饶黎霞
- 作品数:13 被引量:41H指数:4
- 供职机构:浙江大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家现代农业产业技术体系建设项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 分泌抗南方水稻黑条矮缩病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用
- 本发明公开了一种分泌抗南方水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗的应用。用与牛血清白蛋白偶联的南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)的衣壳蛋白的C端12个氨基酸的多肽为抗原免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、筛选、...
- 周雪平吴建祥倪跃群刘欢饶黎霞
- 2011-2012年三种水稻矮缩病在我国的分布及发生调查被引量:6
- 2014年
- 水稻黑条矮缩病毒、南方水稻黑条矮缩病毒和水稻锯齿矮缩病毒均可以引起水稻矮缩病。于2011-2012年,利用dot-ELISA和RT-PCR方法对江苏、浙江、江西、广西、海南、云南、贵州、四川、重庆、湖南等省的水稻矮缩病进行调查。检测结果表明,2011年水稻中3种矮缩病的病毒感染率分别为:水稻黑条矮缩病毒10.92%,南方水稻黑条矮缩病毒30.67%,水稻齿叶矮缩病毒4.62%。2012年水稻中3种矮缩病的病毒感染率分别为:水稻黑条矮缩病毒0.40%,南方水稻黑条矮缩病毒48.38%,水稻齿叶矮缩病毒26.32%。检测结果说明2012年的南方水稻黑条矮缩病害、水稻齿叶矮缩病害重于2011年,水稻黑条矮缩病害轻于2011年。水稻黑条矮缩病主要发生于江苏、浙江等省;南方水稻黑条矮缩病主要在广西、海南、云南、贵州、重庆、浙江等省区流行;水稻齿叶矮缩病在广西、海南、云南等地均有发生,且往往与南方水稻黑条矮缩病毒复合感染。
- 饶黎霞王震成吴建祥周雪平
- 关键词:水稻黑条矮缩病毒南方水稻黑条矮缩病毒水稻齿叶矮缩病毒DOT-ELISART-PCR
- 检测南方水稻黑条矮缩病毒胶体金免疫试纸条的建立被引量:4
- 2017年
- 由白背飞虱Sogatella furcifera(Horváth)传播的南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice blackstreaked dwarf virus,SRBSDV)是目前我国南方水稻上危害最严重的病毒,为开发简便、快速、准确的SRBSDV病毒检测技术和检测试剂,以感染SRBSDV的植物粗提液为免疫原,利用杂交瘤技术制备了2株抗SRBSDV的单抗(14A8和15G6),并利用制备的单抗建立了可快速、特异、灵敏地检测SRBSDV的胶体金免疫试纸条。结果表明,2株制备单抗的抗体类型及亚类均为Ig G1、kappa链,单抗腹水的间接ELISA效价均达到10^(-7);Western blot分析表明,2株单抗均与SRBSDV的外壳蛋白亚基有特异反应,而不与水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)反应。以制备14A8和15G6单抗分别为捕获抗体和胶体金标记抗体,开发成能在5 min内准确、特异地检测水稻植物和白背飞虱传毒介体体内SRBSDV的胶体金免疫试纸条;灵敏度分析表明,该检测试纸条的检测水稻病叶的灵敏度达到1∶6 400倍(g/m L),检测单头携毒白背飞虱的灵敏度达到1∶51 200倍(单头/μL)。田间样品检测结果表明,该试纸条的检测结果与RT-PCR的符合率达到100%。建立的SRBSDV胶体金免疫试纸条可对南方水稻黑条矮缩病毒进行快速、特异、灵敏的诊断和检测。
- 吴建祥饶黎霞陈浙傅帅周雪平
- 关键词:南方水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体白背飞虱
- 黄瓜绿斑驳花叶病毒与甘蔗花叶病毒基因组测序及种群遗传结构分析
- 黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)和甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)是农作物上的两种重要病毒,其分布范围广,危害重...
- 饶黎霞
- 关键词:黄瓜绿斑驳花叶病毒甘蔗花叶病毒基因组测序种群遗传结构
- 三种水稻病毒病在中国的发生分布及分子变异
- 南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)、水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)和水稻...
- 饶黎霞
- 关键词:水稻病毒病分子变异RT-PCR检测
- 分泌抗水稻黑条矮缩病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用
- 本发明公开了一种分泌抗水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株及其单抗的应用。用原核表达的方法表达水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)的外壳蛋白CP为抗原免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、筛选、克隆,获得1株能稳定传代并分泌抗R...
- 吴建祥周雪平倪跃群刘欢饶黎霞
- 马铃薯Y病毒单克隆抗体的制备及其检测应用被引量:11
- 2016年
- 马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)是危害农作物的重要病毒之一,在全球广泛传播并造成了严重的经济损失,而建立特异、灵敏的检测技术是防控PVY的关键。本研究以提纯PVYN病毒粒子为抗原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得4株能分泌PVY单克隆抗体的杂交瘤细胞株(3B2、3E4、20B2和25C2),杂交瘤细胞分泌的腹水单抗的效价在10^(-6)~10^(-7)之间,Western blot分析发现3B2、3E4和20B2这3株单抗仅与感染PVY的叶片中1条分子质量约为30ku的蛋白有特异性反应。该蛋白的分子质量与PVY的外壳蛋白亚基大小相符,推测制备的这3个单抗能识别PVY的外壳蛋白亚基,而25C2单抗与感染PVY的病叶组织中约55ku的蛋白有特异性反应。进而以制备的单抗为核心建立了检测植株中PVY的ACP-ELISA、dot-ELISA、tissue blot-ELISA和IC-RTPCR这4种血清学方法。特异性分析结果表明,这4种血清学方法检测感染PVY的样品呈阳性反应,而检测健康的烟草和马铃薯及感染马铃薯S病毒、马铃薯X病毒、马铃薯卷叶病毒、马铃薯A病毒的样品呈阴性反应;灵敏度分析结果表明,ACP-ELISA和dot-ELISA检测马铃薯病叶的灵敏度分别达1∶81 920倍和1∶10 240倍稀释(g/mL),而具有最高检测灵敏度的IC-RT-PCR方法在感病植物组织稀释到1∶5 242 880倍(g/mL)时仍能检测到病毒。用建立的血清学方法对2015年采自云南的30个田间马铃薯样品进行检测,结果发现其中有20样品感染PVY,且血清学方法的检测结果与RT-PCR结果一致。抗PVY特异、灵敏单抗的制备及血清学检测方法的建立,为我国作物上PVY的检测和诊断、脱毒种薯生产、抗病育种和科学防控提供了物质和技术支撑。
- 宋革郭玉双饶黎霞周雪平吴建祥
- 关键词:马铃薯Y病毒单克隆抗体DOT-ELISATISSUEIC-RT-PCR
- 携带水稻齿叶矮缩病毒的褐飞虱的获得方法及其应用
- 本发明公开了携带水稻齿叶矮缩病毒的褐飞虱的获得方法及其应用。利用感染RRSV的水稻活体植株或者冷冻保存的水稻病样饲喂褐飞虱,使其获得水稻齿叶矮缩病毒,再将褐飞虱移至不带毒的健康水稻叶片上饲喂,直至渡过病毒的循回期而获毒。...
- 吴建祥周雪平倪跃群徐毅刘欢周文武饶黎霞祝增荣
- 文献传递
- 南方水稻黑条矮缩病毒和水稻黑条矮缩病毒的单抗制备及其检测应用被引量:18
- 2013年
- 用与牛血清白蛋白偶联的南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)衣壳蛋白的C端12个氨基酸多肽为抗原免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、筛选、克隆,获得2株能稳定传代并分泌抗SRBSDV和水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株3F1、5G1。3F1、5G1单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6,抗体类型及亚类均为IgG1,kappa链。Western blot分析表明,2株单克隆抗体均与SRBSDV和RBSDV的外壳蛋白亚基有特异反应。利用单克隆抗体3F1建立的dot-ELISA检测方法能准确、特异、灵敏地检测田间稻飞虱及水稻样品中的SRBSDV和RBSDV。SRBSDV和RBSDV单克隆抗体的制备及检测方法的建立为水稻黑条矮缩病的诊断、预测预报及科学防控提供了技术支撑。
- 刘欢倪跃群饶黎霞吴建祥周雪平
- 关键词:南方水稻黑条矮缩病毒水稻黑条矮缩病毒多肽单克隆抗体
- 一种携带南方水稻黑条矮缩病毒的白背飞虱的获得方法及其应用
- 本发明公开了一种携带南方水稻黑条矮缩病毒的白背飞虱的获得方法及其应用。利用感染南方水稻黑条矮缩病毒的水稻或者冷冻保存的水稻病株饲喂白背飞虱,使白背飞虱获得SRBSDV,之后将带毒的白背飞虱转移至健康水稻上饲喂,直到渡过病...
- 周雪平吴建祥刘欢徐毅周文武饶黎霞倪跃群祝增荣
- 文献传递