黄怡
- 作品数:80 被引量:345H指数:9
- 供职机构:广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金:浙江省重大科技专项基金国家重点基础研究发展计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 水牛免疫乳的生物学特性研究被引量:7
- 2004年
- 水牛免疫乳提取物中的免疫球蛋白(IgG)以终浓度为1.0mg/ml加入到霍乱弧菌和伤寒杆菌的培养液中时,能有效地抑制这两种菌的生长;IgG在pH为4.0~9.0范围比较稳定,在pH低于4.0条件下,随着pH下降,变性率剧烈上升;pH为2.0~4.0时,IgG的活性随着胃蛋白酶用量和作用时间的增加而下降,pH2.0时下降速度最快;pH为7.4时,胰蛋白酶对IgG活性影响很小,不改变IgG的凝集价。
- 王士长黄怡劳泰财李兴芳
- 关键词:生物学特性免疫球蛋白胃蛋白酶胰蛋白酶抑菌作用
- 屎肠球菌活菌和热灭活菌对RAW264.7细胞肿瘤坏死因子-α/白细胞介素-10平衡以及丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响被引量:5
- 2020年
- 本试验旨在通过体外试验研究益生菌屎肠球菌活菌和热灭活菌免疫调节作用的差异。试验分为2部分:1)研究屎肠球菌的类型、剂量和作用时间对RAW264.7细胞的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)/白细胞介素-10(IL-10)平衡的影响。试验共设12个组,每个组6个重复。采用3因素2水平设计试验方案。因素1及水平:屎肠球菌类型,活菌或热灭活菌;因素2及水平:剂量,106或108 CFU/mL;因素3及水平:作用时间,3或6 h。在3和6 h作用时间下分别设置阴性对照(DMEM细胞基础培养液)和阳性对照[脂多糖(LPS),2μg/mL]。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组细胞培养上清中TNF-α和IL-10含量,据此计算TNF-α/IL-10的比值。2)研究屎肠球菌活菌或热灭活菌对由LPS引起RAW264.7细胞的TNF-α/IL-10失衡的调节作用。试验共设8个组,每个组6个重复。对照组用DMEM细胞基础培养液处理细胞3 h,LPS组用LPS(2μg/mL)处理细胞3 h;LB-LPS或HB-LPS组先用屎肠球菌活菌或热灭活菌处理细胞3 h,再用LPS处理3 h;LPS-LB或LPS-HB组先用LPS处理细胞3 h,再用屎肠球菌活菌或热灭活菌处理3 h;LPS+LB或LPS+HB组用屎肠球菌活菌或热灭活菌与LPS同时共处理细胞3 h。采用ELISA法检测各组细胞培养上清中TNF-α和IL-10含量,然后计算TNF-α/IL-10的比值,用Western blot法检测磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、磷酸化p38(p-p38)以及磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)的蛋白相对表达量。结果表明:1)屎肠球菌类型、剂量、作用时间中的1个或多个因素极显著影响TNF-α或IL-10含量(P<0.01),或者TNF-α/IL-10比值(P<0.01),3个因素的两两或三者之间的交互效应因细胞因子而异。屎肠球菌热灭活菌对TNF-α分泌的诱导作用极显著弱于活菌(P<0.01),对IL-10含量的影响与活菌相似(P>0.05),对TNF-α/IL-10比值的影响小于活菌(P<0.05或P<0.01),且低剂量(106 CFU/mL)热灭活菌在作用时间较短(3 h)时能维持TNF-α/IL-10平衡。2)屎�
- 任亚雪郭乾鹏李媛媛向明黄怡
- 关键词:屎肠球菌活菌肿瘤坏死因子-Α白细胞介素-10RAW264.7细胞
- 应用限制性片段长度多态性分析(ARDRA)技术研究竹鼠盲肠细菌菌群的多态性
- 周建波朱敏朱亚静秦红玉黄怡周精华王士长
- 关键词:竹鼠ARDRA
- 鼠李糖乳杆菌对巨噬细胞先天性免疫应答的调节作用被引量:8
- 2012年
- 【目的】通过测定先天性免疫效应因子分泌水平的变化,研究鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)体外对巨噬细胞先天性免疫应答调节的影响。【方法】将培养好的鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞分为4组,分别用PBS(CT组,对照组)、Escherichia coli K88(EC组)和Lactobacillus rhamnosus(LR组)处理12 h,以及先用Lactobacillus rhamnosus预处理1 h,再用Escherichia coli K88处理12 h(LR-EC组)。试验结束时,收集各组的细胞培养液,用ELISA检测TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-8、IL-10,以及PGE2和的含量。【结果】结果表明,CT组(对照组)可产生TNF-α、IFN-γ、IL-8和IL-10,几乎不产生IL-1β、IL-6和IL-12。与对照组相比,EC组TNF-α、IFN-γ、IL-8、IL-10及PGE2和含量均极显著提高(P<0.01),且可大量产生IL-1β、IL-6和IL-12;LR组TNF-α、IFN-γ、IL-10及PGE2和也极显著提高(P<0.01),IL-8显著增加(P<0.05),同样不产生IL-1β和IL-6,但可产生微量的IL-12(P<0.01);LR-EC组所有的促炎细胞因子(TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-6、IL-12)、趋化因子IL-8和PGE2均极显著高于EC组(P<0.01),但IL-10和含量都显著低于EC组(P<0.01)。【结论】在体外试验条件下,鼠李糖乳杆菌作为益生菌对生理状态下巨噬细胞先天性免疫应答的刺激作用远低于病原菌,不会产生炎症反应,但可极大增强受感染巨噬细胞的促炎免疫应答水平,且可能具有避免过度炎症反应的作用。
- 黄琴黄怡崔志文李雅丽李卫芬余东游
- 关键词:RAW264.7细胞鼠李糖乳杆菌大肠杆菌K88趋化因子PGE2O2
- 应用扩增性rDNA限制性酶切片段多态性分析技术研究竹鼠盲肠细菌菌群的多样性被引量:3
- 2013年
- 本试验应用扩增性rDNA限制性酶切片段多态性分析(ARDRA)技术研究竹鼠盲肠细菌菌群的多样性。利用免培养的分子生物学技术,从竹鼠盲肠内容物中提取细菌的总DNA,用细菌通用引物F27/R1492扩增出细菌16S rDNA的基因,构建16S rDNA基因文库。采用HaeⅢ和HhaⅠ2种限制性内切酶对阳性克隆子的扩增产物进行酶切,挑选不同的操作分类单元(OTU)测序,通过Blast在线比对,分析竹鼠盲肠细菌菌群的多样性。结果表明:竹鼠盲肠中的细菌菌群大部分是未培养或未知的菌株,在分类学上具有潜在意义的被选菌株,而且存在可能和脂肪代谢有关的微生物群体。同时也有乳酸菌属、芽孢杆菌属、梭形杆菌属和多黏类芽孢杆菌属的分布。从结果中看出,芽孢杆菌属、梭形杆菌属和2个未知菌株的克隆数都大于20个,是优势菌株。
- 周建波姜亚宁俊平曹晓燕黄怡王士长
- 关键词:竹鼠RDNAARDRA克隆
- 屎肠球菌EF1对肠上皮细胞膜的保护作用
- 球菌是一种可直接饲喂的益生菌菌种,能够调节肠道微生态平衡、防治腹泻以及提高动物的生产性能,作用与抗生素相当。本课题组从健康仔猪空肠勃膜中分离到一株屎肠球菌EF1,具有产酸能力强、耐胆盐、抑制肠道致病菌生长、促进断奶仔猪生...
- 黄怡李卫芬
- 关键词:饲料添加剂
- 芽孢杆菌对体外肠上皮细胞黏附和细胞膜完整性的影响被引量:1
- 2013年
- 以Caco-2细胞作为体外模型研究芽孢杆菌对细胞黏附、细胞存活率及细胞膜完整性的影响。采用荧光标记法探究芽孢杆菌、大肠杆菌K88和猪霍乱沙门菌对Caco-2细胞的黏附特性,并通过排斥、竞争和置换试验测定其对病原菌黏附的阻断作用。采用台盼蓝染色法测定Caco-2细胞存活率和细胞培养上清乳酸脱氢酶(LDH)活性来反映细胞膜的完整性。结果表明:芽孢杆菌对Caco-2细胞的黏附率均低于病原菌、且对病原菌的黏附无阻断作用,大部分芽孢杆菌不会影响细胞存活率及细胞膜的完整性,对细胞无毒。
- 黄琴白洁汪启翰黄怡李雅丽余东游李卫芬
- 关键词:CACO-2细胞芽孢杆菌大肠杆菌K88猪霍乱沙门菌
- 屎肠球菌对断奶前仔猪小肠黏膜屏障功能的影响
- 观察屎肠球菌(Enterococcusfaecium)EF1对断奶前仔猪小肠黏膜屏障功能的影响,为阐明其益生作用机理提供依据.随机选取胎次、窝产仔数和出生时间相近、体重差异不显著的6窝杜×长×大外三元...
- 黄怡李卫芬崔志文李雅丽余东游黄琴
- 关键词:屎肠球菌断奶前仔猪肠黏膜菌群结构细胞因子TLR
- 杂交水牛初乳和常乳微量元素含量比较被引量:1
- 2010年
- 为了研究印度摩拉×广西本地水牛初乳和常乳中Zn、Fe、Cu、Cr、Se含量,了解水牛乳的利用价值,试验采集水牛分娩后3 d内的初乳以及泌乳中期的水牛常乳,用ICP-AES法和原子荧光分光光度法分析乳中相应微量元素的含量。结果表明,在初乳中Zn、Fe、Cu、Cr、Se含量分别为27.6,6.58,1.34,0.26,0.024 mg/kg,在常乳中分别为6.98,1.82,0.181,0.031,0.018 mg/kg。说明摩×本杂三代水牛初乳和常乳中都含有丰富的Zn,Fe,Cu,Cr和Se,尤其初乳具有较高的开发利用价值。
- 陈瑞芳王士长邹优敬覃小荣黄怡
- 关键词:微量元素初乳常乳杂交水牛
- 12株芽孢杆菌体外抗氧化特性比较研究被引量:2
- 2012年
- 为比较12株芽孢杆菌(B1到B12)的抗氧化性能,分别测定其培养上清和无细胞提取物中的抗氧化指标,包括1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除率、羟自由基清除率、还原性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果表明:所有菌株均具有上述抗氧活性,其中在无细胞提取物中DPPH清除率最高的菌株为B7,在培养上清中GSH-Px和SOD酶活性最大的菌株分别为B4和B11。
- 文静黄琴吴红照黄怡李卫芬
- 关键词:抗氧化体外芽孢杆菌