程玉洁
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学药学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人二型大麻受体激动剂高通量筛选模型的建立被引量：4
- 2012年
- 目的:基于二型大麻受体(CB2)的信号传递通路,建立体外高通量筛选CB2受体激动剂的药物模型。方法:将目的基因质粒pIRES2-EGFP-CB2、报告基因质粒pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro]、内参质粒PRL-TK共转染CHO细胞,通过检测双荧光素酶报告基因的表达水平变化来筛选人CB2受体的激动剂。并对加入激动剂的浓度和作用时间进行优化及考察模型的稳定性。结果:给予10μmol/L JWH-015 6 h后能取得最大相对诱导率。成功建立CB2受体激动剂的高通量筛选模型,筛选模型Z'因子为0.81,表现为良好的稳定性。结论:成功地建立了CB2受体激动剂的筛选模型,为从中药中高通量筛选有效物质奠定了良好的基础。
- 刘媛董志肖晓秋唐红王乐乐程玉洁
- 关键词：CB2受体报告基因高通量筛选模型
- 人参皂苷Rg_1的提取纯化及其含量测定被引量：4
- 2013年
- 目的:提取和纯化人参皂苷Rg1,并测定其含量。方法:采用超声法提取人参总皂苷,使用硅胶柱层析法分离、纯化人参皂苷Rg1,采用高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1含量。结果:采用硅胶柱层析分离50g人参,可得到人参皂苷Rg19.91g,其纯度为89.63%。结论:此提取方法简单、准确,成本较低,所获产品纯度较高,可作为获得人参皂苷Rg1的有效方法。
- 王乐乐董志刘媛程玉洁唐红
- 关键词：超声法高效液相色谱法人参皂苷RG1
- 红花中羟基红花黄色素A的分离纯化工艺
- 2012年
- 目的:分离纯化红花中羟基红花黄色素A(HSYA)。方法:采用ZTCⅡ澄清剂进行初步除杂,以吸附量、吸附率和解吸附率为指标,筛选分离HSYA的大孔树脂型号、工艺以及聚酰胺树脂纯化HSYA的工艺。结果:选取X-5型大孔树脂,分离工艺要求吸附流速为1mL·min-1,最佳吸附pH值为3,上柱量为柱体积的2%,洗脱溶剂为50%乙醇溶液。聚酰胺树脂纯化工艺要求径高比1∶14,上柱量为柱体积的2%,流速为1.5mL·min-1,洗脱溶剂为乙酸乙酯-甲醇-3.6%盐酸(1∶3∶6),反复上柱6次。得到HSYA的产率为25.63%,纯度为83.65%。结论:所选工艺成本低、所获产品纯度较高,可作为获得HSYA的有效方法。
- 唐红董志曹纬国肖晓秋刘媛程玉洁王乐乐
- 关键词：红花羟基红花黄色素A纯化
- 人二型大麻受体基因的pIRES2-EGFP质粒的构建及其真核表达被引量：2
- 2012年
- 目的:构建含有人二型大麻素受体(CB2)基因的真核表达载体,并实现其在HEK293细胞的表达。方法:首先采用PCR方法从含有CB2基因的质粒pcDNA3.1(+)-CB2中扩增获得人的CB2基因,再采用基因重组技术将CB2的DNA片段插入真核表达载体pIRES2-EGFP。将获得的pIRES2-EGFP-CB2重组子转染HEK293细胞,应用荧光显微镜观察EGFP的表达情况,RT-PCR和报告基因检测CB2的表达情况。结果:酶切和测序结果验证真核表达载体pIRES2-EGFP-GB2构建成功。可在荧光显微镜下观察到转染HEK293细胞表达的绿色荧光;RT-PCR和双荧光素酶报告基因法检测证明CB2蛋白在真核细胞中成功表达;CB2受体激动剂JWH-015能显著逆转腺苷酸环化酶激动剂forskolin诱发的荧光素酶活性增加。结论:成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-CB2,为进一步研究CB2基因的生理学和病理生理学功能及调控机制奠定了实验基础。
- 刘嫒董志肖晓秋唐红王乐乐程玉洁
- 关键词：CB2受体转染报告基因
