尹长城 作品数:43 被引量:88 H指数:6 供职机构: 北京大学基础医学院生物物理学系 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 更多>>
重组人次级淋巴组织趋化因子(SLC)体外活性的研究 2008年 目的:对原核表达系统E.coli中表达的SLC进行体外活性的研究,为进一步的体内实验和临床应用提供参考。方法:采用Boyden小室测定趋化活性。结果:对含有pALM-SLC质粒的E.coli菌株进行诱导表达,产物经SDS-PAGE鉴定,表达产物以可溶蛋白为主,相对分子质量(Mr)在20000左右。采用表达产物进行趋化性测定结果表明,此蛋白对新鲜分离的外周血淋巴细胞具有明显的趋化作用,其浓度为4~6μg/L时对淋巴细胞的趋化指数最高可达2.3,与国外报道相比,趋化作用有效浓度更低。结论:获得了具有生物学功能的重组SLC蛋白。 刘明学 尹长城 春雷 李琼芳 黄华樑关键词:次级淋巴组织趋化因子 体外活性 趋化作用 一种透射电子显微镜用镍钛非晶合金载网支持膜 本发明公开了一种透射电子显微镜用镍钛非晶合金载网支持膜及其制备方法。本发明所采用的导电薄膜为镍钛合金纳米薄膜。镍钛合金是形状记忆合金,具有良好的弹性和机械强度,同时又是电和热的良导体,在医疗器械等方面有广泛的应用。现在镍... 张雷 尹长城文献传递 SARS冠状病毒S蛋白结构预测及表达初探 被引量:1 2005年 利用生物信息学的工具和方法,对SARS病毒基因组中预测的S蛋白(spikeprotein)的编码序列进行了分析,预测了其结构特征和可能的功能域。选择其中最有可能参与受体识别及产生主要免疫原性的区域(S401~659)作为待表达区域。将通过PCR获得的此段S蛋白片段的编码序列克隆至大肠杆菌载体pET28a(+)和酵母表达载体pPIC9K中,分别构建了pET28a(+)S和pPIC9KS表达质粒,转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3)star和毕赤酵母中表达。产物的蛋白电泳和蛋白印记结果表明,S蛋白片段获得成功表达。采用镍离子螯合层析法纯化变性的包涵体样品,纯度达90%以上。 孙美玲 朴锦华 尹长城 杨公社 黄华樑关键词:SARS 冠状病毒 S蛋白 链间连接肽对单链双特异性抗体生物学活性的影响 被引量:3 2003年 单链双特异性抗体(ScBsAb)是具有良好临床应用前景的基因工程抗体,但不同的链间连接肽(interlinker)对其生物学活性的影响尚有待深入研究. 设计并合成3种不同的链间连接肽序列,分别命名为Fc,HSA和205C′,并构建成单链双特异性抗体通用表达载体,以抗人CD3改形单链抗体(ScFv)和抗人卵巢癌单链抗体为基础,构建成单链双特异性抗体.SDS-PAGE及 Western blot结果表明,3种不同的链间连接肽对抗体的表达量无明显影响.在此基础上,进行ELISA及血液药代动力学测定,发现不同链间连接肽的单链双特异性抗体与相应抗原的结合活性及其在小鼠体内的清除相T_(1/2)存在一定差异,链间连接肽HSA可以显著延长抗体在体内的滞留时间.上述研究结果提示,链间连接肽序列将会影响单链双特异性抗体的抗原结合活性及其在体内的稳定性等重要的生物学特性.因此,筛选理想的链间连接肽序列对于构建单链双特异性抗体具有重要意义. 合适的链间连接肽可以赋予单链双特异性抗体更适于临床应用需求的生物学活性. 方敏 蒋欣 杨志 俞小淙 尹长城 李骅 赵瑞 张众 林晴 黄华樑关键词:单链双特异性抗体 生物学活性 基因工程 肿瘤 免疫 一种含(Arg)<Sub> 9</Sub>肽段的基于假单胞菌外毒素的重组免疫毒素 本发明属于一种抗癌胚抗原的重组免疫毒素。具体地讲,涉及一种含9个精氨酸肽段(Arg)<Sub> 9</Sub>的基于假单胞菌外毒素的抗癌胚抗原的重组免疫毒素,编码连接外毒素和抗癌胚抗原连接肽的核苷酸序列,含有所述序列的表... 何丹 黄华樑 杨慧 林晴 尹长城 张众文献传递 重组人外周淋巴组织趋化性细胞因子及其制备方法和用途 本发明涉及涉及一种新的重组人外周淋巴组织趋化性细胞因子,表达该重组细胞因子的核苷酸序列,含有该核苷酸序列的载体,以及含有该载体的宿主细胞,和该重组人外周淋巴组织趋化性细胞因子的生产方法及其在制备治疗肿瘤的药物中的用途和含... 尹长城 黄华樑 刘明学 林晴 春雷文献传递 噬菌体抗体库技术与高通量筛选抗体 被引量:1 2004年 噬菌体抗体库技术是组合技术与基因工程抗体技术相结合的产物 ,为快速筛选特异性抗体提供了简便而高效的操作系统 ,随着蛋白质组学的飞速发展 ,对抗体的大规模制备的需求日益增加 ,迫切需要发展高质量的抗体库和与之相整合的高通量筛选技术。近年来 ,以上技术的发展和自动化设备的引入为大规模抗体制备的实现提供了条件 ,对这一领域的研究进展做一概述。 王尚资 尹长城 于文功 管华诗 黄华樑关键词:噬菌体抗体库技术 高通量筛选 基因工程抗体 蛋白质组学 抗TNF-α单链抗体的构建、表达及一步柱上纯化和复性 单链抗体是通过一段柔性的连接肽把抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)连接在一起而构成的小分子抗体,与完整的抗体分子相比,单链抗体具有分子量小、穿透性强、易于构建和表达等优点。肿瘤坏死因子α(tumor necro... 刘梦元 黄华樑 尹长城 王祥斌文献传递 一种透射电子显微镜用镍钛非晶合金载网支持膜 本发明公开了一种透射电子显微镜用镍钛非晶合金载网支持膜及其制备方法。本发明所采用的导电薄膜为镍钛合金纳米薄膜。镍钛合金是形状记忆合金,具有良好的弹性和机械强度,同时又是电和热的良导体,在医疗器械等方面有广泛的应用。现在镍... 张雷 尹长城文献传递 骨骼肌内质网Ca^(2+)泵转运Ca^(2+)的结构基础 被引量:2 2006年 Ca2+泵(Ca2+-ATPase)是调节细胞内Ca2+浓度的重要蛋白质之一.Ca2+泵在转运Ca2+的过程中经历一系列构象变化.其中,E1状态为外向的Ca2+高亲和状态,E2状态则为内向的Ca2+低亲和状态.目前,骨骼肌内质网Ca2+泵转运Ca2+过程中的几个中间状态,包括E1-2Ca2+,E1-ATP,E1-P-ADP,E2-Pi和E2状态的三维晶体结构已经解析.介绍这几种状态的晶体结构,并分析Ca2+泵在执行功能过程中结构与功能的关系. 韦日生 王佩荣 尹长城关键词:晶体结构 构象变化