魏莲
- 作品数：10 被引量：37H指数：4
- 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：质检公益性行业科研专项项目国际科技合作与交流专项项目国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 中越河口-老街边境地区鼠传疾病病原的调查研究被引量：9
- 2010年
- 〔目的〕掌握中越河口—老街边境地区鼠携带汉坦病毒、钩端螺旋体和鼠疫杆菌的情况。〔方法〕2008年11月和2009年4月在云南省河口县和越南老街市的居民区用鼠笼捕鼠,取鼠肺、肝和肾脏组织。从鼠肺中提取RNA,用RT-PCR方法扩增汉坦病毒核酸;从鼠肝和肾脏中提取DNA,用PCR方法分别扩增鼠疫杆菌和钩端螺旋体核酸。〔结果〕在河口—老街边境地区捕获黄胸鼠、褐家鼠、大足鼠、小家鼠、臭鼳鼱和斯氏家鼠共198只,黄胸鼠数量最多,占总数的79.8%;从老街黄胸鼠鼠肺中检测到3份汉坦病毒核酸,阳性率为4.41%;从河口黄胸鼠、褐家鼠和大足鼠鼠肾中共检测到7份钩端螺旋体核酸,河口黄胸鼠钩端螺旋体核酸阳性率为11.36%;未检测到鼠疫杆菌核酸。〔结论〕中越河口—老街边境地区鼠传疾病病原有汉坦病毒和钩端螺旋体,应加强当地鼠传疾病的监测。
- 孙肖红张乐张建春魏莲张晓龙高旭周麟张勋王静
- 关键词：汉坦病毒钩端螺旋体鼠疫杆菌病原
- 裂谷热病毒荧光定量PCR检测方法的建立被引量：1
- 2012年
- 目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,用于裂谷热病毒的检测。方法通过序列对比在裂谷热病毒L基因保守区设计引物及Taqman探针,建立实时荧光定量PCR反应体系。结果经优化的荧光定量PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒标准品的灵敏度可达37拷贝/μl,通过检测同为蚊媒传播的日本脑炎病毒、黄热病毒、登革病毒、基孔肯亚病毒无交叉反应。结论本方法的建立在国境口岸传染病的防控方面有较好的应用前景。
- 杨志红李长田杨宇白琳魏莲王静
- 关键词：荧光定量PCR裂谷热
- 应用TaqMan-BHQ探针实时荧光RT-PCR法定量检测马秋波病毒核酸
- 2010年
- 〔目的〕建立一种适应口岸马秋波病毒实时荧光定量RT-PCR快速的检测方法。〔方法〕用专业软件设计引物和TaqMan-BHQ探针,以人工合成马秋波病毒S基因的片段作为模板,进行实时荧光定量RT-PCR研究。〔结果〕模板的Ct值与模板稀释浓度的对数存在良好的线性关系,标准曲线为Y=-3.281X+50.975,R2=0.999361,PCR扩增效率为101.0%,其最低检出限为28 copies/μl。〔结论〕应用TaqMan-BHQ1探针的实时荧光RT-PCR检测马秋波病毒核酸,具有耗时短、灵敏度高等特点。
- 燕清丽张晓龙魏莲姚李四
- 关键词：实时荧光RT-PCR
- 基孔肯雅病毒荧光定量PCR检测方法的建立被引量：3
- 2012年
- 目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,检测基孔肯雅病毒。方法通过序列比对挑选出基孔肯雅病毒基因组中高度保守的序列,在此序列上设计引物及TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR反应体系。结果经优化的荧光定量PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒标准品的灵敏度可达21拷贝/μl,通过检测与传播媒介相似的流行性乙型脑炎病毒、黄热病毒、登革热病毒无交叉反应。结论该方法的建立在基孔肯雅热的疾病防控方面有较好的应用前景。
- 杨宇白琳胡健萍姚李四魏莲杨志红王静
- 关键词：荧光定量PCR基孔肯雅病毒
- 一种用于快速检测人禽流感病毒的非诊断性双抗体夹心法
- 本发明公开了一种用于快速检测人禽流感病毒的非诊断性双抗体夹心法，用鼠单抗包被ELISA，用特异性兔多抗形成抗体抗原抗体复合物，用辣根过氧化物酶标记的羊抗兔形成检测抗体，通过采用双抗体ELISA法来进行检测人禽流感病毒。本...
- 杨宇魏莲王静
- 黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法建立被引量：4
- 2012年
- 目的建立用于检测黄病毒属的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法。方法从GenBank中检索黄病毒属代表株的全基因序列,通过DNAstar进行序列比对和blast进行保守序列搜索和分析,用Beacon Designer 7.0软件进行引物和TaqMan探针设计,以乙脑毒株MB090509 RNA为模板,优化反应条件并应用于现场蚊虫标本检测。结果确定黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR反应条件为:45℃15 min,95℃10 min,95℃10 s→54℃45 s,40次循环,引物和探针终浓度为200 nmol/L。灵敏度为常规RT-PCR方法 100倍,检出限2.9×10-3噬斑形成单位(PFU)/mL,与甲病毒属、东南亚十二节段RNA病毒属、布尼亚病毒属均无交叉反应。从161份现场蚊虫标本中检测出11份阳性标本,经病毒分离、测序均被证实为乙脑病毒。结论本研究建立的黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法具有广泛应用价值。
- 郭金金孙肖红燕清丽方艳辉杨鹏飞魏莲张晓龙姚李四
- 关键词：黄病毒属
- 云南省一株版纳病毒的分离和鉴定被引量：8
- 2010年
- 目的 对2008年在云南省勐腊县采集的蚊虫进行版纳病毒（BAV）分离和鉴定.方法 2008年7月在勐腊县南嘎村人房和畜圈采集蚊虫标本,用细胞培养法进行虫媒病毒分离并鉴定,测定分离到的BAV第5、8及11节段序列,利用MEGA4软件进行系统进化分析.结果 共采集到蚊虫7种1731只,分离到1株导致C6/36细胞产生规律病变的分离物,经血清学和分子生物学鉴定为BAV,系统进化分析显示第8节段和中国分离株关系最近,而第11节段和越南分离株关系最近.结论 系统进化分析提示该BAV毒株可能与越南分离株之间发生了基因重配.
- 孙肖红张晓龙刘宇夫王静魏莲高旭赵文张勋杨学兵张乐
- 关键词：版纳病毒
- 2009年中俄边境黑龙江四口岸啮齿动物及其感染病原调查研究被引量：9
- 2010年
- 〔目的〕调查黑龙江中俄边境口岸地区啮齿动物及其体表寄生虫的种类、构成和携带病原体的情况。〔方法〕2009年6-7月在黑龙江省黑河、逊克、抚远和饶河口岸地区,以夹夜法捕鼠,梳刷法采集鼠体表寄生虫,取鼠血、肺、肝和肾脏组织。鼠肺提取RNA,用RT-PCR方法扩增汉坦病毒核酸;从鼠肝和肾脏中提取DNA,用PCR方法分别扩增鼠疫耶尔森菌、土拉弗兰西斯菌、斑疹伤寒立克次体和钩端螺旋体核酸;利用间接血凝法、ELISA、免疫层析方法从鼠血中检测5种病原的特异性抗体。〔结果〕在黑龙江边境4个口岸地区共捕获啮齿动物10种,163只;捡蚤63匹、螨44只,染蚤率为7.36%,蚤指数为0.39;获得肝、肺和肾脏组织及血液有效样本161份,检出汉坦病毒血清学阳性3份,PCR扩增阳性结果1份;钩端螺旋体血清学阳性2份。鼠疫菌、斑疹伤寒立克次体和土拉菌的血清学和分子生物学检测结果均为阴性。〔结论〕中俄边境地区鼠类可能感染汉坦病毒和钩端螺旋体,有针对性地加强当地鼠类和鼠传疾病的监测。
- 张晓龙赵婷婷魏莲胡孔新孙肖红李明郭晓明杨军李永久王静
- 关键词：啮齿动物鼠传疾病钩端螺旋体
- 中俄双边七个口岸地区鼠传疾病病原体调查被引量：5
- 2011年
- 对2007年中俄联合监测小组在中俄边境7个口岸地区捕获的鼠进行病原体检测，以了解中俄边境鼠传疾病病原体携带情况。采用RT．PCR法检测鼠肺标本中的汉坦病毒RNA。PCR方法检测鼠肝脏、脾脏中的鼠疫杆菌、土拉杆菌、莫氏立克次氏体的DNA核酸。PCR方法检测肾脏中钩端螺旋体DNA核酸。ELISA方法检测血清中出血热病毒总抗体。胶体金法检测鼠疫杆菌抗体、钩端螺旋体抗体、土拉杆菌抗体、英氏立克次氏体抗体。结果显示鼠疫杆菌抗体、钩端螺旋体抗体、土拉杆菌抗体、立克次体抗体检测结果均为阴性。鼠疫杆菌、土拉杆菌、立克次体，钩端螺旋体的DNA核酸检测结果均为阴性。汉坦病毒3例核酸阳性，出血热总抗体8例阳性。结果表明中国抚远、俄罗斯布市、哈巴3个口岸地区应该注意肾综合征出血热的防控。
- 曹晓梅王静孙肖红胡孔新魏莲高旭赵刚王玉梅
- 关键词：中俄病原体
- 一种用于快速检测人禽流感病毒的非诊断性双抗体夹心法
- 本发明公开了一种用于快速检测人禽流感病毒的非诊断性双抗体夹心法，用鼠单抗包被ELISA，用特异性兔多抗形成抗体抗原抗体复合物，用辣根过氧化物酶标记的羊抗兔形成检测抗体，通过采用双抗体ELISA法来进行检测人禽流感病毒。本...
- 杨宇魏莲王静
- 文献传递
