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CRISPR/Cas9系统在鸡MSTN上的效率验证被引量：5: 2016年; 随着基因编辑技术的飞速发展,CRISPR/Cas9技术逐渐成为主流。为了验证CRISPR/Cas9系统在鸡基因组上的切割效率,在鸡肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因第1、第2外显子上各自筛选了5个Cas9靶点,构建p X330-sg RNA表达载体;将GFP质粒电转入DF-1细胞,通过检测表达GFP细胞的比例来优化电转程序;将载体用优化后的电转程序电转入DF-1细胞,培养72 h;最后收集细胞提取基因组,通过T7核酸内切酶Ⅰ(T7EⅠ)酶切试验,选出具有Cas9切割效率的靶点片段,将该片段连入p MD19-T载体,测序并分析结果。结果表明CRISPR/Cas9系统可以成功对DF-1细胞基因组进行切割并引入突变,其中1号外显子上4号靶点的突变率为64.3%,2号外显子上2号靶点的突变率为23.3%。研究表明CRISPR/Cas9系统在DF-1细胞中可以有效切割基因组,为CRISPR/Cas9技术应用于鸡的基因组编辑提供科学依据。; 胡曼康倩倩胡晓湘李宁; 关键词：MYOSTATIN

一种转基因猪筛选标记基因敲除的方法: 本发明属于基因工程领域，本发明提供了一种转基因猪筛选标记基因敲除的方法，利用猪精子特异诱导启动子启动Cre/loxP位点特异重组酶系统，建立的自我剪切元件PCN，正常进行打靶筛选阳性克隆，进行SCNT获得founder阳...; 李宁孙照霖康倩倩吴森李秋艳温啸赵蕊

用于剔除标记基因的融合蛋白及其应用: 本发明涉及基因工程，具体公开了一种用于剔除标记基因的CPP5‑Cre融合蛋白及其应用，所述CPP5‑Cre融合蛋白包括短的5氨基酸细胞穿膜肽CPP5（KLPVM）和位点特异重组酶Cre蛋白。利用表达纯化后的CPP5‑Cr...; 李宁孙照霖康倩倩李秋艳赵蕊孙永川; 文献传递

用于剔除标记基因的融合蛋白及其应用: 本发明涉及基因工程，具体公开了一种用于剔除标记基因的CPP5-Cre融合蛋白及其应用，所述CPP5-Cre融合蛋白包括短的5氨基酸细胞穿膜肽CPP5（KLPVM）和位点特异重组酶Cre蛋白。利用表达纯化后的CPP5-Cr...; 李宁孙照霖康倩倩李秋艳赵蕊孙永川

一种转基因猪筛选标记基因敲除的方法: 本发明属于基因工程领域，本发明提供了一种转基因猪筛选标记基因敲除的方法，利用猪精子特异诱导启动子启动Cre/loxP位点特异重组酶系统，建立的自我剪切元件PCN，正常进行打靶筛选阳性克隆，进行SCNT获得founder阳...; 李宁孙照霖康倩倩吴森李秋艳温啸赵蕊; 文献传递

SERCA2介导的UCP1非依赖性产热途径研究及物种间比较: 哺乳动物脂肪细胞可以分成白色脂肪细胞、褐色脂肪细胞和米色脂肪细胞。其中白色脂肪主要以甘油三酯的形式储存过剩能量,褐色脂肪和米色脂肪可以通过非颤抖性产热作用将能量转化成热量。有研究表明,下丘脑促进交感神经释放去甲肾上腺素,...; 康倩倩; 关键词：产热; 文献传递

一种猪促卵胞激素β-亚基的编码基因FSHβ及其筛选方法: 本发明涉及一种猪促卵胞激素β-亚基的编码基因FSHβ，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过构建二花脸猪基因组BAC文库，获得猪促卵胞激素β-亚基的编码基因FSHβ全基因序列，并构建BAC真核表达载...; 李宁李秋艳王明孙照霖康倩倩; 文献传递

一种猪促卵胞激素α-亚基的编码基因FSHα及其筛选方法: 本发明涉及一种猪促卵胞激素α-亚基的编码基因FSHα，所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过构建二花脸猪基因组BAC文库，获得猪促卵胞激素α-亚基的编码基因FSHα全基因序列，并构建BAC真核表达载...; 李宁李秋艳王明孙照霖康倩倩; 文献传递

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康倩倩