赵换军
- 作品数：8 被引量：13H指数：3
- 供职机构：天津医科大学研究生院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人外分泌汗腺细胞分离方法的优化被引量：1
- 2015年
- 目的:优化人外分泌汗腺细胞的分离方法,以高效地提取外分泌汗腺细胞。方法:新鲜的皮肤样本剪成组织微粒(大小约1 mm3),A组采用胰蛋白酶-乙二胺四乙酸(EDTA)和胶原酶Ⅱ型(2 mg/ml)体积分数1∶1混合的方法;B组采用传统消化方法,即胶原酶Ⅱ型;C组采用胰蛋白酶-EDTA消化的方法,三组同时置于恒温培养箱内,比较三种方法处理后汗腺细胞团的获取情况。将挑取的汗腺细胞团种于培养皿内,观察细胞贴壁和生长情况,并用流式细胞仪测定各组细胞的增殖指数,最后进行免疫细胞化学检测汗腺细胞标志性蛋白的表达。结果:A组和C组在消化30 min后,镜下可见少部分的汗腺细胞团,2 h后A组游离汗腺细胞团明显增多,C组游离汗腺细胞团很少;B组在消化6 h后,才出现部分游离的汗腺细胞团。将汗腺细胞团培养3 d后发现C组汗腺细胞贴壁情况差、成活细胞少;A组和B组的汗腺细胞贴壁情况良好,培养9 d后呈"铺路石样"生长,细胞增殖指数分别为(18±4)%和(17±6)%,无明显差异,免疫细胞化学结果表明:两组细胞癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白7(CK7)表达均为阳性。结论:胰蛋白酶-EDTA和Ⅱ型胶原酶联合消化法能明显缩短汗腺细胞的分离时间,且不影响细胞的活性和增殖特性。
- 赵换军赵洪良谭志军陈艳许永安张茂张翠萍付小兵
- 关键词：汗腺胰蛋白酶胶原酶
- 角蛋白15在表皮干细胞中作用的研究进展被引量：1
- 2015年
- 正常表皮细胞包括表皮干细胞、短暂增殖细胞和其他角质细胞,以表皮干细胞为主的基底层不断增生分化并向上迁移[1].表皮干细胞是表皮基底部具有不断增殖和分化能力的干细胞,对于维持表皮的自我更新和完整性具有重要意义[2].角蛋白是表皮细胞的结构蛋白,是一类具有支撑和保护功能的纤维状蛋白质,它们通过直径为10nm的微丝在细胞内形成广泛的网状结构.不同分化程度的表皮细胞表达不同的角蛋白,目前已知的角蛋白有49种,包括34种细胞角蛋白和15种毛发角蛋白.
- 赵阿龙张翠萍赵洪良赵换军谭志军付小兵
- 关键词：表皮干细胞表皮细胞增殖细胞分化能力细胞角蛋白角质细胞
- 人外分泌汗腺细胞分离方法的优化
- 目的：优化人体外外分泌汗腺细胞分离的方法,以高效地提取原代汗腺细胞.方法：新鲜的皮肤组织标本经过D-hank's液漂洗后,剪成组织微粒(大小约1mm3),A组使用胰蛋白酶-EDTA(胰蛋白酶0.25％,EDTA ...
- 赵换军张翠萍付小兵
- 关键词：汗腺细胞胰蛋白酶
- 胰酶-EDTA差速消化法纯化原代培养的汗腺细胞被引量：3
- 2013年
- 目的：探讨胰酶-EDTA差速消化法纯化原代培养的汗腺细胞的效果.方法：取新鲜的腹部手术患者腹部皮肤,D-Hanks液浸洗去除皮肤中的血液,剪成1 mm×1 mm大小的皮粒,将剪碎的皮粒放入装有5 ml （2 mg/ml） 的Ⅱ型胶原酶的培养皿中,置于37 ℃、5%CO2孵箱中消化8-12 h,倒置相差显微镜直视下吸取游离的汗腺,用汗腺培养基培养5-7 d,观察细胞形态和生长状况,加入胰酶-EDTA混合溶液2 ml（胰蛋白酶0.25,EDTA 0.53 mol/L）消化3 min,成纤维细胞收缩变圆后立即加入胎牛血清5 ml终止消化,吸弃消化液,D-Hanks冲洗2~3次,加入5 ml含10%胎牛血清DMEM培养液继续培养.镜下观察成纤维细胞去除效果,并对纯化后的细胞进行免疫细胞化学鉴定.结果：汗腺分离培养5-7 d后,汗腺细胞呈铺路石样生长,并且汗腺细胞周围生长有大量的成纤维细胞;用胰酶-EDTA消化3 min后,细胞计数显示约有95%以上的成纤维细胞被去除;免疫细胞化学鉴定结果显示纯化后的细胞CEA和CK8染色阳性,而波形蛋白和成纤维细胞特异性蛋白染色阴性.结论：胰酶-EDTA差速消化法能够简单、快速、高效地纯化汗腺细胞.
- 谭志军陈艳赵洪良赵换军孙同柱马奎张翠萍付小兵
- 关键词：纯化成纤维细胞
- DNA甲基化对干细胞分化的影响及其作用方式被引量：5
- 2013年
- 在生物不断进化的过程中,哺乳动物的组织表型高度分化,功能更加特异,其潜在的多能性也被局限化[1].干细胞作为具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体,因其多潜能分化特性在组织再生与修复领域中备受关注[2,3].表观遗传学是指在DNA序列不变的前提下,编码基因顺序改变对基因表达和细胞表型所产生的影响,它主要包括DNA甲基化（methylation）、组蛋白修饰、基因印记以及非编码RNA等内容.DNA甲基化 在干细胞分化调控、维持细胞正常功能、细胞发育、X染色体失活以及基因印记等过程中起着重要作用[4,5].本文主要就DNA甲基化对于干细胞分化的调控作用进行综述,包括DNA甲基化对干细胞分化潜能的影响,DNA甲基化对基因表达的调节方式与调控机制等,为干细胞生物学与再生医学研究提供一定的参考.
- 赵换军赵洪良张翠萍付小兵
- 关键词：DNA甲基化干细胞分化多向分化潜能细胞分化调控干细胞生物学X染色体失活
- DNA去甲基化与间充质干细胞的分化调控
- 2016年
- 间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSCs）是一种重要的多能干细胞干细胞,来源于发育早期的中胚层和外胚层,在体内或体外特定的诱导条件下,可分化为多谱系细胞,如心肌、骨、软骨、肌肉和脂肪等多种组织,因其可用于修复损伤组织及治疗某些遗传缺陷性疾病而具有广阔的临床应用前景,所以近年来成为基础和临床医学的研究热点,并取得了丰硕的成果[1].
- 赵洪良张翠萍陈艳赵换军谭志军付小兵
- 关键词：间充质干细胞分化调控去甲基化DNA多能干细胞缺陷性疾病
- 人骨髓间充质干细胞与其来源的汗腺样细胞微小RNAs差异表达谱分析被引量：3
- 2015年
- 目的 分析入骨髓间充质干细胞（hBM-MSCs）与其来源的汗腺样细胞微小RNAs（miRNAs）差异表达谱.方法 采用成骨、成脂细胞诱导分化液诱导hBM-MSCs分化,油红O和茜素红染色分别进行鉴定.当原代汗腺细胞密度达到70％～ 80％时进行热休克处理,然后将其与hBM-MSCs通过Transwell进行共培养诱导;10 d后分别提取hBM-MSCs和其诱导分化的汗腺样细胞的总RNA,纯化标记后,进行miRNAs杂交和数据分析以及靶基因预测.进一步采用实时荧光定量PCR验证芯片结果的可靠性.结果 差异表达水平绝对值＞2倍的miRNAs有68个,其中上调的19个,下调的49个;其中13个表达水平发生显著变化,差异表达水平＞5倍（miRNA-132-3p、-4467、-4484、-146a-5p、-6126等5个上调;miRNA-708-5p、-138-5p、-6812-5p、-138-1-3p、-1281、-3157-3p、-4298、-4459等8个下调）.靶向汗腺发育相关通路核因子κB、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶、Wnt/β-连环蛋白和外胚叶发育不全基因/外胚叶发育不全基因受体的miRNAs有18个.其中上调的miRNA-146a-5p和下调的miRNA-6812-5p验证结果与芯片结果具有一致性.结论 hBM-MSCs与其来源的汗腺样细胞之间有明显的miRNAs差异性表达,其中13个差异表达＞5倍的miRNAs和18个与汗腺发育通路有关的miRNAs可能在hBM-MSCs向汗腺样细胞分化过程中有重要的调控作用.
- 谭志军陈艳赵洪良赵换军赵阿龙赵智亮孙梦黎马奎张翠萍付小兵
- 关键词：间质干细胞汗腺微RNAS
- 人骨髓间充质干细胞转分化为汗腺样细胞的DNA甲基化调控机制
- 目的: (1)优化人外分泌汗腺细胞（sweat gland cells，SGCs）的分离方法，以高效地获取原代汗腺细胞。 (2)建立体外诱导人骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）向汗腺样细胞分化的共培养体系，并观察诱导...
- 赵换军
- 关键词：汗腺细胞骨髓间充质干细胞DNA甲基化表观遗传
- 文献传递
