袁俐
- 作品数:98 被引量:201H指数:8
- 供职机构:石河子大学医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家大学生创新性实验计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 结核分枝杆菌耐链霉素与rpsL和rrS基因的相关性研究被引量:3
- 2008年
- 为探讨新疆地区结核分枝杆菌对链霉素(streptomycin,STR)产生耐药性的分子机制,建立直接快速检测结核杆菌STR药物敏感性的方法。应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)银染分析技术,检测62株结核杆菌临床分离株链霉素耐药性及rpsL和rrS基因变异情况,以结核分枝杆菌标准株(H37Rv)为对照。结果发现62株结核杆菌临床分离株中,32株STR敏感株的rpsL和rrS基因未见SSCP泳动异常,30株STR耐药株中,23株(76.7%)中rpsL(21株)和rrS(5株)基因出现SSCP泳动异常,并且3株出现了rpsL和rrS双基因的SSCP泳动异常。因此,rp-sL和rrS基因突变可能是结核分枝杆菌对链霉素产生耐药性的重要分子机制,PCR-SSCP银染技术可作为快速检测结核杆菌STR药物敏感性的方法。
- 李奇凤张向晖杜燕李宏王远志袁俐
- 关键词:结核分枝杆菌链霉素RPSL耐药性
- 结核分枝杆菌标准株H37Rv mazEF3基因过表达菌株的构建及初步鉴定
- 2016年
- 为构建H37Rv mazEF3基因的过表达菌株,检测过表达菌株mazEF3 mRNA表达水平。使用穿梭质粒pMV361,把mazEF3基因连入其中,构建重组质粒pMV361-mazEF3;利用电穿孔技术,将穿梭表达质粒导入H37Rv中,并将该菌涂在卡那霉素培养基上初步筛选,提取阳性菌株质粒进行PCR、双酶切后送公司测序进一步验证;检测不同电转电压下mazEF3 mRNA表达水平,寻找最佳电转电压。结果显示,成功构建H37Rv mazEF3基因的过表达菌株,PCR、双酶切后目的基因,测序结果与已知mazEF3基因比对,同源性100%。实时荧光定量检测,电转电压为2300V时,构建的过表达菌株mazEF3 mRNA表达量最高。由此可知,成功构建及初步鉴定了mazEF3 mRNA过表达菌株,电转电压为2300V时,构建的过表达菌株mazEF3 mRNA表达量最高。
- 屈艳琳赵继利刘微申爱平曹帅丽袁俐
- 关键词:结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统过表达
- 新疆南北疆两市MTB临床分离株北京家族菌株的初步鉴定
- 袁俐
- lncRNA在结核病患者外周血的差异性表达被引量:4
- 2017年
- 目的比较活动性肺结核患者、潜伏感染者与健康对照者外周血结核分枝杆菌特异性抗原刺激前后lncRNA1和lncRNA2的差异性表达,探讨其作为诊断结核分枝杆菌感染生物标志物的可能性。方法收集活动性肺结核患者、潜伏感染者和健康对照者全血,分别在特异性抗原刺激前后提取RNA,利用实时荧光定量PCR方法检测lncRNA1和lncRNA2的mRNA表达水平。应用ELISA检测血浆中IFN-γ和IL-2含量。结果结核分枝杆菌特异性抗原刺激前,结核病组、潜伏感染组全血lncRNA1相对表达量较健康对照组分别下降32%和64%;lncRNA2结核病组相对表达量是健康对照组的6.10倍;抗原刺激后,结核病组、潜伏感染组lncRNA1相对表达量较健康对照组分别下降33%和77%,lncRNA2潜伏感染组相对表达量较健康对照组下降84%。与刺激前相比,抗原刺激后健康对照组、结核病组lncRNA1相对表达量分别提高1.80倍和2.80倍,lncRNA2健康对照组、潜伏感染组分别提高3.50倍和1.86倍(P<0.05)。健康组与潜伏感染组、结核病组与潜伏感染组、健康组与结核病组lncRNA1ROC曲线下面积(AUC)分别为0.700、0.752和0.400,lncRNA2的AUC分别为0.702、0.465和0.762。在结核特异性蛋白刺激前,结核病组IFN-γ、IL-2含量均高于健康组(P<0.05),刺激后,结核病组及潜伏感染组与健康组相比较、潜伏感染组与结核病组相比较IFN-γ均增高(P<0.05)。与刺激前相比,刺激后3组IFN-γ、IL-2诱导表达量均显著增高(P<0.05)。结论活动性结核病、潜伏感染和健康对照者全血结核特异性抗原刺激前后lncRNA1和lncRNA2均出现差异性表达,结核病及潜伏感染者血浆IFN-γ含量增高。lncRNA1和lncRNA2可能是诊断肺结核感染的潜在生物标志物。
- 赵继利刘微曹帅丽屈艳琳崔庆华袁俐
- 关键词:肺结核结核分枝杆菌潜伏感染长链非编码RNA荧光定量PCR
- 一种用于结核杆菌利福平耐药快速检测的引物及其试剂盒
- 本发明公开了一种用于结核杆菌利福平耐药快速检测引物及其试剂盒,所述引物包括如下引物的至少一组:第一组:rpoBForwarD:CGCCGCGATCAAGGAGTTC?rpoBReverse:GCCCGGCACGCTCAT...
- 陈创夫曹旭东杨敏袁俐于潞杨彩虹张辉包海洋吴长新
- 文献传递
- FadD9重组蛋白在活动性肺结核诊断中的价值被引量:3
- 2020年
- 目的探讨结核分枝杆菌(MTB)Fad D9重组蛋白在活动性肺结核诊断中的价值。方法制备Fad D9重组蛋白并进行鉴定,使用C57BL/6小鼠模型评估其免疫原性。以Ag85A蛋白为阳性参照抗原,检测145例活动性肺结核患者(活动性肺结核组)、38例结核患者密切接触者(MTB密切接触组)和101名体检健康者(正常对照组)血清样本中Fad D9重组蛋白的特异性抗体水平,将Fad D9重组蛋白作为抗原与58例肺结核患者、34例非肺结核患者的全血样本37℃共孵育20~24 h后,采用γ-干扰素释放试验(IGRA)检测,将检测结果与IGRA试剂盒中的标准管进行比对,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Fad D9重组蛋白诊断结核病的敏感性和特异性。结果Fad D9重组蛋白可在C57BL/6小鼠体内引起较高水平的体液免疫反应,且与阳性参照抗原Ag85A接近。活动性肺结核组抗Fad D9抗体水平高于MTB密切接触组和正常对照组(P<0.0001),MTB密切接触组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。抗Ag85A抗体水平3组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,Fad D9重组蛋白诊断结核病的曲线下面积(AUC)为0.682,最佳临界值为0.343,敏感性为96.8%,特异性为37.5%。结论Fad D9蛋白在活动性结核病的诊断中具有一定的临床应用潜力。
- 张君丽林晨王玉臣刘军袁俐潘稚芬张鹭
- 关键词:结核分枝杆菌
- 结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统的研究进展被引量:3
- 2013年
- 毒素.抗毒素系统 ( toxin-antitoxin system, TAS)最早是作为质粒的稳定系统而发现的,这一系统依赖不稳定的抗毒素阻止活性毒素从亲和性蛋白复合物中释放出来。在应激条件下,抗毒素被蛋白酶降解或者消耗,毒素释放后干扰或改变细胞的DNA复制、ATP和细胞壁合成,介导细胞死亡或耐药持久性的形成,毒素也可以作为一种抗防御蛋白进而中和细菌中质粒的抗性。
- 申爱平袁俐
- 关键词:抗毒素结核分枝杆菌蛋白复合物DNA复制应激条件
- γδT细胞与抗结核感染免疫被引量:1
- 2010年
- γδT细胞是T细胞的一种,在机体抗结核杆菌感染中发挥重要的作用。本文通过介绍γδT细胞的发生、发育和分布、抗原识别和活化、信号传导和其所具有的功能,阐述该细胞在抗结核分枝杆菌感染免疫反应中的具体作用。
- 张辉蒋晓玲袁俐
- 关键词:ΓΔT细胞抗原识别活化细胞因子结核分枝杆菌
- 一种用于结核杆菌链霉素耐药快速检测引物及其试剂盒
- 本发明公开了一种用于结核杆菌链霉素耐药快速检测引物,所述引物包括如下引物的至少一组:RpslForward:5’—CCAACCATCCAGCAGCTGGT—3’RpslReverse:5’—ATCCAGCGAACCGCG...
- 曹旭东杨彩虹陈创夫于潞杨敏袁俐
- 文献传递
- mazEF系统及生物膜对北京基因型结核分枝杆菌生存能力的影响
- 2018年
- 目的探索生物膜形成能力、mazEF3,6,9系统的表达与北京基因型结核分枝杆菌生存力的相关性。方法检测北京、非北京基因型菌株与标准毒力株H37Rv在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力。采用PCR技术扩增上述菌株的mazE3,6,9系统,并进行基因测序;使用荧光定量PCR检测所有菌株的mazEF3,6,9基因、mazF3,6,9毒素基因和mazEF3,6,9抗毒素基因的mRNA表达水平;利用WesternBlot技术检测MazF9蛋白表达水平。结果北京基因型菌株在不同培养条件下的生存力、生物膜形成能力高于非北京基因型菌株。北京、非北京基因型菌株mazF3基因193bp处发生碱基突变,由C突变为T。在mRNA表达水平上,与H37Rv相比,北京、非北京基因型菌株中mazE3低表达;非北京菌株中mazE6低表达,mazE9高表达(P<0.05)。与非北京基因型菌株相比,北京基因型菌株中mazEF3高表达、mazE9低表达、mazF3、mazF6、mazF9高表达,mazF9蛋白高表达(P<0.05)。结论北京基因型菌株具有较强的生存力和生物膜形成能力。mazEF系统的差异表达、生物膜成膜能力强可能与北京基因型菌株生存能力强相关。
- 谢婉莹赵继利刘微杨赛丽袁俐
- 关键词:结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统生存力生物膜