魏东 作品数:60 被引量:310 H指数:9 供职机构: 昆明医科大学 更多>> 发文基金: 云南省科技厅-昆明医学院应用基础研究联合专项资金项目 国家自然科学基金 云南省应用基础研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
大网膜脂肪对胆管瘢痕狭窄作用的实验研究 被引量:4 2015年 目的电灼损伤胆管致胆管瘢痕狭窄动物模型,观察大网膜脂肪组织对胆管瘢痕狭窄的作用.方法25只日本大耳兔随机分为A、B、C 3组,胆管电灼损伤处未用大网膜包裹A组、大网膜包裹B组及假手术C组,术后30 d通过观察胆管瘢痕大体形态和HE染色光镜下大网膜脂肪对胆管瘢痕狭窄的作用.结果 A B 2组胆管在大体形态上均可见损伤处形成狭窄,狭窄以上胆管扩张,而C组胆管无改变;A B 2组在HE染色光镜下观察均见胆管壁增厚,胶原纤维明显增生,纤维排列紊乱,其中B组还可见数个脂肪细胞进入致密的胆管瘢痕胶原纤维组织中并被其包绕,且脂肪组织和胆管瘢痕组织能很好的相互融合在一起.结论大网膜脂肪组织对胆管瘢痕狭窄有融合、封堵的作用,为大网膜脂肪组织防治胆管瘢痕狭窄提供了实验依据. 纳钊 张小文 董克刚 邹浩 方辉 魏东关键词:胆管狭窄 瘢痕 大网膜 脂肪 PBL教学模式在外科实验课教学中的应用 被引量:1 2012年 目的探讨外科实验课教学中以问题为中心教学法(problem-based learning,PBL)的教学效果.方法将100名昆明医科大学2008级5年制临床专业学生随机分为2组,用PBL教学法组50人,采用以授课为基础的教学法(lecture-based learning,LBL)组50人,统计学分析比较2组学习成绩.结果 PBL教学模式对比LBL教学模式,学生在理论知识的掌握、分析问题、解决问题的能力明显优于LBL组的学生(P<0.05).结论PBL教学法在外科实验课教学中较LBL教学法具有一定的优势. 吴雪松 魏东 张家骅 熊昌庆 陆启瑜关键词:PBL 临床教学 shRNA-Bmi1重组载体构建及其对胆囊癌裸鼠移植瘤hTERT表达的影响 被引量:1 2016年 目的体外构建及鉴定sh RNA-Bmi1重组载体,探讨靶向沉默原癌基因Bmi1对人胆囊癌细胞Bmi1m RNA表达、蛋白表达及对裸鼠皮下移植瘤h TERT表达的影响.方法针对Bmi1不同位点构建4个sh RNABmi1重组质粒,采用倒置荧光显微镜观察转染效率,RT-PCR和Western blot检测各组Bmi1m RNA和蛋白表达,选择有效干扰组进行体内实验.构建GBC-SD裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为sh RNA-Bmi-4组(实验组)、sh RNA-Scramble(错配组),Lipofectamine(阴性对照组),GBC-SD(空白对照组).成瘤后进行移植瘤治疗,治疗6周后处死裸鼠,免疫组化检测裸鼠移植瘤h TERT蛋白表达水平.结果成功构建了sh RNA-Bmi1重组载体.转染胆囊癌48 h后倒置荧光显微镜观察发现sh RNA-Bmi1-4组GBC-SD绿色荧光强度增强、转染效率最高,RT-PCR及Western blot结果显示sh RNA-Bmi1-4组m RNA及蛋白表达量均明显低于各对照组(P<0.05),对照组间表达量差异无统计学意义(P>0.05).选取sh RNA-Bmi1-4组作为有效干扰序列作后续体内实验.免疫组化检测sh RNA-Bmi-4组裸鼠移植瘤h TERT蛋白表达水平明显低于各对照组(P<0.05),对照组间蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05).结论体外成功构建了sh RNA-Bmi1重组载体,顺利进行重组载体的转化和转染实验。靶向沉默Bmi1基因可有效促进胆囊癌细胞Bmi1m RNA降解、抑制其蛋白的表达,同时有效抑制GBC-SD裸鼠移植瘤h TERT蛋白表达. 王琨 魏东 邹浩 戈佳云 李晓 王琳 张小文关键词:GBC-SD 皮下移植瘤 重组pcDNA 3.0-WWOX构建对胆囊癌细胞表达及△Ψm的影响 被引量:1 2016年 目的体外构建及鉴定Pc DNA3.0-WWOX真核表达载体,探讨过表达WWOX对人胆囊癌细胞WWOXm RNA表达、蛋白表达及跨膜电位(△Ψm)的影响.方法提取人胆囊癌细胞总RNA,RT-PCR反应合成WWOX的c DNA,PCR产物回收纯化.目的基因WWOX和pc DNA3.0载体经限制性内切酶ECORⅠ和XhoⅠ酶切,将双酶切WWOX片段与pc DNA 3.0载体在T4 DNA连接酶的作用下进行连接重组.pc DNA 3.0-WWOX重组质粒转化后,提取质粒经双酶切鉴定及测序鉴定.将pc DNA 3.0-WWOX重组质粒转染人胆囊癌GBC-SD细胞,应用RT-PCR、Western Blot检测WWOX基因的表达水平、JC-1染色检测胆囊癌细胞线粒体跨膜电位(△Ψm)变化.结果成功构建了pc DNA3.0-WWOX重组载体,经测序DNA序列与Gene Bank中WWOX序列一致.成功转染pc DNA3.0-WWOX重组质粒至胆囊癌GBC-SD细胞中.RT-PCR及Western blot结果显示:胆囊癌GBC-SD细胞转染pc DNA3.0-WWOX重组质粒48 h后pc DNA-3.0-WWOX组灰度比值明显高于各对照组(P<0.05),对照组间m RNA表达量差异无统计学意义(P>0.05).pc DNA3.0-WWOX组蛋白表达灰度比值均明显高于各对照组(P<0.05),对照组间蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05).pc DNA3.0-WWOX组细胞线粒体内绿色荧光信号较对照组增高(P<0.05),而对照组间细胞线粒体内绿色荧光信号差异无统计学意义(P>0.05).结论体外成功构建了Pc DNA3.0-WWOX重组载体,顺利进行了重组载体的转化和转染实验.靶向Pc DNA3.0-WWOX重组载体可有效抑制胆囊癌细胞WWOXm RNA降解,促进其蛋白的表达,同时有效促进细胞的早期凋亡.WWOX可能参与线粒体依赖的凋亡途径调控胆囊癌细胞的生长. 魏东 杨珮 吴雪松 戈佳云 施智甜 王琳 邹浩 张小文关键词:胆囊癌细胞 跨膜电位 腹腔镜肝切除的学习曲线 被引量:1 2015年 目的探讨腹腔镜肝切除的学习曲线.方法回顾性分析昆明医科大学第二附属医院肝胆胰外二科2009年7月至2014年10月完成的腹腔镜左外叶切除治疗肝血管瘤的病例24例,以手术实施时间在2011年10月前后分为早期组和后期组,比较2组手术时间、术中失血、术后疼痛、术后进食时间、术后首次下床活动时间、术后胃肠功能恢复时间、术后住院天数等数据.结果无手术死亡,完全腹腔镜左肝外叶切除术22例,中转开腹手术完成2例;早期组在手术时间、术中失血、术后下床活动时间、术后胃肠功能恢复时间、术后正常进食时间与后期组间差异有统计学意义(P<0.05);但在术后疼痛及术后住院天数上2组差异无统计学意义(P>0.05);术后肝断面积液1例,经调整腹腔引流管治愈;2组患者术后及随访均无黄疸、胆漏、出血、术口感染、胸腔积液、发热、肝功能不全及腹壁切口疝;术后诊断均为肝海绵状血管瘤.结论腹腔镜左肝外叶切除术作为训练外科医师开展腹腔镜肝切除是安全、可行的,但存在学习曲线,大约需要8例可使术者熟练完成腹腔镜肝切除术. 李越华 魏东 王琨 王连敏 张小文 王琳 邹浩关键词:腹腔镜 肝切除术 手术 并发症 肝血管瘤 替吉奥单药对比奥沙利铂、5-Fu/亚叶酸钙在大肠癌患者姑息手术后化疗的临床研究 被引量:4 2014年 目的观察替吉奥(S-1)胶囊单药在大肠癌患者姑息手术后化疗的临床疗效及不良反应.方法将昆明医科大学第二附属医院行姑息手术后化疗的大肠癌患者42例随机分为观察组和对照组,观察组21例应用替吉奥(S-1)80 mg/m2,每日2次早晚餐后口服d1~14,21 d为1个周期;对照组21例用亚叶酸钙200 mg/m2,dl~2,静脉输注2 h,5-Fu 500 mg/m2,dl~5,静脉输注,奥沙利铂85 mg/m2,d 1,静脉输注,每14 d重复,28d为1个周期.结果观察组和对照组的药物有效治疗率(Response rate,RR)分别为28.6%和33.3%,2组差异无统计学意义(P>0.05).观察组腹泻发生率9.5%,对照组42.8%;观察组口腔黏膜炎发生率4.8%,对照组38.1%.观察组的不良反应发生率明显低于对照组(P<0.05).结论替吉奥(S-1)单药对大肠癌患者姑息手术后的治疗效果确切,毒副反应能耐受,胃肠道反应较轻,明显提高患者生活质量,值得临床推广应用. 吴雪松 王华 孙锋 路明亮 和海玉 魏东 施智甜 马俊 舒杰关键词:化疗 同步多镜联合技术在肝胆管结石病中的应用 被引量:3 2023年 目的探讨同步多镜联合技术在肝胆管结石病中的应用价值。方法回顾性分析昆明医科大学第二附属医院自2018年1月至2021年10月收治的159例肝胆管结石病人的临床资料,按治疗方法的不同分为肝外胆管结石组[A组:腹腔镜+十二指肠镜组(A1组,55例)、腹腔镜+胆道镜组+十二指肠镜/胃镜组(A2组,40例)]和肝内外胆管结石组[B组:腹腔镜+胆道镜+十二指肠镜组/胃镜组(B1组,32例)、腹腔镜+胆道镜+T管引流组(B2组,32例)],分别比较各组内肝外胆管直径、手术时间、出血量、术后住院时间、总住院时间、术后并发症严重程度、残石率等指标,并进行统计学分析。结果所有病例均顺利完成手术,A组和B组由于病种不同,组间比较无意义,但组内比较有意义。A组中,术中出血量A1组少于A2组[(25.5±21.1)mL比(48.8±50.2)mL],差异有统计学意义(P<0.05),术后Ⅲ级以上近期并发症发生率(3.6%比5.0%)、远期并发症发生率(3.6%比2.5%)及残石率(1.8%比2.5%)比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。B组中,B1组总住院时间短于B2组[(15.4±3.0)d比(19.0±6.2)d],术后住院时间短于B2组[(7.8±2.1)d比(10.2±3.7)d],差异均有统计学意义(均P<0.05);近期并发症发生率(6.3%比9.4%)、远期并发症发生率(3.1%比6.3%)及残石率(6.3%比6.3%)比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论对于肝外胆管结石,根据胆总管直径选择同步腹腔镜和十二指肠镜或同步腹腔镜、胆道镜和十二指肠镜/胃镜的手术方式有较好的微创手术效果;对于肝内外胆管结石的病人,同步腹腔镜下解剖性肝叶切除、胆道镜取石和十二指肠镜/胃镜下内引流的手术方式能够保证病灶切除、取净结石、通畅引流的同时免T管留置,减少了住院时间,获得了最大化微创效果,有较好的推广应用价值。 李珂佳 党学渊 张志鸿 陈晓星 李炎阳 邵国辉 刘昂 郭志唐 邹仁超 魏东 唐波 戈佳云关键词:腹腔镜 十二指肠镜 胆道镜 微创手术 靶向miRNA干扰Bmi-1诱导胆囊癌细胞凋亡及上调Caspase-3表达的实验研究 目的通过靶向抑制原癌基因Bmi-1表达,观察其诱导胆囊癌细胞凋亡及上调Caspase-3蛋白表达的效应,探讨其在胆囊癌形成中的分子机制。方法通过前期成功构建miRNA-Bmi-1重组质粒转染GBC-SD细胞株,然后将其分... 魏东 张小文 王琳 邹浩 吴雪松 戈佳云关键词:GBC-SD 重组质粒 细胞凋亡 文献传递 同步双镜联合在继发性胆总管结石治疗中的应用价值 被引量:7 2020年 目的探讨同步腹腔镜、十二指肠镜双镜联合在胆总管未明显扩张[直径(d)≤0.8 cm]的继发性胆总管结石(CBDS)治疗中的临床应用价值。方法回顾性分析2015年1月至2018年2月收住该院肝胆外科行双镜联合治疗的102例继发性CBDS患者的病例资料。比较分析同步双镜联合治疗组(A组)与非同步双镜联合治疗组(B组)的临床疗效及术后并发症发生率。结果102例患者均顺利完成手术,其中B组3例患者术后并发胰腺炎,1例患者术后残余结石;其余患者术后均恢复良好。两组患者一般资料、术前相关检查指标、术后并发症发生率、腹腔镜下胆囊切除术(LC)术后住院时间、术中出血量、LC手术时间等比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。A组总住院时间、总住院费用明显低于B组[8.50(8.00,10.00)d vs.14.00(11.00,17.50)d、2.09(1.95,2.27)万元vs.2.76(2.53,3.43)万元],两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于胆总管未明显扩张(d≤0.8 cm)的继发性CBDS患者采用同步双镜联合治疗可明显降低患者住院时间及住院费用,且不增加患者术后并发症发生率,值得临床推广。 郭志唐 王琳 魏东 施智甜 陈浩天 马瑞成 艾润垚 戈佳云关键词:继发性 腹腔镜 十二指肠镜 外科治疗 HIF-1α通过调控上皮-间充质转化对胆囊癌侵袭转移的影响 2024年 目的探讨HIF-1α对胆囊癌细胞迁移侵袭的影响及其相关调控机制。方法构建GBC-SD细胞,使用慢病毒转染,分别得到实验组(HIF-1αshRNA)、阴性对照组(空载慢病毒转染)和空白对照组(未处理)。蛋白质免疫印迹法检测E-Cadherin、N-Cadherin蛋白的表达水平,GBC-SD细胞的迁移能力用细胞划痕实验检测,GBC-SD细胞的侵袭能力用Transwell侵袭实验检测。结果与对照组相比,实验组E-Cadherin蛋白的表达水平明显升高(P<0.001),N-Cadherin蛋白的表达水平明显降低(P<0.001),对照组之间E-Cadherin、NCadherin蛋白的表达水平无明显差异(P>0.05)。实验组细胞划痕愈合度较对照组低(P<0.001)、穿模个数较对照组少(P<0.001),而对照组之间细胞划痕愈合度、穿模个数无明显差异(P>0.05)。结论靶向敲低HIF-1α可以降低GBC-SD细胞的迁移侵袭能力,其作用机制可能与调控上皮-间充质转化有关。 李鹏 邹仁超 代龙翱 傅嵩洲 魏东 唐波关键词:胆囊肿瘤 缺氧诱导因子-1Α 肿瘤侵袭 上皮-间充质转化