葛均青
- 作品数：61 被引量：267H指数：10
- 供职机构：福建省农业科学院更多>>
- 发文基金：福建省属公益类科研院所基本科研专项国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 一种密码子优化的斑马鱼g型溶菌酶-1基因及其重组表达蛋白
- 本发明公开了一种密码子优化的斑马鱼g型溶菌酶‑1基因及其重组表达蛋白。斑马鱼共有三个溶菌酶基因，分别为c型溶菌酶、g1型溶菌酶和g2型溶菌酶。所述的斑马鱼g型溶菌酶‑1基因系通过优选获得，经密码子优化后采用全基因合成的方...
- 陈华葛均青
- 文献传递
- 鳗鲡疱疹病毒ORF8基因的克隆表达及转录时相分析被引量：1
- 2021年
- 为研究鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus,AngHV)ORF8基因的特性,根据GenBank中AngHV参考株(NC_013668)的ORF8序列设计引物,采取PCR方法从分离的AngHV福建病毒株(AngHV-FJ)基因组中扩增出特异性片段,克隆至pMD19-T载体,经酶切和测序验证,获得了ORF8的基因序列。结果表明:经生物信息学分析,ORF8编码的蛋白稳定性较好,存在跨膜结构且抗原表位多,符合病毒囊膜蛋白的特征;经转录时相分析,ORF8是病毒的早期基因(early gene,E),可能在病毒感染的早期阶段就发挥作用;将ORF8克隆至表达载体pET-32a,转化入大肠杆菌E.coli BL21中,以IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE及Western blot检验,实现了ORF8在大肠杆菌中的高效表达,进一步通过割胶的方法获得了相对分子质量约为44000的高纯度融合表达蛋白。本研究为下一步评价该表达蛋白的免疫效果和制备抗体,以及开发免疫诊断试剂和疫苗提供了研究基础。
- 陈曦李英英陈强宋铁英葛均青
- 关键词：转录时相克隆原核表达
- 一株鼠李糖乳杆菌NP150707及其应用
- 本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种分离自断奶仔猪粪便的鼠李糖乳杆菌（<I>Lactobacillus rhamnosus</I>）NP150707及其应用。该鼠李糖乳杆菌NP150707保藏于中国普通微生物菌种保藏管...
- 陈曦葛均青
- 饲喂卵黄抗体对美洲鳗鲡抵御嗜水气单胞菌感染的影响
- 2022年
- 利用制备的嗜水气单胞菌特异性卵黄抗体(L316-IgY)饲喂美洲鳗鲡(Anguilla rostrata)后,经嗜水气单胞菌攻毒并取样进行组织病理学观察,分析细胞因子的表达情况,评价嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)卵黄抗体对美洲鳗鲡抵御嗜水气单胞菌感染的影响。观察发现,饲喂L316-IgY鳗鲡的肝脏细胞排列紧密,非特异性卵黄抗体组(NS-IgY)肝脏细胞间隙变大,而空白对照组(Ctr)肝脏细胞间隙增大、肝索分离;L316-IgY组和NS-IgY组肾脏细胞排列紧密,Ctr组肾脏的肾小管肿胀、细胞形态不完整,细胞出现空泡;三组鳗鲡的鳃与肠道均无明显差异;细胞因子表达情况分析显示,饲喂L316-IgY或NS-IgY均能显著提高组织中TGFβ、TNFα和IL-1β的表达量,显著下调MyD88的表达量。结果表明,饲喂L316-IgY或NS-IgY均可减轻嗜水气单胞菌对美洲鳗鲡的致病性,通过调节组织中细胞因子的表达水平增强美洲鳗鲡抵御嗜水气单胞菌感染的能力,且L316-IgY对美洲鳗鲡抵御感染能力的提升作用更显著。
- 张丽娟陈强杨金先李英英宋铁英宋铁英
- 关键词：美洲鳗鲡组织病理学
- 鳗鲡疱疹病毒ORF95基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：6
- 2012年
- 鳗鲡疱疹病毒(Anguillae herpesvirus,AngHV)是淡水鳗鲡的主要病毒性疾病病原之一。根据鳗鲡疱疹病毒(AngHV-1)的基因组序列(GenBank:NC-013668)设计引物,扩增鳗鲡疱疹病毒福建株(AngHV-FJ)ORF95基因的开放阅读框序列,克隆至pMD19-T载体;经限制性内切酶酶切和测序鉴定,进一步将其克隆至原核表达载体pET-32a,构建了表达质粒32a-ORF95,将其转化表达菌株BL21(DE3),经IPTG诱导,实现了ORF95在大肠杆菌中的高效表达。在0.1mmol.L-1 IPTG、23℃诱导14h的条件下,可溶性ORF95蛋白的表达量较高,经镍柱纯化获得了高纯度的融合蛋白。
- 李友娟葛均青宋铁英林天龙
- 关键词：基因克隆原核表达
- 柑橘木虱寄生性天敌调查及一新种记述被引量：8
- 2019年
- 柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama既是柑橘上的重要害虫,又是柑橘黄龙病的传播虫媒,对我国柑橘产业存在潜在威胁。进一步调查柑橘木虱的寄生性天敌资源,明确其种类和鉴别特征,对筛选优势天敌种类并开展生物防治应用具有重要意义。本文调查结果有柑橘木虱初寄生蜂2种,分别为亮腹姬小蜂Tamarixia radiate(Waterston)、阿里食虱跳小蜂Diaphorencyrtus aligarhensis(Shafee, Alam et Argarwal);重寄生蜂4种,分别为新种小斑塔姬小蜂TamarixiamicromaculaWangetHuang,sp.n.(姬小蜂科Eulophidae)、沃氏卡棒小蜂Chartocerus walkeri Hayat、黄食虱跳小蜂Psyllaphycusdiaphorinae Hayat(中国新记录属、新记录种)、恩蚜小蜂Encarsiasp.♂。记述了寄生性天敌分类鉴别的主要形态特征及其发生概况,描述了新种小斑塔姬小蜂,提供了寄生性天敌的形态特征照片。新种模式标本及其他研究标本保存于福建农林大学植物保护学院。
- 王竹红李鹏雷葛均青郑卉娜周军辉黄建
- 关键词：柑橘木虱寄生蜂
- 1株牛蛙虹彩病毒的分离鉴定及其致病性被引量：1
- 2022年
- 为了明确一种牛蛙(Rana catesbiana Shaw)传染性疾病的致病病原,本研究利用收集的病料进行病毒分离培养、鉴定和致病性分析。结果显示,接种病料的鲤鱼表皮瘤细胞(epithelioma papulosum cyprini cell line, EPC)出现变圆、脱落等典型细胞病变效应(cytopathic effect, CPE),病毒粒子的电镜观察表明其可能为虹彩病毒,进一步的基因组PCR鉴定和序列的同源性分析证实分离的病毒为一株蛙虹彩病毒(Rana grylio virus, RGV),称之为RGV-FJ。攻毒试验表明,感染RGV-FJ的牛蛙出现腹部及大腿出血,肝脏变白肿大,脾脏、肾脏及肺部出血等症状。组织病理学观察发现,攻毒组牛蛙皮肤的黏液层细胞肿胀、排列紊乱,细胞间红细胞浸润,上皮细胞肿胀、坏死;肝细胞肿胀或萎缩、坏死、排列紊乱,门静脉与肝组织剥离,红细胞渗出且肿胀成不规则形态;肾脏的肾小管管腔狭窄,细胞界限模糊,大量红细胞和单核细胞浸润;肺部囊泡细胞排列紊乱,有大量红细胞浸润、淤积。同时利用透射电镜在蛙的肺部观察到病毒粒子。PCR检测显示,攻毒组牛蛙肝脏、脾脏、肾脏、肠道、肌肉、皮肤和肺中均可检测到RGV-FJ,这表明牛蛙发生了RGV-FJ的系统侵染;攻毒组牛蛙从攻毒第2天开始出现死亡,第4天的累计死亡率达到94.12%;并从病死牛蛙的主要内脏器官中重新分离出了RGV-FJ。上述结果表明,分离的RGV-FJ具有较强致病性,这为进一步开展分离病毒的致病机理研究奠定基础。
- 张丽娟杨金先陈强李英英葛均青
- 关键词：牛蛙虹彩病毒
- 一种鳗鲡疱疹病毒的快速检测试剂盒及其应用
- 本发明属于病毒核酸检测领域，具体涉及一种鳗鲡疱疹病毒的快速检测试剂盒及其应用。本发明试剂盒基于重组酶辅助扩增（Recombinase‑aid Amplification，RAA）和侧向流层析技术（Lateral flow...
- 陈曦葛均青
- 冻害低温下越冬甘蓝渗透调节物质的变化和作用被引量：45
- 2001年
- 在自然降温过程中 ,3个甘蓝品种的渗透调节物质可溶性糖、可溶性蛋白、游离脯氨酸的含量发生明显变化。结果表明 :随温度下降 ,可溶性糖含量表现出先升后降的趋势 ,可溶性蛋白、游离脯氨酸含量随温度下降而上升。田间自然鉴定冬冠 1号冻害指数最低 ,抗冻性最强 ;冻害低温下 ,可溶性蛋白。
- 王磊李建勇张振贤葛均青
- 关键词：冻害越冬甘蓝渗透调节物质
- 用于AngHV侵染下鳗鲡不同组织荧光定量的内参基因
- 本发明提供了用于AngHV侵染下鳗鲡不同组织荧光定量的内参基因，属于分子生物学技术领域。本发明经过筛选，从RPL7、18S、EF1A、ACTB、GAPDH 5个候选持家基因中筛选出鳗鲡疱疹病毒感染的鳗鲡组织内表达量稳定的...
- 李英英葛均青
