皇甫冰 作品数:11 被引量:66 H指数:5 供职机构: 山西医科大学实验动物中心 更多>> 发文基金: 山西省回国留学人员科研经费资助项目 国家自然科学基金 山西省卫生厅科技攻关计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
硒对氟诱导NRK-52E细胞凋亡干预作用机制 被引量:1 2017年 目的探讨硒对氟诱导NRK-52E细胞凋亡的拮抗作用。方法实验设对照组、染氟组、染硒组、硒干预组,培养NRK-52E细胞,染毒72 h,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测AMPK及线粒体通路相关蛋白表达水平。结果与对照组[(5.97±0.09)%]比较,5、20 mg/L Na F组细胞凋亡率[分别为(7.92±0.24)%、(11.06±0.17)%]明显升高(P<0.05);与20 mg/L Na F组比较,17.1、34.2μg/L硒干预组细胞凋亡率[分别为(8.46±0.09)%、(9.88±0.08)%]明显降低(P<0.05);与对照组比较,20 mg/L Na F组细胞AMPK磷酸化蛋白、bax、Cyt-C蛋白表达[分别为(0.73±0.16)、(0.99±0.16)、(0.73±0.08)]、活性caspase-9和caspase-3蛋白表达[分别为(1.17±0.17)、(1.51±0.42)]均升高(P<0.05);与20 mg/L Na F组比较,17.1、34.2 g/L硒干预组AM PK磷酸化蛋白表达量[分别为(0.46±0.12)、(0.48±0.15)]、bax、Cyt-C蛋白表达量[分别为(0.55±0.09)、(0.61±0.16)与(0.30±0.06)、(0.34±0.05)]及活性caspase-9、caspase-3蛋白表达量[分别为(0.76±0.11)、(0.40±0.12)与(0.35±0.12)、(0.27±0.04)]均降低(P<0.05)。结论 AMPK介导的线粒体通路参与了硒拮抗氟诱导NRK-52E细胞凋亡过程。 高继萍 王裕 杨霞 皇甫冰 陈朝阳 郭民 宋国华关键词:硒 氟中毒 细胞凋亡 AMPK 线粒体通路 EGFR,PDCD4,TGF-β1,Smad3,Smad7在中国地鼠口腔颊囊黏膜癌变过程中的表达研究 被引量:9 2017年 目的探讨EGFR,PDCD4,TGF-β1,Smad3,Smad7在口腔正常黏膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法采用ELISA对中国地鼠口腔黏膜癌变过程中血清EGFR,PDCD4水平进行检测;采用免疫组织化学法检测正常口腔黏膜上皮,单纯增生上皮、异常增生上皮和鳞癌组织中TGF-β1,Smad3,Smad7的表达。结果在口腔黏膜癌变过程中血清EGFR蛋白呈升高趋势,血清PDCD4的表达呈降低趋势,呈负相关。鳞癌组织中TGF-β1、Smad7表达明显高于口腔正常黏膜、上皮单纯增生、上皮异常增生(P<0.05),而Smad3作用减弱。相关性分析显示,口腔异常增生上皮、口腔鳞癌组织中TGF-β1表达与Smad7呈正相关(P<0.05)。结论 EGFR,PDCD4,TGF-β1,Smad3,Smad7表达与口腔鳞癌的生物学行为关系密切,本实验为研究口腔鳞癌机理研究提供了理论依据,对口腔鳞癌的发展与预后有重要意义。 李莉红 皇甫冰 高继萍 常凯 陈朝阳 庞文彪 宋国华关键词:口腔鳞状细胞癌 HIV-1转基因大鼠的肾脏氧化应激与凋亡基因的表达 2017年 目的检测HIV-1转基因大鼠和F344大鼠肾脏COX3、COX5a、SOD2、GPx4、Caspase-1、Bax、BCL2L1、Fas Lg基因表达水平,探讨相关基因表达与HIV-1致肾脏病理变化的相关性。方法以GAPDH为内参照,应用SYBR Green染料法进行相对实时荧光定量PCR检测COX3、COX5a、SOD2、GPx4、Caspase-1、Bax、BCL2L1、Fas Lg在HIV-1转基因大鼠和F344大鼠肾脏中的表达情况。结果 HIV-1转基因大鼠肾脏组织中氧化应激相关基因COX3、COX5a、SOD2、GPx4基因表达水平分别是F344大鼠的0.440,0.791,1.703,0.346倍,其中SOD2基因表达水平显著升高(P<0.05),COX3、COX5a、GPx4显著降低(P<0.05)。HIV-1转基因大鼠肾脏组织中凋亡相关基因Caspase-1、BCL2L1、Bax、Fas Lg的基因表达水平分别是F344大鼠的1.389,1.145,0.400,0.590倍,其中,Caspase-1和BCL2L1基因表达水平显著升高(P<0.05),Bax和Fas Lg显著降低(P<0.05)。结论 HIV-1通过下调抗氧化酶基因表达水平使肾脏发生氧化应激,通过调控凋亡基因表达水平来拮抗肾脏细胞凋亡。 高继萍 皇甫冰 李莉红 宋国华关键词:HIV 转基因大鼠 氧化应激 肾脏 硒对氟诱导大鼠肾小管上皮细胞凋亡及caspase-3和caspase-8 mRNA表达的影响 被引量:1 2015年 目的探讨硒对氟诱导大鼠肾小管上皮(NRK-52E)细胞凋亡及caspase-3和caspase-8 mRNA表达的影响。方法取处于对数生长期的肾小管上皮细胞,分别加入0(对照)、5、20 mg/L Na F溶液和(或)17.1、34.2μg/L亚硒酸钠溶液继续培养0、24、48、72、96 h,采用MTT法检测细胞存活率,采用流式细胞仪和Real-time PCR法分别检测染毒48 h时的细胞凋亡率和凋亡相关因子caspase-3和caspase-8 mRNA的表达水平。结果与对照组相比,20 mg/L Na F染毒肾小管上皮细胞存活率均较低,凋亡率较高;与相同剂量Na F染毒组比较,硒干预组细胞存活率均较高,各浓度Na F+17.1μg/L亚硒酸钠染毒组的细胞凋亡率较低。与对照组相比,Na F染毒组肾小管上皮细胞中caspase-3和caspase-8 mRNA的表达水平均较高;与相同剂量Na F染毒组比较,20 mg/L Na F+各浓度亚硒酸钠组细胞中caspase-3和caspase-8 mRNA的表达水平较低。结论一定浓度的硒可能通过下调凋亡相关因子caspase-3和caspase-8的表达来拮抗细胞凋亡。 王裕 杨霞 高继萍 皇甫冰 宋国华关键词:硒 氟 细胞凋亡 CASPASE-3 CASPASE-8 小鼠肾小管上皮细胞的培养和鉴定 被引量:2 2014年 目的建立小鼠肾小管上皮细胞培养方法,为有关肾损伤体外研究提供实验平台。方法分别采用肾小管节段贴块法、胰蛋白酶和胶原酶Ⅰ法消化分离肾小管节段,用含10%血清的培养基培养,然后用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化,对原代和传一代肾小管上皮细胞进行鉴定。结果三种培养方法培养细胞3 d基本贴壁,胶原酶Ⅰ法3-4 d长满瓶底,肾小管节段贴块法4-5 d长满瓶底,胰蛋白酶7 d左右。细胞均鹅卵石铺路样生长,经细胞免疫组织化学染色鉴定cytokeratin 18呈阳性。结论肾小管节段贴块法和胶原酶Ⅰ消化都可以得到较理想的肾小管上皮细胞,后者细胞生长较快,为研究肾损伤的发生原因和机制提供实验基础。 王裕 杨霞 高继萍 皇甫冰 宋国华关键词:肾小管上皮细胞 原代培养 CK18 小鼠 基于高通量测序的中国地鼠颊囊鳞癌转录组差异表达研究 目的:利用高通量转录组测序技术(RNA-seq)和实时荧光定量PCR技术(RT-q PCR),筛选中国地鼠口腔颊囊黏膜鳞癌组织(OSCC)和正常组织的差异表达基因,从转录组层面和基因表达角度探索口腔鳞癌发生发展的内在机制... 皇甫冰关键词:口腔鳞状细胞癌 差异表达基因 基因本体论 氧化应激与肾脏细胞凋亡 被引量:27 2015年 氧化应激产生的活性氧(ROS)与细胞凋亡存在密切的关系。ROS可通过激活线粒体、Bcl-2家族、NF-κB及MAPKS家族、Caspase家族等途径引起细胞凋亡,细胞凋亡在肾脏疾病的发病过程中起着重要作用。本文就氧化应激在肾脏疾病发生发展中的作用及其诱导细胞凋亡的机制进行了综述。 皇甫冰 高继萍 杨霞 王裕 宋国华关键词:氧化应激 活性氧 肾细胞 细胞凋亡 中国地鼠口腔颊囊黏膜癌变过程凋亡相关基因caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2的表达 被引量:8 2017年 目的探讨凋亡相关基因caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2在中国地鼠口腔正常黏膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和鳞状细胞癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学法、RT-PCR检测正常中国地鼠口腔黏膜上皮、单纯增生上皮、异常增生上皮和鳞癌组织中caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2蛋白及mRNA的表达。结果在口腔黏膜癌变过程中,鳞癌组织中抑制凋亡蛋白Bcl-2表达明显高于口腔正常黏膜、上皮单纯增生、上皮异常增生(P<0.05);异常增生上皮caspase-3、caspase-9、Bax表达均明显高于正常组(P<0.05),但随着增生程度的加重,caspase-3、caspase-9、Bax表达明显降低(P>0.05)。相关性分析显示,鳞癌组织中Bcl-2与Bax、caspase-3、caspase-9呈负相关(P<0.05)。RT-PCR结果表明,与正常组织相比,鳞癌组织中Bcl-2高表达,而caspase-3、caspase-9、Bax的mRNA表达显著下调(P<0.05)。结论本实验在中国地鼠鳞癌组织中caspase-3、caspase-9、Bax表达降低而Bcl-2表达上升,揭示了caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2表达与口腔鳞癌的发生、发展密切相关,可以为口腔颊囊黏膜癌的基因治疗提供一些线索或并为评价OSCC的生物学特征及预后提供参考。 庞文彪 李莉红 皇甫冰 刘茂林 张锐虎 宋国华关键词:中国地鼠 口腔鳞状细胞癌 凋亡 中国地鼠口腔颊囊黏膜癌模型的建立及癌变的动态观察 被引量:9 2016年 目的:利用二甲基苯并蒽(DMBA)涂抹法建立中国地鼠颊囊黏膜癌的实验动物模型,观察癌变不同时期的组织学动态变化过程。方法:将60只雄性中国地鼠随机分为3组,分别为模型组(24只)、溶剂对照组(12只)、空白对照组(24只)。溶剂对照组仅涂丙酮液,空白对照组不作任何处理,模型组以0.5%DMBA涂抹中国地鼠两侧颊囊,每周3次,共15周。分别于第6、9、12、15周将模型组和空白对照组随机处死6只,溶剂对照组处死3只,在肉眼及光镜下动态观察颊囊黏膜癌变全过程的形态学和显微组织学改变。结果:与对照组比较,DMBA长时间处理后模型组地鼠相继出现口腔内黏膜充血、增厚、溃烂化脓、白斑及菜花状赘生物等变化,经历了单纯上皮增生(6~9周)、不同程度上皮异常增生(9~12周)、原位癌及鳞状细胞癌(12~15周)等阶段。结论:DMBA涂抹法可成功建立中国地鼠颊囊黏膜癌前病变、鳞状细胞癌模型,发病过程与人类口腔鳞状细胞癌相似,为口腔鳞癌的多阶段、多步骤研究提供了一个较为理想的动物模型。 皇甫冰 庞文彪 张锐虎 郭民 高继萍 宋国华关键词:中国地鼠 口腔鳞状细胞癌 二甲基苯并蒽 动物模型 氟中毒对心脏损伤机理的研究 被引量:4 2014年 氟是具有潜在毒性、但在低剂量时可能具有人体必需功能的元素。适量的氟有利于人体的健康。对预防龋齿、维持机体的钙磷代谢、保持神经冲动的传导有非常重要的作用。但机体长期过量的摄入氟会引起慢性氟中毒。 杨霞 郝先辉 高继萍 王裕 刘茂林 皇甫冰 宋国华 阎小艳关键词:氟中毒 心脏