金海啸
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 供职机构：河南大学医学院神经生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学更多>>
- 酒精诱导小鼠海马齿状回神经细胞的增殖:神经酰胺的可能作用被引量：5
- 2011年
- 本文旨在探讨神经酰胺(ceramide,Cer)在酒精诱导神经细胞增殖及新生神经元形成过程中的作用及机制。因为Cer主要的代谢途径是经神经鞘磷脂合成酶(sphingomyelin synthase,SMS)作用转化成神经鞘磷脂(sphingomyelin,SM),所以我们用SMS2基因敲除(sphingomyelin synthase2knockout,SMS2/)和野生型(wild type,WT)雌性小鼠建立孕期酒精暴露模型,将模型孕鼠所生仔鼠作为研究对象。用酶学法检测仔鼠SM水平,利用免疫荧光染色法观察各组仔鼠齿状回神经细胞增殖、新生神经元及蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)在脑组织中的表达,免疫印迹技术检测出生后7天(postnatal day7,P7)仔鼠海马组织PKCα蛋白的相对表达量。结果显示,由于SMS2基因的缺失,SMS2/P0仔鼠血液SM水平明显低于WT仔鼠(P<0.01)。无论SMS2/还是WT P0仔鼠,酒精暴露剂量依赖性地降低其血液SM水平降低。无论SMS2/仔鼠还是WT仔鼠,其齿状回神经细胞增殖的数量及新生神经元随年龄的增长而减少且一直持续到成年。在P0、P7、P14和P30时间点,与WT仔鼠相比,SMS2/仔鼠齿状回神经细胞增殖的数量及新生神经元较多(P<0.05);酒精暴露可剂量依赖性地增加两基因型仔鼠齿状回神经细胞增殖的数量及新生神经元。PKCα是神经酰胺-神经酰胺-1-磷酸(Cer-C1P)通路中重要的激活蛋白,其表达于胞膜及胞核,在海马、齿状回、脑皮质中均有表达;与WT P7仔鼠相比,SMS2/P7仔鼠海马组织PKCα蛋白的表达量较低(P<0.05);而酒精暴露可剂量依赖性地增加两基因组仔鼠海马组织PKCα蛋白的表达量。以上结果提示,孕期酒精暴露能够诱导神经细胞发生代偿性增殖及新生神经元的形成,Cer-C1P通路参与酒精诱导细胞增殖的过程;同时,PKCα是Cer-C1P通路中重要的激活蛋白,可上调C1P调控酒精诱导神经细胞增殖及新生神经元形成的作用。
- 邓同兴王志新高晓群石渊渊马战友金海啸邓锦波
- 关键词：神经酰胺神经细胞增殖
- 医学生物化学和生物化学检验教学改革初探
- 2011年
- 医学生物化学及检验是医学检验专业的主干课程之一,也是一门发展非常迅速的应用性学科。通过改革实验教学模式和方法,优化重组实验教学内容,增加了综合性、创新设计性实验的比例。同时,导入案例教学法,改革实验教学考核方式,探索以问题和课题为核心的教学模式改革,调动了学生学习的积极性和创造性,学生得到了创新性科学研究的锻炼,培养了学生独立思维能力和初步从事临床检验的能力。
- 牛艳丽文曙光臧建峰金海啸马战友
- 关键词：医学生物化学实验教学教学模式
- 小鼠Cajal-Retzius细胞发生及其细胞周期相关蛋白的表达被引量：1
- 2013年
- 目的观察小鼠Cajal-Retzius(CR)细胞的发生以及多种细胞周期相关蛋白的表达情况。方法各日龄共计83只小鼠,应用免疫荧光法、溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)等技术对胚胎和出生后小鼠进行实验。结果1.CR细胞在E10和E11发生,它们主要分布在新皮质分子层和海马分子层,其密度随日龄的增长而逐渐降低。2.从E15到成年,细胞周期蛋白(cyclin)A2、cyclin E1和CDT1在CR细胞中持续表达,但始终未发现cyclin D1阳性的CR细胞。结论 CR细胞对大脑发育有重要作用。CR细胞密度的减小趋势与新皮质发育的活跃程度相关。CR细胞已经退出了细胞周期而进入了G0期。如果CR细胞再次分裂,它们会因其轴突无法吸收并反向运输神经营养因子而凋亡。
- 金海啸符星孔维芳马战友高文静邓锦波
- 关键词：大脑皮质发育免疫荧光小鼠
- 小鼠视网膜片层化及神经干细胞的增殖与分化被引量：1
- 2013年
- 目的通过观察小鼠视网膜神经干细胞增殖与双极细胞分化过程,研究视网膜的发生及片层化。方法应用免疫荧光、5’-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)检测技术和HE染色法对胚胎及出生后小鼠视网膜形态结构及神经干细胞的增殖、分化进行观察,对视网膜BrdU和蛋白激酶Cα(PKC-α)阳性细胞密度进行统计。结果 1.小鼠视网膜在胚胎时期分化出色素上皮层、神经母细胞层和神经节细胞层。出生后,神经母细胞层逐渐分化出各个层,至小鼠睁眼时基本分化完全。2.小鼠视网膜干细胞在胚胎期大量增殖,出生后增殖放慢并逐渐分化为各类细胞。经统计分析发现,视网膜干细胞在胚胎时期数量逐渐增多,到出生当天数量达到最大值,出生后,神经干细胞开始分化,数量逐渐减少。3.小鼠视网膜双极细胞从出生后第5天(P5)开始发育,至P20时发育完全。结论小鼠视网膜的片层化与其功能的成熟相一致,视网膜的神经干细胞在出生后前期为分化高峰期,逐渐分化为不同类型的细胞。P10以后仅在睫状体处存在神经干细胞,可能与成年以后的修复功能相关。
- 孔维芳周洁金海啸薛帅邓锦波
- 关键词：双极细胞神经干细胞视网膜免疫荧光小鼠
- 小鼠Cajal-Retzius细胞发生及其细胞周期相关蛋白的表达
- Cajal-Retzius(CR)细胞在新皮质和海马的发育中起着非常重要的作用，它们最主要的作用就是利用自己的胞外分泌蛋白Reelin促使皮质片层化。CR细胞也能够维持放射状神经胶质细胞的细胞形态，防止其过早转化为星形胶...
- 金海啸
- 关键词：大脑皮质发育免疫荧光技术小鼠
- 文献传递
- 海马微环境对细胞分化和极性化的影响被引量：6
- 2013年
- 目的观察海马脑片微环境对不同分化程度细胞的极性和分化的影响。方法将小鼠的海马脑片与5种不同分化程度的细胞(肝癌细胞、正常肝脏细胞、PC12细胞、正常神经细胞和骨髓间充质干细胞)进行共同培养,观察细胞的分化和极性产生情况。结果与对照组相比,与海马脑片共培养的细胞数量明显减少。共培养的细胞在海马脑片上的分布有一定的规律,主要集中锥体细胞层和颗粒细胞层,其他地方分布均匀,类似于脑片片层化的构筑。海马微环境下低分化的细胞受海马脑片微环境的影响可以产生极性并分化,高分化的细胞不能产生极性。结论海马微环境对细胞的极性和分化有促进作用,对生长和分裂有抑制作用,细胞的极性变化与自身和所处的微环境有关,特别对低分化的细胞极性和分化的影响较大。
- 符星石贞玉金海啸文亚男范媛媛邓锦波
- 关键词：细胞分化细胞极性小鼠
- 发育过程中Pax6基因的表达以及小鼠大脑皮质片层化的形成被引量：1
- 2013年
- 目的：研究大脑新皮质发育过程中Pax6的表达模式以及片层化的形成特点。方法：应用石蜡切片技术、免疫荧光等技术对胚胎和出生后小鼠（E15-P90）进行研究。结果：Pax6基因在小鼠大脑内的表达起始于胚胎时期，表达在室管下层干细胞内，随着年龄的增长，干细胞开始分化为神经元，新生神经元向皮质边缘迁移，最终形成皮质板，Pax6的表达也随之迁移，且表达量逐渐减少。Foxp2最早出现在纹状体，随后强烈表达在皮质板（第Ⅴ-Ⅵ层）。结论：Pax6基因与大脑皮质的形成以及神经干细胞的发生有关。Foxp2可作为神经元的一种标记物，特异性的标记新皮质第Ⅴ-Ⅵ层神经元。标记显示小鼠大脑新皮质片层化的过程先后经历细胞增殖、分化、迁移过程，同时还伴随着皮质板锥体细胞的成熟。
- 曹原朱旭东张文玲金海啸臧建锋邓锦波
- 关键词：PAX6大脑皮质免疫荧光技术小鼠
- 孕期酒精暴露诱导神经鞘磷脂合成酶2基因敲除小鼠海马苔藓细胞凋亡被引量：3
- 2012年
- 目的探讨神经酰胺对孕期酒精暴露所诱导的小鼠神经细胞凋亡的影响。方法建立神经鞘磷脂合成酶2基因敲除(SMS2-/-)小鼠和野生型(WT)小鼠的孕期酒精暴露模型,将出生后的不同基因型仔鼠(共360只)分为对照组和酒精组。用酶学法检测生后0 d(P0)仔鼠血清神经鞘磷脂(SM)含量,利用免疫荧光染色法观察对照组与模型组各年龄点仔鼠齿状回苔藓细胞凋亡数量的变化,免疫印迹法检测P7、P14仔鼠海马组织Caspase-8、Caspase-3激活蛋白的相对表达量。结果酒精暴露后仔鼠血清SM水平降低,且具有剂量依赖性(F=41.08,P<0.05);SMS2-/-仔鼠血清SM水平低于同组WT仔鼠(F=53.34,P<0.01)。酒精诱导WT和SMS2-/-仔鼠苔藓细胞凋亡(F=15.61,P<0.05),有剂量依赖性和长时程效应,与同年龄、相同处理条件的WT仔鼠相比,SMS2-/-仔鼠苔藓细胞凋亡数量较多(F=11.72,P<0.05)。Western blotting检测结果与免疫荧光结果一致。结论 SMS2基因缺失使血清SM水平降低,可引起神经酰胺在体内蓄积;神经酰胺促进酒精暴露诱导神经细胞凋亡的过程;孕期酒精暴露主要通过死亡受体途径诱导神经细胞凋亡的发生。
- 马战友贺维亚高林鲁广秀刘大建金海啸邓锦波
- 关键词：神经酰胺免疫印迹法基因敲除小鼠
