高伟
- 作品数：24 被引量：44H指数：3
- 供职机构：北京林业大学理学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 福氏痢疾杆菌组氨酸合成中双功能焦磷酸水解酶和磷酸核糖环化水解酶双功能蛋白的初步研究被引量：1
- 2009年
- 福志贺氏菌属是一类革兰氏阴性杆菌,是引起人类细菌性痢疾的主要致病源。以福志贺氏痢疾杆菌2a型301株全基因组为模板、以pET22b-(+)为载体、克隆了一个关键基因:组氨酸合成途径中双功能焦磷酸水解酶和磷酸核糖环化水解酶蛋白(简称:sf2088)。以BL21(DE3)为表达菌株,优化表达条件,获得了可溶表达的蛋白。经过亲和层析和分子筛层析获得目标蛋白。采用分析超速离心和动态光散射实验,对纯化后的蛋白进行稳定聚集状态的条件搜索,结果发现锌离子对稳定其聚合状态很重要。通过正交实验,获得蛋白保持稳定聚集态的条件。这对该酶的进一步研究奠定了基础。
- 陆庆宇王其海张占钰袁道鹏高伟仓怀兴毕汝昌
- 叶绿体分裂蛋白PDV1胞质侧结构域可溶性表达条件的研究及纯化被引量：2
- 2012年
- 目的:探索叶绿体分裂蛋白PLASTID DIVISION1(PDV1)胞质侧结构域的高效可溶性表达条件,并得到高纯度目的蛋白。方法:通过改变表达载体种类、基因片段大小、诱导剂浓度、诱导温度的方法,以及运用分子伴侣的协助,实现目的蛋白高效可溶性表达。通过镍柱亲和层析和分子筛层析纯化目的蛋白。结果:(1)带His标签的目的蛋白大部分以包涵体形式存在于沉淀中;(2)截掉疏水区域并与增溶标签GST或NusA融合表达,再通过改变诱导表达条件,可以实现PDV1胞质侧结构域的可溶性表达;(3)比较目的蛋白可溶性表达量,选择高效可溶性表达体系,并在该条件下纯化得到高纯度目的蛋白。结论:PDV1胞质侧结构域的高效可溶性表达及纯化,为进一步研究该蛋白的结构及其在叶绿体分裂过程中的作用奠定了一定基础。
- 韩翠晓李锋严孝金冯舵李倩倩高宏波高伟
- 关键词：叶绿体分裂可溶性表达蛋白纯化
- 传染性法氏囊病病毒VP5蛋白跨膜区的敲除及可溶性原核表达研究
- 2011年
- [目的]构建敲除传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP5蛋白跨膜区序列的原核表达载体,并进行目的蛋白的表达、分离和纯化。[方法]利用PCR技术分别扩增IBDVVP5基因的胞外片段和胞内片段,然后将2个片段及pET-28b(+)同时相接,即载体-胞内片段-胞外片段-载体,构建了敲除跨膜区基因片段的VP5重组表达质粒pET-VP5-FC及改进后的pET-VP5-SC。将表达质粒转化BL21(DE3),IPTG诱导后经Ni亲和层析及凝胶过滤层析纯化重组蛋白。[结果]得到可溶性表达的IBDVVP5。[结论]为进一步研究VP5蛋白的结构与功能奠定了基础。
- 严孝金李锋秦立廷李倩倩韩翠晓冯舵王笑梅高伟
- 关键词：传染性法氏囊病病毒原核表达
- 防腐结构刨花板的制备及其组分反应机理研究
- 结构刨花板是工程、建筑用木质复合材料中最重要的种类之一,而耐腐性能是制约其更广泛应用的首要因素。因此,开发综合性能优异的结构刨花板用防腐剂及其使用方法势在必行。本论文分别将五硼酸铵、五硼酸铵与聚乙二醇、纳米氧化铜和碱式碳...
- 高伟
- 关键词：结构刨花板酚醛树脂固化动力学分子结构
- 文献传递
- 番茄种子消毒方法探究被引量：19
- 2019年
- 番茄种子表面常常带有病原微生物,故在培养番茄无菌苗时,需要进行消毒。传统番茄种子的消毒剂是氯化汞,而其较大的毒性和消毒原理限制其在实验室及实际生产上的应用。因此,本研究开发出一套新的采用无毒或低毒试剂的消毒方法来制备番茄无菌苗,从而消除重金属离子对蛋白质的变性作用,并排除杂菌污染,进而为探究蛋白类物质对番茄的促生作用做前期实验方法的研究铺垫。对氯化汞、次氯酸钠和过氧化氢三种消毒剂采用正交实验,选取各自合适的浓度和时间梯度联合洗衣粉和 75%乙醇消毒效果进行最佳消毒条件的摸索。结果表明,20%次氯酸钠消毒 5 min 以及 8%次氯酸钠消毒+1%吐温 20 消毒 1 min 的消毒效果较好,但吐温 20 对幼苗的苗重有一定的抑制作用。运用单因素实验设计对正交实验结果进行验证和进一步摸索消毒条件,结果表明,次氯酸钠消毒对种子萌发率影响不大,次氯酸钠浓度在 10%~40%的差异不显著,故最佳的消毒方式为 10%次氯酸钠消毒 5 min。通过蛋白质溶液进行消毒条件的验证,最终表明,建立的番茄种子消毒方法可以用于研究活性物质对番茄的生理作用,且消毒效果较好。
- 刘昊杨雨晴邵一飞高伟陈永臣姚宇峰
- 关键词：种子消毒番茄
- 一种豇豆胰蛋白酶抑制剂基因、及其应用、大量制备豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法
- 本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种豇豆胰蛋白酶抑制剂基因、及其应用、大量制备豇豆胰蛋白酶抑制剂的方法。如上所述本发明的发明人首先利用PCR反应从豇豆基因组DNA中直接获得CPTI基因(CPTI基因不含有内含子...
- 高伟李峰陆庆宇
- 文献传递
- 福氏志贺痢疾杆菌硫胺素单磷酸激酶(ThiL)表达纯化及晶体生长研究被引量：1
- 2010年
- 硫胺素单磷酸激酶(ThiL)在ATP存在下催化硫胺素单磷酸(TMP)形成硫胺素焦磷酸(TPP)和ADP,硫胺素焦磷酸就是维生素B1的活性形式。硫胺素单磷酸激酶属于一个小的ATP结合蛋白超家族成员。将来源于福氏志贺痢疾杆菌2a(301株)ThiL基因构建入pET-22b(+)表达载体,在大肠杆菌中得到高效表达,经过两步纯化,得到高纯度蛋白,用于晶体生长,经过对其晶体生长条件进行摸索和优化,得到了能用于X-射线衍射的单晶,为其结构解析、催化机理研究和药物设计提供了基础。
- 尚桂军丁志强赵子华聂荣鑫高伟仓怀兴
- 福氏志贺菌硫氧还过氧化物酶的表达、纯化、活性检测及晶体生长的初步研究被引量：2
- 2012年
- Sf2523蛋白属于硫氧还蛋白过氧化物酶(Prx)家族,在有氧代谢过程中消除活性氧,起到保护生命大分子的重要作用。通过构建原核表达体系,可溶性表达并纯化了Sf2523酶蛋白,并对蛋白进行了过氧化物酶活性检测,证明其依然具有天然活性,酶的核心结构并未发生变化。由分子排阻色谱结果发现,酶蛋白体内和体外聚集状态不同,离体蛋白聚集状态不稳定,趋于二体化。将纯化的单体蛋白即时进行了结晶实验,初筛长出了针状晶体。通过进一步切除标签蛋白进行优化处理,最终得到了均匀的三维单晶。
- 冯舵张阔李倩倩韩翠晓高伟
- 关键词：蛋白纯化酶活性晶体生长
- 对惠斯通电桥实验教学的探索与实践
- 电桥是用比较法进行测量的电路，可以测量电阻、电容、频率、温度、压力等物理量。根据用途的不同，电桥有许多类型，结构和性能也各有特点，但基本原理是相同的。由于电桥法测量的精度高，所以它是电磁学实验的重要组成部分。惠斯通电桥实...
- 高伟
- 关键词：大学物理电磁学实验惠斯通电桥教学效果
- 文献传递
- 木质活性碳纤维表面与结构氧化改性研究
- 以木质活性碳纤维(WACF)氧化改性和结构演变规律为目的，研究了WACF的制备并使用硝酸和硝酸铈铵(CAN)氧化改性，探究了二者协同改性规律，主要结论如下: (1)得到了WACF的制备工艺和基本性能。改性前WACF氧原...
- 高伟
- 关键词：氧化改性硝酸硝酸铈铵
