雷建华
- 作品数：43 被引量：223H指数：9
- 供职机构：中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金“十五”国家科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰HBx基因对肝癌细胞化疗效果的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨RNA干扰技术和传统的化疗方法联合应用对肝癌细胞生长抑制作用的影响,并选择高效的治疗组合,研究其凋亡机制。方法:鉴定3组肝癌细胞——MHCC97-H(原肝癌细胞株),HK3细胞(转染空质粒的MHCC97-H细胞)和21543细胞(转染含HBx-shRNA质粒的MHCC97-H细胞);RT-PCR检测RNA干扰对HBx mRNA沉寂作用,CCK8和TUNEL分别检测RNA干扰HBx后化疗药物对MHCC97-H肿瘤细胞生长的抑制及诱导细胞凋亡情况。结果:RT-PCR结果显示,与MHCC97-H细胞组比较,21543细胞的HBx mRNA水平下降约91%,HK3细胞HBx mRNA水平下降不明显;RNA靶向干扰HBx基因后的肝癌细胞(21543细胞)较原肝癌细胞(MHCC97-H细胞)和HK3细胞增殖明显减慢,而后两种细胞差别无统计学意义;3种不同细胞加用3种不同浓度的氟尿嘧啶(0～120mg/L)、顺铂(0～32mg/L)后细胞生长明显减慢并呈浓度依赖性,以RNA靶向干扰HBx基因后的21543细胞生长抑制最明显;相同浓度的氟尿嘧啶对3组不同肝癌细胞均可引起细胞凋亡,以21543细胞凋亡最明显。结论:RNA干扰HBx可明显抑制肝癌细胞的增殖,并增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性;RNA干扰HBx基因和化疗药物联合应用使肝癌细胞凋亡更明显,细胞增殖速度明显减慢。
- 何艳贺兴鄂孙会卿王文龙雷建华
- 关键词：肝癌细胞RNA干扰HBX基因细胞周期化疗
- 一例隐源性肝硬化的分子基础被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨一例表面抗原阴性的隐源性肝硬化的病原及其分子基础。方法 定性、定量测定患者血清中的乙型肝炎病毒 (HBV)抗原、抗体和DNA ,进行HBVS基因的扩增、克隆和序列分析。结果 HBsAg (- ) ,定量测定结果 (S/N) :0 77(阳性参考值S/N≥ 2 0 0 )。HBeAg (+) ,定量测定结果 (S/N) :5 6 4 3(阳性参考值≥ 2 10 )。抗 HBc (+) ,定量测定结果 (S/CO) :0 0 3(阳性参考值S/CO≤1 0 )。抗 HBs (+) ,抗 HBe (- ) ,HBVDNA (+) ,定量 :1 5 4× 10 9拷贝 /ml。S基因克隆和序列分析发现第 336位核苷酸由C变为A ,导致第 6 1位密码子由UCA(丝氨酸 )变为UAA(终止子 ) ,HBsAg合成受阻。结论 HBV是本例肝硬化的病原 ,S基因终止突变是其分子基础 ,这一发现具有重要的临床意义和病毒学意义。
- 杨旭雷建华张永红罗红雨黄力郑煜煌唐晓鹏李良友
- 关键词：隐源性肝硬化分子基础寡核苷酸序列分析乙型肝炎表面抗原
- 乙型病毒性肝炎患者血清镁水平及其与临床的关系
- 2006年
- 该文收集湘雅二医院传染科同日测定血清镁水平和主要肝功能指标的705例乙肝患者的资料,比较各型乙肝患者血清镁水平和低血镁发生情况,并分析血清镁水平与主要肝功能指标的相关性。结果认为,肝硬化和慢性重型肝炎较易发生低血镁。血清镁水平与BUN正相关,与大多数反映肝实质损害程度的指标则无相关性,但可能与ALT水平有一定相关性。
- 雷建华贺兴鄂杨旭梁骏罗红雨
- 关键词：乙型肝炎血液肝硬化
- 应用短发夹状RNA研究HBV X基因表达对三氧化二砷诱导HepG2细胞凋亡特性的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:应用shRNA(短发夹状RNA)介导的RNA干扰研究HBV X基因表达对三氧化二砷(As2O3)诱导HepG2细胞凋亡特性的影响。方法:用噻唑蓝(MTT)还原法分析经2.0μmol/L As2O3处理的HepG2细胞和表达HBVX基因的HepG2-X细胞的生长抑制率。以未处理细胞为对照,流式细胞术分析细胞凋亡比和细胞周期,采用Caspase3/cpp32活性比色试剂盒测定As2O3处理后细胞裂解物中Caspase3的活性。应用脂质体介导HBX序列特异性shRNA表达载体pXi-1、pXi-2和序列无关对照pXi-3转染HepG2-X,再次分析细胞凋亡比、细胞周期和Caspase3活性的变化。结果:MTT法表明2.0μmol/L As2O3处理36小时具有理想的细胞生长抑制率。As2O3作用后细胞凋亡比明显增高(P<0.05),G2/M期细胞增多(P<0.05)。不同HBV X基因表达水平的细胞As2O3诱导的细胞凋亡比有统计学差异(P<0.05),HepG2-X与HepG2比较,其As2O3诱导的细胞凋亡比下降,且细胞裂解物的Caspase3活性下降(P<0.05),但应用序列特异性shRNA抑制HBV X基因表达后凋亡比和Caspase3活性可再次增高,而作为对照的序列无关的shRNA则无此效应,但这种效应与细胞周期无关。结论:As2O3可诱导HepG2细胞凋亡。表达HBVX基因后As2O3诱导的HepG2细胞凋亡比和Caspas3活性下降,特异性shRNA抑制HBV X基因表达后则无此效应,但这种效应与细胞周期无关。
- 贺兴鄂雷建华杨旭孙会卿童明
- 关键词：乙型三氧化二砷HEPG2细胞细胞凋亡
- 不同剂量腺苷蛋氨酸治疗病毒性肝炎临床观察被引量：18
- 2013年
- 目的观察二种不同剂量腺苷蛋氨酸(商品名:思美泰)治疗病毒性肝炎的临床疗效。方法 A组(38例)采用腺苷蛋氨酸(1 000 mg/d),B组(38例)应用腺苷蛋氨酸(2 000 mg/d)治疗,重症患者二组均辅以其他护肝及输注白蛋白、血浆、人工肝等支持对症治疗,观察其临床疗效及不良反应。结果不同剂量腺苷蛋氨酸在ALT、AST、TBil、DBil、TBA、ALP、GGT、PT等指标上均有所改善,大剂量组ALT、AST及TBil在降低百分率上与小剂量组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。二组患者均未见明显不良反应。结论大剂量腺苷蛋氨酸治疗病毒性肝炎比小剂量在黄疸的消退上更加有效,安全可靠,为治疗高胆红素血症的理想选择。
- 张永红肖新强王文龙雷建华唐晓鹏
- 关键词：腺苷蛋氨酸病毒性肝炎疗效
- 从医疗技术层面分析“乙肝歧视”的原因被引量：9
- 2005年
- 目的占我国总人口近1/10的群体受到“乙肝歧视”,已经对正常的社会发展构成危害。本文从医疗技术层面分析了“乙肝歧视”问题发生和存在的原因。乙型肝炎病毒(HBV)传染途径的理论单一性与事实上的多元化是主要原因,疫苗的推广仍不能完全阻断乙肝传播和感染HBV后预后的不确定性加大了人们的担忧。由于抗HBV治疗进展缓慢和护肝治疗无大的突破,人们对可能发生的HBV感染更多地采取了躲避的方式,客观上促进了“乙肝歧视”问题的发展。
- 雷建华杨旭贺达仁
- 关键词：乙型肝炎歧视
- 乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝功能关系分析被引量：9
- 2005年
- 目的分析乙型肝炎患者血清HBVDNA水平与肝功能关系。方法收集传染科同日测定HBVDNA水平和主要肝功能指标的274例乙肝患者的资料,比较各型乙肝患者HBVDNA水平和阳性率,比较HBVDNA阴性和阳性患者的肝功能指标,并分析HBVDNA与肝功能指标的相关性。结果各型乙肝病例的DNA阳性率差异无显著性,病情轻重不同的患者、急性和慢性病例DNA阳性率差异也无显著性,各组HBVDNA水平差异无显著性。各组病例HBVDNA阳性和阴性者ALB、TBIL、PT差异均无显著性。各组病例HBVDNA水平与TBIL、PT无统计学相关性。但多种类型患者HBVDNA阳性者ALT水平高于阴性者,且HBVDNA水平与ALT有一定相关性,另外慢性重度患者HBVDNA水平与ALB有一定相关。结论HBV复制水平与肝功能状态无明显相关性,但在部分患者HBV复制水平对肝功能可能有一定影响。
- 雷建华杨旭贺兴鄂黄力梁骏
- 关键词：乙型肝炎病毒HBV肝功能
- CuSO_4对2.2.15细胞的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:探讨硫酸铜(CuSO4)对2.2.15细胞代谢及HBV复制和表达的影响及其机制. 方法:采用MTT法检测CuSO4对2.2.15细胞的毒性,流式细胞仪检测细胞周期.透射电镜法,Annexin V/PI双染后双变量流式细胞仪观察CuSO4对2.2.15细胞凋亡的影响,采用时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)检测不同浓度的CuSO4作用后2.2.15细胞上清中HBsAg,HBeAg的P/N 值.Taq man荧光定量PCR检测不同浓度CuSO4作用后上清中HBVDNA滴度. 结果:MTT实验确定CuSO4在培养液中对2.2.15细胞的最大无毒剂量是128μmol/L.CuSO4作用后可引起细胞周期的改变,肝癌细胞被阻滞在G2+M期,且呈量效相关性.但是未发现CuSO4有诱导凋亡的作用,CuSO4干预12 d的结果显示2.2.15细胞上清中HBsAg,HBeAg的滴度及HBVDNA 的复制水平与对照组无明显差别. 结论:CuSO4有明显的细胞毒作用,可引起肿瘤细胞周期的改变及细胞坏死,提示了铜的抗癌作用的分子机制,CuSO4 短期处理2.2.15细胞后暂未发现其对HBV复制和表达的影响.
- 罗红雨杨旭雷建华田沂
- 关键词：2.2.15细胞2.2.15细胞时间分辨荧光免疫分析技术MTT法检测肿瘤细胞周期细胞上清MTT实验
- 各种临床类型乙型肝炎病例血清HBeAg/HBeAb和HBV DNA定量分析被引量：4
- 2008年
- 目的分析比较不同临床类型乙型肝炎病例的血清HBeAg/HBeAb与HBVDNA阳性率和定量水平,探讨临床病情与HBV复制水平的关系。方法收集湘雅二医院传染科在同日应用时间分辨免疫荧光法(TRFIA)和荧光定量PCR(FQ-PCR)定量测定血清HBeAg/HBeAb和HBVDNA水平的不同临床类型乙肝病例共802例,比较各组病例的HBeAg/HBeAb和HBVDNA阳性率和定量水平。结果各组病例间HBeAb水平差异无显著性,慢性轻度病例HBeAg和HBVDNA阳性率及定量水平均较高,急性或亚急性重型以及HBeAb阳性急性黄疸型病例HBeAg和HBVDNA阳性率及定量水平均较低,其他临床类型病例HBeAg和HBVDNA阳性率及定量水平差异均无显著性。结论不同临床类型乙肝病例的血清HBeAb水平差异无显著性,急性乙肝恢复期HBV复制水平较低,但慢性轻度病例HBeAg和HBVDNA较高而急性或亚急性重型病例较低,可能与机体免疫状态相关。
- 雷建华梁骏杨旭贺兴鄂黄力田沂
- 关键词：乙型肝炎E抗原E抗体HBVDNA
- 乙肝病毒X基因真核表达载体pEGFP-X的构建及其表达被引量：1
- 2006年
- 目的:构建pEGFP-X真核表达载体,观察其在肝癌细胞株中的表达。方法:从质粒pcDNA3.1(+)-X酶切获HBV X基因片段,克隆至pEGFP-N1;用酶切、PCR和测序鉴定pEGFP-X载体;用脂质体法,将重组载体(pEGFP-X)和空载体(pEGFP-N1)瞬时转染肝癌细胞细胞株BEL-7402;分别用RT-PCR、荧光显微镜鉴定HBV X和EGFP基因表达。结果:鉴定证实pEGFP-X载体构建成功;该质粒瞬时转染的BEL-7402有HBV X基因表达,并发绿色荧光。结论:构建的pEGFP-X真核载体能在BEL-7402中表达,绿色荧光蛋白示踪利于表达HBV X基因稳定细胞株的筛选,并为探讨HBV X基因在HCC中的致瘤机理提供实验模型奠定基础。
- 王文龙贺兴鄂杨旭蒋永芳雷建华孙会卿
- 关键词：乙型肝炎病毒X基因真核表达载体BEL-7402
