田美玲
- 作品数：140 被引量：364H指数：12
- 供职机构：南通大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 穹窿海马伞切割后海马内NSCs的增殖和向神经元的分化被引量：6
- 2007年
- 目的观察切割穹窿海马伞侧和非切割侧大鼠海马内自体神经干细胞的增殖和向神经元分化的情况。方法切割SD大鼠右侧穹窿海马伞,术后2 d腹腔注射BrdU,连续5d,于术后28 d取脑冰冻切片,进行BrdU/NF-200免疫荧光双标检测。结果切割穹窿海马伞侧海马内的BrdU免疫荧光阳性细胞明显多于非切割侧,且发现有BrdU/NF-200双标神经元,而非切割侧未见到BrdU/NF-200双标神经元。结论穹窿海马伞切割后,切割侧海马内自体神经干细胞增殖加快,并可向神经元分化。
- 邹琳清金国华董传明秦建兵田美玲张新化朱蕙霞
- 关键词：穹窿海马伞切割海马增殖分化神经元
- 提高成年大鼠神经干细胞单克隆形成率的方法被引量：14
- 2002年
- 目的 探索提高神经干细胞单克隆形成率的方法并证实所分离培养的神经干细胞仍具有多分化潜能。 方法 对神经干细胞单克隆方法进行改良 ,即在单克隆培养液中加入 1 2原代克隆培养液。将所得到的单细胞克隆球消化、分离、增殖成大量的神经干细胞球 ,用含血清的DMEM分化培养液促其分化。 14d后 ,分别用神经元和胶质细胞的特异性标记物MAP 2标记神经元、GFAP标记星形胶质细胞和CNP标记少突胶质细胞。 结果平均每块含 1 2原代克隆培养液的 96孔培养板中有 2～ 3只孔可形成克隆球 ,而含纯新鲜培养液的培养板中仅 0 5～ 1 0只孔可形成克隆球。这些单细胞克隆球增殖后得到的大量亚细胞系克隆球分化后分别呈MAP 2、GFAP和CNP免疫荧光阳性。 结论 单细胞克隆实验中加入 1 2原代克隆培养液可提高神经干细胞的单克隆形成率 ,单克隆球增殖后得到的大量亚细胞系克隆球亦具有多分化潜能。
- 黄镇金国华张新化田美玲秦建兵徐慧君
- 关键词：成年大鼠神经干细胞细胞分化细胞培养
- 海马胆碱能刺激肽促进神经干细胞向神经元分化被引量：1
- 2014年
- 目的探讨海马胆碱能刺激肽(HCNP)在神经干细胞向神经元分化过程中所起的作用。方法切割SD大鼠右侧穹窿海马伞,14天后取切割穹窿海马伞侧海马制成海马提取液;将神经干细胞接种于24孔板中,分为HCNP与海马提取液联合培养组、HCNP组以及空白对照组,每组八孔;细胞分化至14天时行Tuj-1、MAP-2免疫荧光检测;计数Tuj-1、MAP-2阳性神经元数及细胞周长,并观察胞体大小和突起长度。结果联合培养组Tuj-1、MAP-2阳性神经元最多,胞体大,突起长;HCNP组神经元数量较前组少,胞体较小,突起数量和长度均小于前组;对照组则仅有少量胞体小、突起短的神经元。HCNP与切割穹窿海马伞侧海马提取液联合培养组神经元成熟度优于其它两组。结论 HCNP对神经干细胞向神经元的分化具有明显促进作用。
- 杨伟伟李浩明金国华田美玲秦建兵
- 关键词：神经干细胞神经元
- 壳聚糖支架与神经干细胞生物相容性的研究被引量：16
- 2007年
- 为探讨壳聚糖多孔支架与神经干细胞(NSCs)的生物相容性,应用冷冻干燥技术制备壳聚糖多孔支架,将神经干细胞克隆球接种于壳聚糖支架载体上,分为NSCs+支架组和NSCs+支架+NGF组。培养2周后冰冻切片,行Nissl染色及微管相关蛋白-2(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和2,3-环核苷酸磷酸二酯酶(CNP)免疫组化染色来检测NSCs的分化,并进行MAP-2阳性细胞计数、胞体面积、细胞周长的图像处理和统计分析。结果显示:壳聚糖支架孔隙率为90%,支架孔径为50～350μm。NSCs可以在壳聚糖支架上存活、迁移并分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。NSCs+支架+NGF组的MAP-2阳性细胞数明显多于NSCs+支架组,且胞体较大,突起较多且长。上述结果提示,壳聚糖支架与NSCs具有良好的生物相容性,外源性的NGF能够促进壳聚糖支架中的NSCs向神经元分化。
- 衣昕金国华田美玲秦建兵毛伟峰黄镇谭雪锋
- 关键词：壳聚糖多孔支架神经干细胞神经生长因子生物相容性分化
- 海马胆碱能神经元刺激肽促进海马胆碱能神经元再生的研究
- 2015年
- 目的:探讨海马胆碱能神经元刺激肽(HCNP)对切割穹窿海马伞后海马胆碱能神经元的促进作用。方法:36只SD大鼠随机分成两组,切割右侧穹窿海马伞后,术后连续5d腹腔注射BrdU,经侧脑室分别注射HCNP和人工脑脊液(ACSF),每3天1次,共6次。切割术前、术后及治疗术后行Morris水迷宫行为学测试;术后第35天,灌注取脑行溴脱氧尿苷(5-BrdU)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫荧光检测;提取总RNA,RT-PCR检测ChAT mRNA表达量;提取总蛋白,Western blot检测ChAT蛋白表达。结果:切割穹窿海马伞后,两组大鼠平均逃避潜伏期(AEL)均明显增加,记忆力下降,经过治疗后,实验组大鼠AEL显著缩短,对照组无改善,两组AEL有显著性差异(P<0.05);HCNP组海马齿状回颗粒下层可见较多BrdU阳性细胞及海马ChAT阳性神经元,ACSF组仅见少量BrdU阳性细胞,未见ChAT阳性神经元;RT-PCR结果显示,HCNP组ChAT mRNA约为ACSF组2倍(P<0.01);Western blot结果表明,实验组ChAT蛋白相对表达量为0.412±0.018、对照组为0.218±0.017,实验组明显高于对照组,二者存在显著性差异(P<0.01)。结论:HCNP可促进海马齿状回颗粒下层神经干细胞的增殖及其向胆碱能神经元分化。
- 杨伟伟金国华秦建兵李浩明田美玲
- 关键词：海马神经干细胞神经元胆碱能神经元
- BDNF、NGF对体外培养的胚胆碱能神经元生长发育的影响被引量：12
- 1997年
- 本文用AChE组化方法，研究了BDNF、NGF对培养的胚鼠基底前脑胆碱能神经元的作用及BDNF和NGF的协同作用。结果表明BDNF和NGF都具有增加AChE阳性神经元数量的作用，二者的不同在于BDNF作用出现的时间较早、强度较小；而NGF作用出现的时间较迟但强度较大。并发现BDNF对体外培养的胚胆碱能神经元胞体早期的生长发育作用比较明显，而NGF的作用则不甚显著。BDNF对胚胆碱能神经元发出突起和突起的延伸作用较NGF强。BDNF和NGF的联合作用较单独使用BDNF或NGF为好。本文的结果提示在体外培养中两种营养因子联合应用较只用一种因子有益。
- 金国华徐慧君武义鸣田美玲钟世镇
- 关键词：胆碱能神经元神经营养因子神经生长因子
- 海马放射状胶质细胞的体外诱导激活及其意义被引量：6
- 2009年
- 为探讨海马放射状胶质细胞在切割穹窿海马伞侧海马提取液的诱导下形态发生的变化,将培养的海马胶质细胞接种于24孔培养板中,分成诱导组和对照组,诱导组加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液,对照组加入单纯的细胞培养液,分别于培养后1、3、7和14d时行BLBP免疫荧光检测和Hoechst标记。计算两组各天时BLBP阳性细胞占Ho-echst阳性细胞的百分比,并用LeicaQiwn图像处理软件检测BLBP阳性细胞的周长和面积(含突起)。Stata8.0统计软件行组间比较。结果显示,1d时诱导组BLBP阳性细胞的比例稍高于对照组,两组细胞胞体均较小,突起均较短较细,无明显差异;3d时,诱导组BLBP阳性细胞的比例明显高于对照组,且胞体较大,突起较粗较长;7d时诱导组BLBP阳性细胞的比例明显高于对照组达到高峰,胞体更大,突起更粗更长交织成网;14d时两组BLBP阳性细胞的比例均稍有降低,但诱导组的比例仍明显高于对照组,两组细胞的胞体稍变小,突起稍变细变短。上述结果提示,切割穹窿海马伞侧海马提取液可明显地诱导BLBP阳性放射状胶质细胞增殖,并使胞体变大,突起变粗变长,呈"激活"状态。
- 赵荷艳田美玲施金洪秦建兵张新化金国华
- 关键词：免疫荧光细胞培养
- 穹窿海马伞切割侧海马提取液对神经干细胞分化为神经元的促进作用被引量：35
- 2004年
- 目的 探讨穹窿海马伞切割侧海马提取液对神经干细胞分化为神经元和AChE阳性神经元的影响。 方法 切割SD大鼠右侧穹窿海马伞 ,14d后取两侧海马制成提取液 ;将神经干细胞接种于 3块 2 4孔培养板中 ,每板分成切割组、正常组和对照组各 8孔 ,前 2组分别加入切割侧和正常侧海马提取液。第 1、2块分别于第 7d和14d时行MAP 2免疫荧光检测 ;第 3块于 10d时行AChE组织化学染色。计数MAP 2和AChE阳性神经元数 ,观察胞体大小和突起长度。 结果 切割组第 7d时MAP 2阳性神经元较多 ,胞体大、突起长 ,14d时细胞进一步迁移、成熟 ;正常组第 7d时仅见少量突起短的MAP 2阳性神经元 ,14d时细胞稍增多 ,突起稍增长 :对照组第 7d时未见MAP 2阳性神经元 ,14d时仅有少量胞体小、突起短的MAP 2阳性神经元。第 10d切割组AChE阳性神经元较多 ,突起多而长 ,正常组仅见少量无突起的AChE阳性神经元 ,对照组未见AChE阳性神经元。 结论 穹窿海马伞切割侧海马提取液可明显促进神经干细胞分化为神经元和AChE阳性神经元。
- 金国华张新化田美玲秦建兵黄镇徐慧君
- 关键词：穹窿海马伞切割神经干细胞分化神经元
- 切割海马伞海马中56、65、83 kD差异蛋白诱导神经干细胞向神经元和AChE阳性神经元分化的协同作用研究
- ＜正＞目的:探讨海马组织中56、83kD蛋白在诱导NSCs向神经元分化方面是否具有协同作用,以及56、65、83kD差异蛋白对NSCs向AChE阳性神经元定向分化的影响。方法:将切割海马伞后14d海马与正常海马组织匀浆电...
- 金国华张蕾田美玲秦建兵朱蕙霞张新化徐慧君
- 关键词：海马神经干细胞分化
- 文献传递
- 大鼠海马内移植神经干细胞的存活和迁移被引量：25
- 2003年
- 为观察成鼠神经干细胞移植入切割海马伞侧海马和正常侧海马后的存活和迁移状况 ,用无血清培养和单细胞克隆技术获取成年 SD大鼠前脑室下带组织的神经干细胞 ,并用 Brd U标记、扩增。在切割 SD大鼠右侧海马伞术后 14 d,将标记有 Brd U的神经干细胞植入双侧海马齿状回中。分别于术后 1周、2周、1个月和 2个月时取脑、冰冻切片 ,进行 Nissl染色和 Brd U免疫荧光检测。结果发现 ,1周和 2周时移植细胞主要围绕在移植点周围 ;1个月和 2个月时 ,移植细胞沿着海马齿状回颗粒下层迁移排列成条带。在所有的脑组织切片中 ,切割海马伞侧海马内移植细胞的密度均明显地大于正常侧海马内的移植细胞密度 ,且切割海马伞侧海马内 Nissl深染的大胞体神经元样细胞明显地多于正常侧。提示 ,移植至海马齿状回中的神经干细胞可存活并可沿海马齿状回颗粒下层迁移 ;切割海马伞侧海马中存活和迁移的神经干细胞密度大于正常侧者 。
- 金国华张新化田美玲黄镇秦建兵徐慧君
- 关键词：神经干细胞存活迁移海马
