TNF-α水平(F=5.54、5.12,P〈0.05),此种效应能够被GLP-1R阻断剂Exendin-9(39)阻断(F=5.43、5.97,P〈0.05);同时Exendin-4可上调上清液中IL-10水平(F=5.95、6.01,P〈0.05).结论 Exendin-4可上调IL-10的分泌,下调TNF-α的分泌,提示其可能抑制炎症反应. 李霞 雷康 俞海波 段仙兰 彭亚妮 周智广关键词:糖尿病 免疫调节 不同的冻存方法对1型糖尿病患者胰岛抗原特异性T细胞反应的影响 被引量:1 2013年 目的:明确何种冻存方案更利于保持1型糖尿病患者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcells,PBMCs)对胰岛抗原特异性的T细胞反应,更接近于新鲜细胞的状态。方法:本研究系国际免疫学协会-T细胞工作组(IDS-TCW)牵头的国际标准化研究Freezing Study I。中南大学糖尿病中心选取5例新发的T1D患者和年龄、性别相匹配的5例正常对照。所有对象新鲜分离的PBMCs分为3份,一份进行亚型细胞的流式细胞分析和酶联免疫斑点实验(enzyme linked immunospot assay,ELISPOT),另两等份分别采用低温和室温冻存方案冻存;1个月后分别按低温和室温方案复苏,以台盼蓝染色判定细胞活力;并行流式细胞分析术和ELISPOT检测。ELISPOT中4种抗原[包括人GAD65、内对照、Pediacel(巴斯德五合一疫苗)和PMA]均由IDS-TCW中心化实验室盲法标记,盲法测定。以新鲜PBMCs为参照,比较两种冻存方案下PBMCs的复苏率和活力、各亚型细胞比例和ELISPOT检测结果。结果:1)室温冻存下的PBMCs复苏率和细胞活力均略高于低温冻存方案,但二者差异无统计学意义(分别为61.2%vs 60.1%,77.5%vs 74.9%;P>0.05);2)相比新鲜细胞,两种冻存方案均会造成一定程度的单核细胞的损失[(3.2±1.1)%(低温)和(3.0±0.9)%(室温)vs(7.0±1.1)%(新鲜);P<0.05];而CD4+T,CD8+T,B细胞,NK细胞和NKT细胞比例均无明显变化(P>0.05);3)ELISPOT检测结果显示:对多克隆刺激物PMA诱发的T细胞分泌IFN-γ的反应,在新鲜和冻存复苏细胞间无明显差异;记忆性抗原Pediacel和胰岛抗原GAD65刺激下的特异性T细胞反应在冻存复苏细胞均明显差于新鲜细胞,T1D患者新鲜细胞的GAD特异性T细胞反应的SI为5.1,均高于低温(1.3)和室温(1.4)冻存复苏的刺激指数(SI)(均P<0.05);而且仅新鲜细胞的GAD-反应性T细胞的SI和斑点数均明显高于正常对照(5.1 vs 0.9和8.1 vs 0.1,P<0.05),而两种方案下的冻存细胞的SI在患者和对照未发现差异。 杨琳 超晨 唐维 王臻 俞海波 崔秋燕 周智广关键词:1型糖尿病 T细胞 酶联免疫斑点法