王德智
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
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- 错配修复基因MLH1激活p53和线粒体凋亡通路参与雌激素诱导的结肠癌细胞凋亡被引量：5
- 2014年
- 临床和流行病学研究显示雌激素替代治疗可降低绝经后妇女的结直肠癌发生风险。前期研究发现雌激素能上调结肠癌细胞的错配修复(MMR)基因MLH1表达,在MLH1基因缺失的结肠癌细胞中再表达MLH1能明显增强雌激素诱导的细胞凋亡。目的:探讨MLH1参与雌激素诱导结肠癌细胞凋亡所涉及的信号通路以及p53及其相关基因在此凋亡通路中的作用。方法:以含人野生型MLH1(hMLH1)全长cDNA的质粒转染MLH1基因缺失的人结肠癌细胞株HCT116。以转染空质粒的HCT1 16细胞作为对照,在有或无雌激素作用的条件下,采用电泳法检测凋亡DNA Ladder,蛋白质印迹法检测p53等凋亡相关蛋白表达。结果:转染hMLH1后,10^(-8)mol/L雌二醇(E_2)能明显诱导HCT116细胞凋亡。转染hMLH1并经E_2处理的HCT116细胞(D组)与经E_2处理但未转染hMLH1的HCT116细胞(B组)相比,其caspase-3、caspase-9、p53、Bax、胞质细胞色素C蛋白表达均显著增强,D组上述蛋白表达亦均高于转染hMLH1但未经E_2处理的HCT116细胞(C组)。结论:MMR基因MLH1主要通过激活p53和线粒体凋亡通路参与雌激素诱导的人结肠癌细胞株HCT116凋亡。
- 吕晨曦王德智金鹏杨欣艳盛剑秋
- 关键词：DNA错配修复基因MLH1基因P53
- 错配修复基因MSH2再表达对雌激素诱导结肠癌LOVO细胞凋亡的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 观察错配修复基因MSH2再表达对雌激素诱导结肠癌LOVO细胞凋亡的影响并探讨其机制.方法 按转染质粒不同及是否进行雌二醇干预将结肠癌LOVO细胞分为空质粒十乙醇组、空质粒十雌二醇组、MSH2＋乙醇组、MSH2＋雌二醇组、雌激素受体（ER）β＋乙醇组、ERβ＋雌二醇组、ERβ＋ MSH2＋乙醇组、ERβ＋ MSH2＋雌二醇组并予相应处理.用Western印迹法检测ERβ、MSH2的转染效率和凋亡相关caspase3蛋白的表达情况.用细胞计数试剂盒8法检测各组细胞的活性.用凋亡DNA碎片提取试剂盒提取各组细胞的DNA碎片并观察DNA碎片的梯状条带.用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率.多组间比较行单因素方差分析,两组间比较行t检验.结果 转染后,LOVO细胞中ERβ和MSH2蛋白的表达水平均显著升高,且其表达均不受雌二醇的影响.ERβ＋雌二醇组和ERβ＋ MSH2＋雌二醇组caspase3蛋白的裂解活化片段表达水平高于其他组,但该二组之间则无明显差异.空质粒十乙醇组、空质粒十雌二醇组、MSH2＋乙醇组、MSH2＋雌二醇组、ERβ＋乙醇组、ERβ＋雌二醇组、ERβ＋ MSH2＋乙醇组、ERβ＋ MSH2＋雌二醇组的LOVO细胞活性分别为1.72±0.25、1.74±0.31、1.77±0.35、1.74±0.33、1.70±0.34、1.02±0.48、1.71±0.31、1.07±0.18,组间差异有统计学意义（F=3.791,P＜0.05）;其中ERβ＋雌二醇组低于ERβ十乙醇组,ERβ＋ MSH2＋雌二醇组低于ERβ十MSH2＋乙醇组,ERβ＋雌二醇组低于空质粒十雌二醇组,ERβ＋ MSH2＋雌二醇组低于MSH2＋雌二醇组,差异均有统计学意义（t=3.158、3.075、3.648、3.253,P均＜0.05）.ERβ＋雌二醇组和ERβ＋MSH2＋雌二醇组中可见细胞凋亡后DNA碎片形成的DNA梯状条带.空质粒十乙醇组、空质粒十雌二醇组、MSH2＋乙醇组、MSH2＋雌二醇组、ERβ＋乙醇组、ERβ＋雌二醇组、ERβ＋MSH2＋乙醇组、ERβ＋MSH2＋雌二醇组的细胞凋亡率分别为7.86±0.19、7.8
- 吕晨曦王德智金鹏何玉琦李爱琴杨欣艳盛剑秋
- 关键词：细胞凋亡
