王瑞娴
- 作品数：9 被引量：20H指数：4
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- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家重点基础研究发展计划苏州市科技计划项目(应用基础研究计划)更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 家蚕内参基因表达稳定性的分析
- 基因组时代，实时荧光定量聚合酶链反应（qRT - PCR）已经成为快速，灵敏检 测基因表达水平的优质方法。为了去除不同标本在RNA的产量、质量以及逆转录效率上可 能存在的差别而导致目标基因特异性表达的差异,通常选择一定的...
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- 关键词：实时荧光定量PCR家蚕
- 芸香苷诱导的家蚕基因BmGSTd1基因转录水平
- 荧光定量PCR ( real-time quantitative PCR, qPCR )因灵敏度高，定量准确等特点， 已广泛应用于基因表达分析。利用合适的参照基因对qPCR 数据进行校正处理是确保该方 法分析准确性的关键...
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- 关键词：实时荧光定量PCR家蚕芸香苷
- 芸香苷诱导家蚕小分子热激蛋白基因的表达变化
- 热激蛋白（HSP）参与生物体细胞内多种生理生化反应，保护细胞在不良环境胁迫下免于受损或降 低损害，起分子伴侣的作用。为了探讨小分子热激蛋白基因家族在家蚕组织与外源物质代谢的关系，给五 龄家蚕添食用芸香苷溶液浸泡的桑叶，采...
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- 关键词：家蚕小分子热激蛋白转录水平
- 野桑蚕谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)基因的诱导表达定量分析被引量：6
- 2010年
- 谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)在机体的解毒代谢和抗氧化中起重要作用。为了从分子水平上探究野桑蚕Bombyx mandarina对杀虫剂抗性的产生机理,本研究采用实时荧光定量RT-PCR方法,对GSTs基因在正常饲养野桑蚕5龄幼虫及用敌敌畏和溴氰菊酯处理5龄幼虫不同组织中的转录水平进行检测,并采用Actin3内源参照基因对检测结果进行归一化处理。结果表明:用敌敌畏和溴氰菊酯处理5龄幼虫24h后,GSTs基因在各组织中的诱导转录水平存在差异,但GSTs基因在脂肪体中的诱导转录水平最高,其次为中肠,可能与这2种组织是野桑蚕主要的解毒器官有关。其中,GSTe2和GSTe5基因诱导转录水平相对较高,推测这2个基因可能主要参与野桑蚕对外源物质的解毒代谢。
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- 关键词：野桑蚕实时荧光定量PCR
- 蜕皮激素诱导下家蚕CYP3基因家族的表达变化被引量：3
- 2010年
- 为了研究家蚕Bombyxmori CYP3家族基因经蜕皮激素诱导后的表达变化,用蜕皮激素溶液(2×10-3μg/μL)浸泡的桑叶喂食家蚕B.mori5龄幼虫,以不用蜕皮激素处理的桑叶喂食家蚕为对照,采用双跟踪标定定量PCR(dual-spike-in qPCR)方法,检测在蜕皮激素诱导下家蚕中肠和脂肪体内CYP3基因家族的转录水平。结果表明:与对照相比,在蜕皮激素诱导下家蚕幼虫体内脂肪体中CYP302,CYP306和CYP339的转录水平分别上升了191.4,7.4和421倍,在中肠中变化不显著;其余基因转录水平变化不明显或检测不到转录活性。结果说明CYP339基因有可能参与家蚕蜕皮激素的代谢,这为进一步研究P450基因与内源物质的关系提供理论基础。
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- 关键词：家蚕蜕皮激素转录水平
- 家蚕HSP基因的表达调控研究
- 家蚕(Bombyx mori)是重要的经济昆虫和模式生物。热激蛋白(heat shock protein,HSP)是在生物界广泛存在的蛋白质,不仅在应激条件下高表达,在正常情况下的组织中也广泛存在。蜕皮激素属于类固醇激素...
- 王瑞娴
- 关键词：家蚕热激蛋白生物信息学
- 文献传递
- 芸香苷对家蚕谷胱甘肽-S-转移酶部分基因的诱导表达被引量：6
- 2011年
- 谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-transferases,GSTs)是对一种机体的解毒代谢起重要作用并可以被诱导的酶系。为了从分子水平上探究家蚕Bombyx mori GSTs基因与植物次生物质芸香苷代谢的关系,本实验采用双跟踪标定定量PCR(dual-spike-in qPCR)方法,用5×10^(-1),5×10^(-2),5×10^(-3) ng/μL 3个浓度芸香苷溶液处理家蚕5龄幼虫,并对各组织中GSTs Epsilon家族不同基因的转录水平进行检测。结果显示,浓度为5×10^(-2) ng/μL的芸香苷溶液能诱导GSTs基因的转录水平发生显著变化。在中肠中,BmGSTe1,BmGSTe2和BmGSTe6的诱导转录水平较高,在诱导后24 h达到最大值;在脂肪体中BmGSTe1,BmGSTe6和BmGSTe7的转录水平相对较高且分别在诱导后2 h,2 h和4 h达到最大值;而GSTs基因在马氏管中表达量均很低或者检测不到表达。与5×10^(-2) ng/μL浓度相比,5×10^(-1)ng/μL的芸香苷溶液诱导后各基因的转录水平上升的幅度较小并且达到峰值的时间不同,而5×10^(-3) ng/μL浓度的芸香苷溶液并不能使GSTs基因的诱导转录水平发生变化。结果提示,家蚕GSTs Epsilon家族基因对芸香苷的代谢具有重要作用。
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- 关键词：家蚕芸香苷
- 外源物质诱导家蚕小分子热激蛋白基因HSP19.9的组织表达活性分析被引量：5
- 2010年
- 小分子热激蛋白(sHSP)参与生物体细胞内多种生理生化反应,并保护细胞在外界不良环境胁迫下免于受损或降低受损程度。为了探讨家蚕小分子热激蛋白在家蚕组织对外源物质代谢中的作用,分别给家蚕添食蜕皮激素(MH)和芸香苷(rutin)后,采用双跟踪标定定量PCR(dual spike-in qPCR)方法,分析家蚕sHSP19.9基因(BmHSP19.9)的组织应急表达特征。结果表明,家蚕5龄幼虫食下2×10-3μg/μL蜕皮激素溶液或5×10-2 ng/μL芸香苷溶液浸泡的桑叶2 h后,BmHSP19.9基因在中肠、脂肪体和马氏管组织中的转录水平均有上升,尤其是在脂肪体中的转录水平非常高,在中肠组织的转录水平出现2个峰值,推测与中肠组织存在不同的应激系统有关。
- 王瑞娴高瑞娜张婷赵国栋李兵卫正国沈卫德
- 关键词：家蚕脂肪体马氏管
- 芸香苷诱导家蚕谷胱甘肽-S-转移酶omega家族基因的表达变化被引量：5
- 2011年
- 谷胱甘肽-S-转移酶(GST)是在机体的解毒代谢和抗氧化过程中起重要作用的超家族酶系。分析家蚕(Bombyx mori)GST omega家族基因在体内摄入植物次生物质芸香苷后的表达变化,为从代谢生理研究家蚕对农药的抗性,以及探讨植物次生代谢物质影响鳞翅目害虫对农药的敏感性的机制提供参考。采用双跟踪标定定量PCR(dual-spike-in qPCR)方法,检测添食不同浓度芸香苷溶液的家蚕5龄幼虫的中肠和脂肪体中GST omega家族不同基因的转录水平,结果显示添食质量浓度为5×10-2 ng/μL的芸香苷溶液能诱导GST基因的转录水平发生显著变化:与对照相比,中肠中BmGSTo1、BmGSTo2和BmGS-To3基因在诱导后24 h的相对转录水平分别上升了7 143、1 391和3 398倍;在脂肪体中BmGSTo1的转录水平最高且在诱导后2 h达到最大值。与添食5×10-2 ng/μL芸香苷溶液处理组相比,添食5×10-1 ng/μL芸香苷溶液诱导后GST基因在蚕体组织转录水平上升的幅度较小,并且达到峰值的时间不同,而添食5×10-3 ng/μL芸香苷溶液诱导后并不能使GST基因的转录水平发生变化。研究结果提示:家蚕GST omega家族基因可能参与对摄入蚕体内的芸香苷的代谢。
- 张婷卫正国高瑞娜王瑞娴赵国栋李兵沈卫德
- 关键词：家蚕芸香苷转录水平
