郑亦男 作品数:20 被引量:61 H指数:4 供职机构: 中山医科大学 更多>> 发文基金: 中国博士后科学基金 国家教育部博士点基金 国家教育部“211”工程 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
抗血吸虫生殖免疫的研究进展 被引量:1 1999年 血吸虫抗生殖免疫是当今控制血吸虫病的一个新的研究热点。本文就减毒尾蚴、未成熟虫卵可溶性抗原、谷胱苷肽-S-转移酶(GST)、卵壳蛋白、31/32KDa抗原、铁蛋白、原肌球蛋白、副肌球蛋白等具有抗生殖免疫效应的抗原、其基因序列及氨基酸序列分析等作一综述。 郑亦男 吴忠道 余新炳关键词:血吸虫 抗原 用表达序列标签(EST)法发现日本血吸虫新基因 <正>目的:寻找日本血吸虫新基因,充实血吸虫基因组计划的研究.方法:随机挑选日本血吸虫(中国江西株)成虫cDNA文库克隆,培养后提取噬菌体DNA作模板,进行PCR反应扩增,将扩增产物部分测序产生表达序列标签(EST),并... 李焱 余新炳 吴忠道 李晖婷 郑亦男 周俊梅关键词:日本血吸虫成虫 文献传递 用表达序列标签(EST)法发现日本血吸虫新基因的研究 被引量:2 2001年 李焱 余新炳 吴忠道 李辉婷 郑亦男 周俊梅关键词:日本血吸虫 基因组计划 EST DNA 日本血吸虫大陆株卵黄铁蛋白基因重组及其真核表达 2001年 目的 构建日本血吸虫卵黄铁蛋白基因 (Sj Yol Fer)的真核表达重组质粒 p L Yol Fer,转染 Hela细胞进行表达 ,并对表达产物进行鉴定。 方法 用 PCR法从日本血吸虫大陆株成虫 c DNA文库中扩增目的基因片段 ,经 RNA斑点杂交显示转录差异 ,然后定向克隆入表达载体 p L XSN。转染重组体到 Hela细胞中进行表达 ,并用 SDS- PAGE和 Westernblot分析表达产物。 结果 PCR扩增产物大小约 6 0 0 bp左右 ,与雌虫 RNA的杂交信号明显强于雄虫。获得重组质粒p L Yol Fer,特异性表达产物约为 2 1ku,能被日本血吸虫感染兔血清及小鼠血清识别。 结论 为进一步免疫原性实验奠定了基础。 周俊梅 余新炳 吴忠道 李焱 郑亦男关键词:日本血吸虫 基因克隆 基因表达 日本血吸虫26ku谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆及分析 被引量:2 2000年 【目的】扩增日本血吸虫 2 6ku谷胱甘肽硫 转移酶 (Sj2 6GST)基因片段 ,构建其重组原核载体 ,以研制SjGST重组克隆。【方法】根据已知基因序列设计一对引物 ,运用RT PCR技术扩增Sj2 6GST目的基因cDNA片段 ,将其克隆到 pBlue script(KS)质粒中 ,并经酶切、PCR和测序鉴定。【结果】获得GST pBluescript(KS)重组克隆。【结论】本实验获得Sj2 6GST重组克隆 ,为进一步研制基因工程蛋白疫苗作准备。 李焱 余新炳 吴忠道 冯新港 罗树红 徐劲 周俊梅 郑亦男关键词:日本血吸虫 基因扩增 日本血吸虫(中国大陆株)表达基因的EST序列测定及同源性分析 <正>目的:运用表达序列标签技术(EST方法),从Sj cDNA文库中分离、监定和测定血吸虫表达基因序列.方法:应用EST方法,从SjcDNA文库中随机挑选出单个重组克隆进行PCR直接序列分析,通过互联网将获得的EST序... 李晖婷 余新炳 吴忠道 李焱 郑亦男 周俊梅关键词:CDNA文库 表达基因 表达序列标签 文献传递 EST法筛选日本血吸虫表达基因序列的研究 被引量:2 1999年 本文运用表达序列标签法(EST)筛选日本血吸虫(中国江西株)成虫cDNA文库,将得到的EST序列送入GenBank和EBI进行同源性分析检索,获得30个日本血吸虫基因EST,今后寻找新的抗血吸虫疫苗侯选分子及研制新的化疗药物奠定一定的工作基础。 李焱 余新炳 吴忠道 李晖婷 郑亦男 周俊梅关键词:日本血吸虫 基因表达 PCR 克隆 日本血吸虫卵壳蛋白基因的筛选及EST序列测定 被引量:1 1999年 目的 通过对日本血吸虫(Sj)成虫cDNA文库的核酸杂交筛选,分离出Sj卵壳蛋白相关基因的cDNA克隆,并进一步探讨该基因的结构与功能关系。方法 用地高辛标记的特异性寡核苷酸探针对Sj成虫cDNA文库进行膜原位杂交筛进,挑选出阳性克隆,用通用引物进行PCR扩增,获得cDNA插入片段,采用PCR直接序列测定法,对其部分序列进行测定,而后将EST序列输入GENEBANK进行同源性检索和分析。结果 本实验从Sj cDNA文库筛选到9个不同的阳性克隆,用通用引物扩增出9十分子量大小不同的单一条带,其中两个为已知序列,其余7个为新的EST序列。结论 用寡核苷酸标记探针对Sj文库中进行校酸杂交筛选是寻找特定目的基因的有效方法。 郑亦男 余新炳 吴忠道 周俊梅 李焱关键词:日本血吸虫 EST序列 基因 噬菌体 日本血吸虫卵黄铁蛋白基因重组质粒pLXSN-Sj YF的构建 1999年 目的 构建日本血吸虫pLXSN-Sj YF重组质粒,为进一步在细胞中表达及DNA免疫作准备。方法 用PCR技术从日本血吸虫雌性成虫基因组中扩增编码卵黄铁蛋白(yolk ferritin,YF)的基因片段,定向克隆入逆转录病毒载体PpLXSN,经氨苄LB培养基筛选.酶切、RCR鉴定。结果 从日本血吸虫雌性成虫基因组中扩增出特异的卵黄铁蛋白基因片段,成功克隆pLXSN-Sj YF重组质粒。结论 构建成功pLXSN-Sj YF重组质粒.为下一步研究奠定了基础。 周俊梅 余新炳 吴忠道 郑亦男 李焱关键词:日本血吸虫 基因重组 日本血吸虫(中国大陆株)表达基因的大规模随机测序体系的建立 被引量:3 1999年 目的:建立日本血吸虫(中国大陆株)表达基因的大规模随机测序体系。方法:应用EST方法,从Sj cDNA文库中随机挑选出单个重组克隆进行PCR直接序列分析,通过互联网将获得的EST序列送入WHO血吸虫基因库进行同源性检索。筛选出血吸虫未知基因EST,并克隆其全长cDNA。结果:完成了140个Sj表达基因EST序列测定,获得了100个可用于分析的EST序列,并在Genbank登录。其中已知血吸虫编码基因或EST序列46个,未知基因54个。结论:成功地建立日本血吸虫(中国大陆抹)表达基因的大规模随机测序体系,为进一步开最日本血吸虫(中国大陆株)表达基因的研究奠定了基础。 吴忠道 余新炳 李焱 郑亦男 李晖婷 周俊梅 方建民 徐劲关键词:日本血吸虫 EST CDNA文库 分子生物学