陈锐涵
- 作品数：9 被引量：30H指数：3
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微小RNA-23a-p21活化激酶6通路对前列腺癌细胞迁移与侵袭能力的影响被引量：8
- 2012年
- 目的探讨调控p21活化激酶6（PAK6）的微小RNA（miRNA）与前列腺癌侵袭及迁移的关系。方法生物信息学预测靶向PAK6的miRNA，转染miRNA模拟物及抑制剂，Western blot法及实时定量逆转录-聚合酶链反应（Real—timePCR）检测PC-3细胞PAK6的表达，荧光素报告酶实验检测预测NmiRNA对PAK6的调控，并行体外迁移及侵袭实验，检测转染miRNA对PC-3细胞迁移及侵袭能力的影响。结果生物信息学预测miRNA-23a可能是调控PAK6的靶miRNA。Westernblot检测转染miRNA-23a组PAK6表达量下降79％，而转染miRNA-23a抑制剂组PAK6表达量上升40％，差异均有统计学意义（P〈0．05）。荧光素报告酶实验结果显示，转染miRNA-23a后野生型PAK6组荧光素酶活性下降32％，而突变组差异无统计学意义（P〉0．05）。Real-timePCR检测3组PAK6mRNA的表达，差异无统计学意义（P〉0．05）。体外迁移及侵袭实验示，转染miRNA-23a组迁移细胞数减少57％，侵袭的细胞数减少91％。结论微小RNA-23a通过下调靶蛋白PAK6的表达从而引起前列腺癌迁移及侵袭能力下降。
- 蔡松旺李小娟陈锐涵朱宝益蔡燚叶春伟陶奕然冯淑君温星桥
- 关键词：微小RNA前列腺癌
- 新生儿垂体柄中断综合征1例被引量：1
- 2012年
- 患儿,男,40 d,因反复低血糖发作伴抽搐1月余入院。患儿系第5胎第1产,孕40＋5周,因母亲患妊娠期高血压行剖宫产出生,出生体重3.45 kg,身长50 cm,无缺氧窒息史。生后13 h出现呛咳、全身发绀、呼吸困难、反应差,即于外院住院治疗,血糖未能测出,
- 张丽娜梁立阳孟哲陈锐涵李栋方何展文
- 关键词：垂体柄中断综合征新生儿妊娠期高血压出生体重缺氧窒息住院治疗
- 应用PET—CT联合病理活检诊断精囊淋巴瘤一例被引量：1
- 2012年
- 患者男，63岁，“下腹隐痛1个月余，伴呕吐、尿量进行性减少4d”，经急诊收入中山大学第三附属医院。既往无血精、无泌尿系感染病史。查体：双侧上、中输尿管行程压痛点压痛，右下腹及膀胱区压痛，
- 温星桥陈锐涵方友强林曲蔡燚朱宝益叶春伟
- 高糖诱导前列腺上皮细胞微小RNA的差异表达及miR-301a的促增殖作用被引量：1
- 2012年
- 目的检测高糖刺激下微小RNA（miRNA）在前列腺组织及细胞中的差异表达，探讨高血糖对前列腺影响的分子机制。方法将成年雄性SD大鼠随机分为对照组和高血糖组（〉300mg／d1），应用miRNA芯片技术检测两组间miRNA表达谱的差异，并通过实时定量聚合酶链反应（qRT—PCR）方法验证；以qRT．PCR检测差异表达的miRNAs在高糖（50mmoL／L）培养的RWPE-1细胞中的表达；噻唑蓝（MTT）比色法检测转染miRNAs和／或高糖（25～50mmol／L）培养的RWPE—1的增殖。结果高血糖组大鼠前列腺组织中4个miRNA上调（miR-1862．405倍、miR-301a2．202倍、miR-3652．093倍、miR-1932．317倍），2个miRNA下调（miR-4340．298倍、miR-3610．386倍），差异均有统计学意义（P〈0．05）；高糖培养下，RWPE-1细胞中各miRNAs的表达趋势与之一致。MTT实验中25mmol／L组、50mmol／L组、miR-301a转染组的细胞吸光度（A）值分别为起始的175％、197％、188％，与对照组（122％）比较差异有统计学意义（P〈0．05）；50mmol／L高糖联合miR-301a抑制物转染组的A值为起始的143％，与50mmol／L组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论体内外高糖条件均可引起前列腺miRNA表达谱变化，高糖通过miR-301a对前列腺上皮细胞的增殖有明显促进作用。
- 陈锐涵朱宝益叶志强蔡松旺蔡燚叶春伟陶奕然温星桥
- 关键词：高糖前列腺微小RNA增殖
- 微小RNA-301a介导高血糖对前列腺癌细胞裸鼠移植瘤的促生长作用被引量：3
- 2015年
- 目的观察微小RNA（miRNA，miR）-301a介导高血糖对人前列腺癌细胞PC3裸鼠移植瘤的促生长作用。方法以40mg／kg链脲佐菌素连续5d腹腔注射建立高血糖裸鼠模型，以慢病毒构建miR-301a过表达载体（LV-miR-301a）及其阴性对照，并构建miR-301a抑制剂载体（LV-miR-301a—inhibitor）及其阴性对照，转染PC3细胞，得到稳转细胞株。将上述稳转细胞（5×10 6个）分别接种到高血糖及正常糖裸鼠的皮下，成瘤后连续观察移植瘤的生长。5周后处死裸鼠，剥离瘤体组织，实时定量反转录聚合酶链反应（RT—qPCR）检测miR．301a的表达。结果接种空白PC3细胞后，高血糖组裸鼠瘤体组织miR-301a的表达量是正常组的（30．83±5．42）倍（P〈0．01），且前者最终瘤体体积[（850．46±72．54）mm3]明显比后者瘤体体积[（430．35±49．56）mm3]大（P〈0．01）。在正常组中，过表达miR-301a的移植瘤体积为（925．26±83．43）mm3，明显大于其阴性对照组瘤体（461．25±58．74）mm3（P〈0．01）。在高血糖组中，miR-301a抑制型移植瘤体积为（550．13±55．12）mm3显著小于其阴性对照组的（830．16±64．86）mm3（P〈0．01）。结论高血糖可以通过上调前列腺癌细胞miR-301a的表达，促进肿瘤生长，抑制miR-301a的表达，可以部分阻断高血糖对前列腺癌细胞的促生长作用。
- 李骏王骏高漓彭叔彬王喻陈锐涵葛波陶奕然陈延雄韩飞温星桥
- 关键词：前列腺癌高血糖裸鼠移植瘤肿瘤生长
- 微小RNA-301a介导高糖促进前列腺癌细胞周期G1/S时相转换被引量：2
- 2013年
- 目的 探讨微小RNA（miR）-301a介导高糖促进前列腺癌细胞生长的分子机制.方法 通过实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测miR-301a的表达.细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测转染miRNAs和/或高糖（4.5 g/L）培养的前列腺癌DU145细胞的增殖.应用微管聚合抑制剂诺考达唑（Nocodazole,40 μg/L）处理16h或者血清饥饿处理48 h使细胞周期同步化,流式细胞仪分析miR-301a对细胞周期时相转换的影响.CCK-8法测定细胞生长活性,检测高糖及miR-301a对前列腺癌细胞增殖的影响.结果 miR-301a在前列腺癌细胞PC3、DU145的表达分别为正常前列腺上皮细胞RWPE-1的（2.86±0.75）倍和（4.05±0.96）倍.高糖培养DU145细胞24、48 h后miR-301a的表达分别为对照组的（1.88±0.34）倍和（13.15 ±3.45）倍.抑制miR-301a可部分逆转高糖的促增殖作用.过表达miR-301a后经细胞周期同步化处理,与对照组比较miR-301a可促进前列腺癌DU145细胞G1/S时相转换.结论 miR-301a在前列腺癌细胞中表达上调,miR-301a介导高糖促进前列腺细胞周期G1/S时相转换,促进细胞增殖.
- 蔡燚李小娟朱宝益陶奕然李骏蔡松旺陈锐涵温星桥
- 关键词：高糖前列腺癌细胞周期
- 乳果糖预处理减轻大鼠肠缺血再灌注损伤的机制研究被引量：13
- 2013年
- 目的:探讨乳果糖预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。方法:随机将30只SD大鼠分成假手术组、缺血再灌注组和乳果糖预处理组。乳果糖预处理组在手术前7 d每天给予乳果糖灌胃,假手术组和缺血再灌注组在手术前7 d每天给予等量生理盐水灌胃。手术分离肠系膜上动脉,通过夹闭30 min、再灌注60 min诱导缺血再灌注损伤。收集血清检测白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-1β水平。HE染色用来评估组织的损伤程度,TUNEL检测小肠上皮细胞的凋亡。部分小肠组织用来检测丙二醛、超氧化物歧化酶及激活型caspase-3的表达水平。结果:乳果糖预处理显著减轻缺血再灌注引起的肠组织损伤和小肠上皮细胞凋亡,并显著抑制血清中细胞因子的水平和肠组织的脂质过氧化。结论:乳果糖预处理可能通过抑制细胞凋亡和脂质过氧化减轻缺血再灌注引起的肠道损伤。
- 叶志强戴海涛刘旭辉曾花邢帮荣陈锐涵卫洪波
- 关键词：肠缺血再灌注损伤乳果糖
- 乳果糖预处理对大鼠肝缺血-再灌注损伤的保护作用
- 2013年
- 目的探讨乳果糖预处理对大鼠肝缺血-再灌注损伤(IRI)的保护作用及其机制。方法将45只Sprague-Dawley(SD)大鼠按随机数字表法随机分为假手术组、肝IRI组(IRI组)、乳果糖灌胃预处理组(乳果糖组),每组15只。乳果糖组手术前7 d每天应用0.1 g/ml的乳果糖灌胃,IRI组及假手术组手术前7 d每天给予等体积的生理盐水灌胃。手术中IRI组和乳果糖组用血管夹夹闭肝左、中叶的门静脉分支和相应的肝动脉分支,使约70%的肝脏缺血,阻断60 min后恢复肝脏供血,再灌注6 h,建立IRI模型。假手术组仅开腹暴露并离断肝脏周围韧带。手术完成后应用酶联免疫吸附试验检测血清白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,光镜下观察肝组织形态变化,荧光显微镜下观察肝细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测激活型caspase-3的表达。3组大鼠细胞因子检测数据的比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果假手术组、IRI组和乳果糖组大鼠血清IL-1β水平分别为(75±22)、(365±30)、(139±16)ng/L,IL-6水平分别为(48±16)、(190±22)、(92±10)ng/L,TNF-α水平分别为(11.3±5.1)、(40.2±2.7)、(19.5±3.9)ng/L,IRI组的血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平明显高于假手术组(LSD-t=30.6,20.6,19.4;P<0.05),而低于乳果糖组(LSD-t=-26.2,-16.1,-16.9;P<0.05)。假手术组大鼠肝组织形态正常,IRI组肝细胞呈灶状或片状大面积坏死,乳果糖组肝细胞水肿变性,见点状坏死,组织结构破坏程度比IRI组减轻。假手术组未见明显凋亡细胞,乳果糖组与IRI组的凋亡细胞数明显增多,但乳果糖组凋亡细胞数少于IRI组。乳果糖组激活型caspase-3表达较假手术组上调,但较IRI组下调。结论乳果糖预处理能减轻大鼠肝脏IRI,其作用机制可能与抑制炎症细胞因子释放和抑制细胞凋亡有关。
- 叶志强罗刚健刘旭辉吴飞龙涂旭升陈锐涵刘波
- 关键词：再灌注损伤乳果糖白细胞介素类肿瘤坏死因子Α
- 微小RNA-23a调节前列腺癌细胞骨架蛋白的分子机制被引量：3
- 2012年
- 目的探讨微小RNA-23a（miR-23a）影响前列腺癌细胞骨架迁移及侵袭行为的分子机制。方法PC-3前列腺癌细胞转染siPAK6、miR-23a模拟物，48h后以共聚焦显微镜观察细胞骨架的改变；Westernblot法检测LIMK1、磷酸化LIMK1（p-LIMKl）、丝切蛋白（cofilin）和磷酸化丝切蛋白（p-cofilin）蛋白的表达。结果转染siPAK6组及miRNA一23a组PC-3细胞骨架的应力纤维均明显减少，肌动蛋白形态皱缩。Westernblot检测显示转染siPAK6组的p-LIMKl、p-cofilin的表达分别下降75％、80％（P〈0．01），而LIMKl、cofilin表达量无明显变化（P〉0．05）；转染miRNA-23a组的p-LIMKl、p-cofilin的表达分别下降60％、70％（P〈0．01），LIMKl、cofilin的表达量无明显变化（P〉0．05）。结论miR-23a可通过p21活化激酶6（PAK6）-LIMK1-cofilin信号通路，影响前列腺癌细胞骨架的重构，抑制癌细胞迁移及侵袭能力。
- 蔡松旺黄怀球李小娟陈锐涵蔡燚朱宝益陶奕然叶春伟温星桥
- 关键词：前列腺癌COFILIN
