申莉莉
- 作品数：94 被引量：307H指数：11
- 供职机构：中国农业科学院烟草研究所更多>>
- 发文基金：中国烟草总公司科技项目云南省烟草专卖局(公司)科技项目四川省烟草专卖局(公司)科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程理学生物学更多>>
- 一株裂解性青枯雷尔氏菌噬菌体的分离及生物学特性分析被引量：20
- 2015年
- 【目的】分离并纯化出一株裂解性青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)噬菌体,并测定其各项生物学特性,为开发新的抗烟草青枯病制剂提供依据。【方法】取烟草青枯病重病田中健康烟株的根际土壤制成土壤悬浮液,并通过在青枯雷尔氏菌菌液中加入过滤后的土壤悬浮液富集噬菌体,用双层平板法验证噬菌体的存在后挑取单个最大噬菌斑进行反复纯化,直到得到单一清晰的噬菌斑。纯化后的单个噬菌斑加入对数早期的青枯雷尔氏菌菌液中进行增殖培养,将增殖液按常规方法进行噬菌体颗粒浓缩后,取20μL浓缩液用磷钨酸染色并通过电子显微镜观察噬菌体的形态特征;同时将浓缩液进行SDS-PAGE电泳,观察蛋白条带大小和数量;用λ噬菌体DNA提取试剂盒提取噬菌体增殖液中的噬菌体核酸进行琼脂糖凝胶电泳,确定其基因组片段大小;最后用常规方法测定噬菌体的滴度、最佳感染复数、一步生长曲线,并通过比较加入噬菌体液前后青枯雷尔氏菌菌液的OD600值变化测定其对温度、p H、紫外线、氯仿的敏感性。【结果】分离并纯化出了一株裂解性青枯雷尔氏菌噬菌体,命名为∈RS-1,噬菌斑为圆形,清晰透明,边缘光滑,直径1—2 mm,经电镜观察其形态为蝌蚪状,头部为二十面体的立体对称,直径约为94 nm,并有一带伸缩尾鞘的长尾大约为27 nm×100 nm,按照国际病毒分类委员会分类标准,其属于有尾噬菌体目(Caudovirales),肌尾噬菌体科(Myoviridae)的裂解性噬菌体,核酸性质为ds DNA;噬菌体浓缩液经SDS-PAGE分析至少可以观察到25条蛋白条带,相对分子质量在10—100 k D,说明其蛋白外壳至少含有25个结构蛋白;将提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳显示其条带大于48 kb,符合肌尾噬菌体科基因组大小范围(31—317 kb);生物学特性的测定显示该噬菌体对青枯雷尔氏菌的最佳感染复数为0.01;其吸附和感染青枯雷尔氏
- 高苗杨金广刘旭刘伟孙航军申莉莉钱玉梅杨清林余广宏李锡宏王凤龙
- 关键词：青枯雷尔氏菌噬菌体生物学特性
- 一株烟草普通花叶病毒生防蒙氏假单胞菌菌株
- 本发明公开了一株烟草普通花叶病毒生防蒙氏假单胞菌菌株(Pseudomonas monteilii)，菌株代号为4A1，该菌株于2011年9月07日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC ...
- 王凤龙钱玉梅杨金广申莉莉翟熙伦陈德鑫孙惠青王新伟战徊旭
- 解淀粉芽孢杆菌By33产活性蛋白抑制TMV体内复制作用研究
- 以解淀粉芽孢杆菌By33分泌蛋白为试验对象,在Nc89上接种TMV6h后,接种叶片悬浮于活性蛋白不同稀释浓度及无菌水中48h后,取出做摩擦接种三生烟试验和ELISA检测病毒含量试验。结果表明:活性蛋白稀释10倍、25倍、...
- 申莉莉王凤龙钱玉梅杨金广陈德鑫
- 关键词：解淀粉芽孢杆菌活性蛋白酶联免疫病毒复制
- 黏质沙雷氏菌次生代谢物对TMV的抑制机理被引量：11
- 2014年
- 【目的】分离、纯化和鉴定黏质沙雷氏菌2A2次生代谢物中具有抑制TMV侵染力的活性成分,明确其对TMV的抑制机理。【方法】通过病毒生物学测定,确定黏质沙雷氏菌2A2菌株对TMV的抑制效率。为明确黏质沙雷氏菌2A2发酵液次生代谢物中抑制TMV侵染力的活性成分,通过TLC和硅胶柱层析对其发酵液进行了分离纯化,获得主要的次生代谢物,通过局部枯斑法测定各代谢物的生物学活性,筛选可显著抑制TMV侵染活性的物质,经NMR分析,确定其成分结构,进而确定物质组分。为进一步揭示代谢物对TMV的抑制机理,利用透射电子显微镜探索代谢物对TMV粒体形态的影响,TMV粒体与代谢物甲醇溶液混合30 min后,于透射电子显微镜下观察TMV粒体形态。同时,用代谢物甲醇溶液喷施处理寄主下部3片叶,共设5个处理:处理Ⅰ,喷施代谢物24 h后,接种TMV;处理Ⅱ,代谢物与等体积TMV汁液混合30 min后,接种叶片;处理Ⅲ,先接种TMV,24 h后喷施代谢物;处理Ⅳ,宁南霉素(50μL·mL-1)与等体积TMV汁液混合30 min后,接种下部叶3片做阳性对照;处理Ⅴ,无菌水与等体积TMV汁液混合30 min后,接种下部叶3片做空白对照。分别在次生代谢物诱导和TMV侵染后1、3、5、7、9 d,取未经任何处理的上部叶,TRIZOL法快速提取总RNA并反转录cDNA,利用real-time RT-PCR分析样品PR基因和TMV的RNA相对表达量,进而明确代谢物处理寄主对寄主PR基因表达的影响和对TMV在寄主体内复制增殖的抑制作用。【结果】黏质沙雷氏菌2A2菌株对TMV具有显著的抑制作用。对其发酵液进行分离纯化,获得3种主要代谢物,通过局部枯斑法测定,编号为BJH-2的代谢物可显著抑制TMV的侵染活性,经NMR分析,确定了该代谢物为灵菌红素(prodigiosin)。透射电子显微镜结果显示灵菌红素可显著破坏TMV粒体,使TMV典型的杆状病毒粒体降解断裂成排列紊乱的短杆状。real-time RT-PCR结果表明,
- 毕建华杨金广欧阳明安李锡宏张长华申莉莉钱玉梅王盼王升平王凤龙
- 关键词：灵菌红素黏质沙雷氏菌烟草花叶病毒拮抗作用
- 转录因子bZIP60调控植物抗病抗逆的研究进展
- 2024年
- 未折叠蛋白反应(UPR)在植物的逆境胁迫、病原物侵染、生长发育中发挥重要作用,转录因子bZIP60是UPR信号之一。在明确了拟南芥、水稻、玉米、小麦等内质网应激时需肌醇酶(IRE1)介导bZIP60 mRNA剪接激活的基础上,归纳了bZIP60对逆境和病原物的响应机制,总结了IRE1/bZIP60信号在植物抗病抗逆中的研究进展。正常生长条件下,以前体蛋白bZIP60U的形式跨内质网膜。发生应激时,IRE1识别并剪切bZIP60 mRNA的双茎环结构,产生含转录激活域和核定位信号的活性蛋白bZIP60S,并在细胞核内形成二聚体,结合到应激反应相关基因的启动子,通过上调胁迫应答相关基因提高植株抗性。
- 江连强宫燕伟刘东阳刘国申莉莉
- 关键词：未折叠蛋白反应抗病抗逆
- 一株烟草普通花叶病毒生防恶臭假单胞菌菌株
- 本发明公开了一株烟草普通花叶病毒生防恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)菌株，菌株代号为A3，该菌株于2011年9月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC No.52...
- 王凤龙孙惠青钱玉梅杨金广郭丛陈德鑫申莉莉王新伟战徊旭王秀芳陈丹
- 烟草过氧化氢酶基因CAT2克隆与表达特征分析被引量：7
- 2019年
- 基于已有的植物Catalase 2基因(CAT2)序列设计烟草Nicotiana tabacum CAT2的特异性引物,通过RT-PCR扩增克隆获得Nicotiana tabacum var. NC89 CAT2全长mRNA序列,包含1479 bp完整的读码框(ORF),可编码492个氨基酸残基。遗传进化分析显示,烟草NC89 CAT2与N. benthamiana CAT2基因亲缘关系最近。利用Quantitative Real-time PCR技术分析了CAT2基因在NC89烟草中的组织特异性表达和其应对生物和非生物胁迫的表达差异。结果表明,CAT2基因在烟草NC89的根、茎、叶、花瓣、花萼、种子中均有表达,其中在花中相对表达量最高,其次为叶、茎、种子和根。生物和非生物胁迫处理烟株,其CAT2诱导表达分析显示,机械损伤、渗透压、低温和高温、干旱和感染PVY时CAT2表达量均上调。上述研究表明烟草CAT2基因可能参与了应对非生物和生物胁迫的过程。
- 侯含王升平张超群周志成余祥文卢燕回贾海燕王杰李莹申莉莉王凤龙杨金广
- 关键词：烟草非生物胁迫生物胁迫
- 宁南霉素与醋酸铜混配对烟草普通花叶病的联合作用被引量：4
- 2010年
- 在室内条件下,用枯斑抑制率法测定了宁南霉素、醋酸铜及其5种不同比例的混配对烟草普通花叶病毒的毒力。结果表明,宁南霉素和醋酸铜对烟草普通花叶病的EC70分别为0.9647mg/L和0.4556mg/L,两者以4:1混配具有显著的增效作用,增效系数为1.48。
- 杜卫民罗定棋申莉莉
- 关键词：宁南霉素醋酸铜联合毒力
- 烟草黄瓜花叶病毒亚组Ⅰ分离物生物学特性被引量：5
- 2021年
- 对引起花叶狭长及疱斑畸形重症的烟草黄瓜花叶病毒,采用生物学接种、CP基因扩增测序、电镜观察、免疫印迹、荧光定量等方法,研究病毒分离物的株系、粒体形态、致病力、稀释限点、传导路径以及在抗感烟草上的症状。结果显示,分离物外壳蛋白基因长度为657 bp,其核苷酸序列与亚组Ⅱ的代表Q株系同源性为69.83%,与亚组Ⅰ的代表Fny株系同源性为93.00%,介于ⅠA与ⅠB株系之间。病毒粒体球形,直径28~30 nm,对烟草致病力强。病汁液稀释限点为10-5,质量浓度40倍稀释接种后病毒由接种叶移动到主茎后,先向下至根、向上至心叶,再扩散布满全株,最后集中在上部叶。亮黄和G28对其表现高感,病叶狭窄、黄化斑驳、变薄革质化及疱斑畸形;Ti245和铁耙子表现中抗,病叶轻微脉明斑驳。
- 申莉莉宋丽云龚明月何青云宋青松王宝剑刘文涛李斌王玉洁蔺忠龙
- 关键词：烟草黄瓜花叶病毒生物学特性
- 拮抗TMV细菌发酵产物对TMV粒体形态的影响被引量：3
- 2007年
- 通过对拮抗细菌发酵产物抑制TMV活性的测定及体外混合对TMV粒体形态的影响研究,表明:1)拮抗细菌by33、by88发酵产生的活性蛋白对TMV的体外钝化作用分别为85.38%和87.47%;2)电镜下观察到活性蛋白能打破TMV粒体的规则排列,与TMV粒子不可逆的结合,从而降低侵染力。
- 申莉莉王凤龙钱玉梅陈德鑫吴惠惠何京美
- 关键词：抗病毒蛋白
