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重组人次级淋巴组织趋化因子(SLC)体外活性的研究: 2008年; 目的:对原核表达系统E.coli中表达的SLC进行体外活性的研究,为进一步的体内实验和临床应用提供参考。方法:采用Boyden小室测定趋化活性。结果:对含有pALM-SLC质粒的E.coli菌株进行诱导表达,产物经SDS-PAGE鉴定,表达产物以可溶蛋白为主,相对分子质量(Mr)在20000左右。采用表达产物进行趋化性测定结果表明,此蛋白对新鲜分离的外周血淋巴细胞具有明显的趋化作用,其浓度为4～6μg/L时对淋巴细胞的趋化指数最高可达2.3,与国外报道相比,趋化作用有效浓度更低。结论:获得了具有生物学功能的重组SLC蛋白。; 刘明学尹长城春雷李琼芳黄华樑; 关键词：次级淋巴组织趋化因子体外活性趋化作用

一种透射电子显微镜用镍钛非晶合金载网支持膜: 本发明公开了一种透射电子显微镜用镍钛非晶合金载网支持膜及其制备方法。本发明所采用的导电薄膜为镍钛合金纳米薄膜。镍钛合金是形状记忆合金，具有良好的弹性和机械强度，同时又是电和热的良导体，在医疗器械等方面有广泛的应用。现在镍...; 张雷尹长城

SARS冠状病毒S蛋白结构预测及表达初探被引量：1: 2005年; 利用生物信息学的工具和方法,对SARS病毒基因组中预测的S蛋白(spikeprotein)的编码序列进行了分析,预测了其结构特征和可能的功能域。选择其中最有可能参与受体识别及产生主要免疫原性的区域(S401～659)作为待表达区域。将通过PCR获得的此段S蛋白片段的编码序列克隆至大肠杆菌载体pET28a(+)和酵母表达载体pPIC9K中,分别构建了pET28a(+)S和pPIC9KS表达质粒,转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3)star和毕赤酵母中表达。产物的蛋白电泳和蛋白印记结果表明,S蛋白片段获得成功表达。采用镍离子螯合层析法纯化变性的包涵体样品,纯度达90%以上。; 孙美玲朴锦华尹长城杨公社黄华樑; 关键词：SARS 冠状病毒 S蛋白

链间连接肽对单链双特异性抗体生物学活性的影响被引量：3: 2003年; 单链双特异性抗体(ScBsAb)是具有良好临床应用前景的基因工程抗体,但不同的链间连接肽(interlinker)对其生物学活性的影响尚有待深入研究. 设计并合成3种不同的链间连接肽序列,分别命名为Fc,HSA和205C′,并构建成单链双特异性抗体通用表达载体,以抗人CD3改形单链抗体(ScFv)和抗人卵巢癌单链抗体为基础,构建成单链双特异性抗体.SDS-PAGE及 Western blot结果表明,3种不同的链间连接肽对抗体的表达量无明显影响.在此基础上,进行ELISA及血液药代动力学测定,发现不同链间连接肽的单链双特异性抗体与相应抗原的结合活性及其在小鼠体内的清除相T_(1/2)存在一定差异,链间连接肽HSA可以显著延长抗体在体内的滞留时间.上述研究结果提示,链间连接肽序列将会影响单链双特异性抗体的抗原结合活性及其在体内的稳定性等重要的生物学特性.因此,筛选理想的链间连接肽序列对于构建单链双特异性抗体具有重要意义. 合适的链间连接肽可以赋予单链双特异性抗体更适于临床应用需求的生物学活性.; 方敏蒋欣杨志俞小淙尹长城李骅赵瑞张众林晴黄华樑; 关键词：单链双特异性抗体生物学活性基因工程肿瘤免疫

一种含（Arg)<Sub> 9</Sub>肽段的基于假单胞菌外毒素的重组免疫毒素: 本发明属于一种抗癌胚抗原的重组免疫毒素。具体地讲，涉及一种含9个精氨酸肽段(Arg)<Sub> 9</Sub>的基于假单胞菌外毒素的抗癌胚抗原的重组免疫毒素，编码连接外毒素和抗癌胚抗原连接肽的核苷酸序列，含有所述序列的表...; 何丹黄华樑杨慧林晴尹长城张众

体外分子定向进化策略在抗体改形中的应用: 鼠源抗体极易引起人体排异反应的特点限制了其在疾病治疗领域的应用。近些年来,抗体改形工作一直是抗体工程的热点。我们将核糖体展示技术与DNA shuffling技术结合,设计体外进化策略进行抗体改形。该策略与采用噬菌体展示技...; 王祥斌周炳尹长城张众林晴黄华樑; 关键词：4-1BB 体外定向进化核糖体展示

重组人外周淋巴组织趋化性细胞因子及其制备方法和用途: 本发明涉及涉及一种新的重组人外周淋巴组织趋化性细胞因子，表达该重组细胞因子的核苷酸序列，含有该核苷酸序列的载体，以及含有该载体的宿主细胞，和该重组人外周淋巴组织趋化性细胞因子的生产方法及其在制备治疗肿瘤的药物中的用途和含...; 尹长城黄华樑刘明学林晴春雷

噬菌体抗体库技术与高通量筛选抗体被引量：1: 2004年; 噬菌体抗体库技术是组合技术与基因工程抗体技术相结合的产物 ,为快速筛选特异性抗体提供了简便而高效的操作系统 ,随着蛋白质组学的飞速发展 ,对抗体的大规模制备的需求日益增加 ,迫切需要发展高质量的抗体库和与之相整合的高通量筛选技术。近年来 ,以上技术的发展和自动化设备的引入为大规模抗体制备的实现提供了条件 ,对这一领域的研究进展做一概述。; 王尚资尹长城于文功管华诗黄华樑; 关键词：噬菌体抗体库技术高通量筛选基因工程抗体蛋白质组学

基于良好表达框架的全合成人源抗体库的构建方法: 2004年; 构建大容量高质量抗体库，从而提高针对任意抗原的重组抗体的筛出率是一项有意义而又繁琐的工作。本文在现有建库方法的基础上，兼顾操作方法的简便和高质量抗体库的要求，设计了一种易于操作、步骤简洁的建库方法，并通过构建一个中等库容的单骨架全合成单链抗体模式库，验证了该方法的可行性。本工作选用两条表达性能良好，在入抗体库中高频率出现的胚系基因作为抗体库的骨架，以期保证合成库的代表性和良好的表达折叠性能。在可变区的设计上，对重轻链可变区的CDR3区同时进行了随机化。在CDR区随机化合成策略的选择上，采用一种新颖的分组式合成法。本工作为其他骨架或多骨架合成库的构建提供了一种可供参考的构建模式，本抗体库也可用于抗体前导物的筛斌。; 王尚资尹长城林正红王祥斌刘晶张逸于文功管华诗黄华糅; 关键词：单链抗体噬菌体展示噬菌体克隆效率表达率

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尹长城