董秀梅
- 作品数：32 被引量：167H指数：6
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目哈尔滨市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 一株3型牛腺病毒的分离与鉴定被引量：10
- 2011年
- 本研究于2009年由患急性呼吸道疾病牛的鼻拭子中分离获得一株病毒,经形态特征、血清学试验及PCR鉴定表明,该病毒与牛腺病毒3型(BAV-3)相似。对其E2A基因进行序列测定,并与GenBank中登录的BAV1型、3型、4型及人、绵羊、鼠等其它种属来源的腺病毒E2A基因序列进行比对及系统进化分析,结果显示该分离株与BAV-3的同源性为95.5%。经MEGA4软件分析,分离株与BAV-3验证值为100,表明其为BAV-3,并命名为BAV-3HLJ0955株。对该分离株热敏感试验表明,BAV-3 HLJ0955在56℃ 30min可被完全灭活,属于BAV第一群。这是国内首次分离获得BAV-3的报道。
- 于作朱远茂蔡红高欲燃董秀梅吕闯薛飞
- 用于检测犬细小病毒结构蛋白VP2抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种用于检测犬细小病毒结构蛋白VP2抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用。所述的致敏聚苯乙烯纳米微球的表面偶联有犬细小病毒重组VP2蛋白，所述的重组VP2蛋白为犬细小病毒VP2蛋白的截短蛋白，位于犬细...
- 师东方唐毓董秀梅苏瑞红张萍
- 文献传递
- 影响大肠杆菌不耐热肠毒素2型毒性的氨基酸初步筛选
- 2022年
- 为探究影响产肠毒素大肠杆菌(ETEC)不耐热肠毒素2型(LT2)毒性的关键氨基酸及其突变重组蛋白的免疫原性,本研究扩增了LT2编码基因elt2,并采用重叠延伸PCR(SOE PCR)方法分别对其A亚基进行R5K、H42A、S59K、V95K、Y102K和E110K的单突变,将elt2及其6个突变基因分别双酶切后克隆于pET-30a中构建重组大肠杆菌pET-30a-elt2/BL21、pET-30a-R5K/BL21、pET-30a-H42A/BL21、pET-30a-S59K/BL21、pET-30a-V95K/BL21、pET-30a-Y102K/BL21、pET-30a-E110K/BL21,经IPTG诱导表达了重组LT2(rLT2)及其突变重组蛋白mrLT2-R5K、mrLT2-H42A、mrLT2-S59K、mrLT2-V95K、mrLT2-Y102K、mrLT2-E110K;利用细胞毒性试验和小鼠致病性试验比较了rLT2和突变重组蛋白对小鼠肾上腺皮质瘤(Y1)细胞的毒性作用及对小鼠的致病性,并将rLT2和mrLT2-V95K作为免疫原接种小鼠检测其对小鼠的免疫原性。结果显示,突变重组蛋白对Y1细胞的毒性作用均弱于rLT2,其中mrLT2-V95K对Y1细胞的毒性作用最弱为1.145×10^(1)TCID_(50)/0.1 mL;rLT2及该突变重组蛋白对小鼠均无致病性,表明小鼠也不适合用于LT2的致病性检测。mrLT2-V95K免疫BALB/c小鼠的血清特异性IgG抗体效价和对rLT2的中和抗体效价分别为1:102 400和1:32,与rLT2的免疫原性无显著差异。本研究首次证实LT2 A亚基的aa95对LT2细胞毒性作用的影响较明显,其突变重组蛋白具有良好的免疫原性,为大肠杆菌减毒疫苗研究提供了重要科学信息。
- 石博侯美佳孙思萌刘嘉利董秀梅杨巍杨巍师东方
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌定点突变重组蛋白免疫原性
- 丁香叶或其提取物在制备抗猪流感病毒药物中的用途
- 本发明公开了丁香叶或其提取物在制备抗猪流感病毒药物中的用途。本发明通过体外和体内抗猪流感病毒实验发现，丁香叶或其提取物对猪流感病毒具有显著的预防或治疗作用，能将其制备成预防或治疗猪流感病毒的药物。
- 李艳华李贤贤董秀梅陈雪英赵玉莲黄全勇李鹤吴悦刘静
- 文献传递
- 用于检测产肠毒素大肠杆菌5种菌毛基因的多重PCR引物组、试剂盒及检测方法
- 本发明公开了用于检测产肠毒素大肠杆菌5种菌毛基因的多重PCR引物组、试剂盒及检测方法。引起幼畜腹泻的产肠毒素大肠杆菌常带有F4、F5、F6、F18和F41菌毛及其编码基因，本发明通过对5种菌毛基因序列的比对分析，设计并合...
- 师东方孙思萌董秀梅张萍朱妍苏瑞红唐毓侯美佳冯启峥
- 文献传递
- 基于免疫彩色纳米微球的犬瘟热病毒抗体检测凝集试验被引量：2
- 2019年
- 为建立以红色聚苯乙烯纳米微球为载体,快速检测幼犬犬瘟热病毒(CDV)母源抗体或免疫犬抗体水平的间接凝集试验,本研究表达纯化了CDV H截短的重组蛋白rsH2,并以rsH为致敏原与纳米微球偶联制备了免疫彩色纳米微球;通过间接凝集反应条件的优化,特异性、敏感性、稳定性试验和临床样品的检测,建立了一种快速检测CDV抗体的间接凝集试验。特异性结果显示,致敏微球仅与CDV阳性血清发生凝集反应,不与狂犬病病毒、犬腺病毒和犬细小病毒的阳性血清发生凝集反应,特异性强;凝集试验可检测血清中和抗体的最低效价为1∶35;不同批次制备的致敏微球和4℃保存90 d的致敏微球的凝集反应特异性一致,凝集程度无明显差异,重复性稳定性好;该凝集试验对45份血清样品的检测结果与CDV抗体检测试剂盒检测结果的阳性符合率为100%。上述结果表明,本研究建立的检测CDV抗体的间接凝集试验具有良好的特异性、敏感性和稳定性,为CDV抗体检测提供了一种快速、简便、准确、经济的检测方法。
- 苏瑞红冯启峥唐毓侯美佳孙思萌董秀梅张萍张萍师东方
- 关键词：犬瘟热病毒抗体检测
- 浅析二维码在实验动物学教学中的应用被引量：2
- 2019年
- 在信息技术发达的现代社会,随着校园网络的完善和智能手机的普及,二维码在高校教学中的应用已经成为趋势。笔者将二维码技术融合于实验动物教学中,探索了二维码技术在教学方法、考核评价体系以及实验、实践等教学环节中的应用。
- 董秀梅张萍魏萍
- 关键词：实验动物学教学二维码实践教学
- 传染性支气管炎DN-1分离株S1基因的克隆与序列分析
- 2008年
- 根据已发表的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因序列设计了1对引物,通过RT-PCR特异性扩增出DN-1株的S1基因,产物为1.7kb,与设计相符。同源性比较结果显示,DN-1株与H52、H120株的S1基因核苷酸序列的同源性分别为99.7%、99.2%,表明IBVDN-1分离株与疫苗株的S1基因具有高度的同源性。
- 董秀梅曾祥伟张迎疆魏萍刘澜澜
- 关键词：S1基因克隆
- 重组猪/牛源大肠杆菌耐热肠毒素融合蛋白STp5‑His、抗该蛋白的单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了一种重组猪/牛源大肠杆菌耐热肠毒素(STp)融合蛋白STp5‑His、抗该蛋白的单克隆抗体及其应用，本发明中所述的融合蛋白STp5‑His的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，编码所述融合蛋白的核苷酸序列...
- 师东方韩林林包军董秀梅朱妍张萍刘文鑫
- 文献传递
- 产不耐热肠毒素大肠杆菌减毒突变菌株的毒性和免疫应答评价被引量：4
- 2021年
- 为探究表达不耐热肠毒素突变体(mLT)的产肠毒素大肠杆菌(ETEC)突变菌株黏膜免疫原性以及作为口服疫苗的应用前景,本研究采用细菌平板计数法、电镜观察和药物敏感试验检测了已构建的mLT突变菌株在LB液体培养基和人工胃肠环境下的生长曲线、菌毛生长和对抗生素的耐药性能,结果显示E.coli mLT-S63K、E.coli mLT-A72R和E.coli mLT-R192G3突变菌株的生长曲线、菌毛生长和耐药性与亲本菌株基本一致;经PCR和细菌黏附性试验检测,3株菌的突变基因遗传稳定,并且具有和亲本菌株相当的黏附能力;采用家兔肠袢结扎试验和鼠肾上腺皮质细胞(Y1)毒性试验对突变菌株产生的mLT的毒性进行检测,结果显示,3株突变菌株所产生的mLT均具有体内肠毒性,E.coli mLT-S63K产生的mLT对Y1细胞的毒性最弱,为10^(3.476)TCID_(50)/0.1 mL,是亲本菌株E.coli C83903 LT毒性(10^(7.614)TCID_(50)/0.1 mL)的1/10000;小鼠口服突变菌后,观察小鼠临床表现,采用ELISA和中和试验检测小鼠产生的特异性抗体及其中和活性,采用MTT法测定淋巴细胞的增殖情况,结果显示,口服突变菌株对小鼠安全,能够诱导小鼠产生局部黏膜免疫应答、体液免疫应答以及细胞免疫应答,小鼠产生特异性的IgG和sIgA且对LT均具有中和活性。3株突变菌株均具有良好的免疫原性,其中E.coli mLT-S63K所产生的mLT毒性更弱,且黏膜免疫效果更好,可作为ETEC口服疫苗的候选菌株。本研究通过减毒突变构建了表达mLT的ETEC突变菌株,并筛选出毒性弱,免疫原性好,遗传稳定的ETEC口服疫苗候选菌株,为仔猪大肠杆菌性腹泻新型疫苗的研究提供了实验数据。
- 冯启峥侯美佳孙思萌石博刘嘉利董秀梅张萍张萍
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌不耐热肠毒素口服免疫
