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全国医院血站人类免疫缺陷病毒抗体检验室间质量评价被引量：8: 2000年; 邢文革马嵘邓巍王露楠李金明郑怀竞; 关键词：血清诊断人类免疫缺陷病毒抗体室间质评

我国临床免疫和分子检验的标准化: 李金明王露楠张瑞张括陈文祥王治国谢洁红王薇孙宇潘阳洪萍宋利琼林贵高; 该项目属实验诊断学。针对临床基因扩增检验实验室技术验收、临床检测程序及结果报告和解释等，进行标准化；再从安全稳定的临床免疫和分子检验的标准物质研究着手，解决相应诊断系统和试剂的标准化问题，加上监控各种检验项目准确性的室间...; 关键词：; 关键词：疾病诊断临床免疫学实验诊断学

含轮状病毒NSP3基因病毒样颗粒的构建和表达被引量：4: 2012年; 目的:通过改变MS2噬菌体衣壳蛋白RNA包装位点的亲和力,构建并表达含轮状病毒NSP3基因耐RNA酶的病毒样颗粒,并探讨其稳定性。方法:设计含PvuⅠ和KpnⅠ酶切位点的上、下游引物,扩增1 049 bp轮状病毒NSP3基因片段,并将包装位点-5位的U替换为C,提高与MS2衣壳蛋白作用的亲和力。用PvuⅠ和KpnⅠ双酶切扩增的目的基因和pACYC-MS2表达载体,连接获得重组载体pACYC-MS2-NSP3,转化TOP10感受态细胞后用PCR验证阳性克隆并测序。阳性克隆转化BL21(DE3)细胞后表达含轮状病毒NSP3基因病毒样颗粒,用超声破碎、纯化获得表达产物,鉴定并讨论其稳定性。结果:成功构建pACYC-MS2-NSP3表达载体并获得了含轮状病毒NSP3基因病毒样颗粒,其可耐受DNA酶和RNA酶的降解,并在-20℃、4℃、室温25℃下10 d保持稳定。结论:通过改变MS2噬菌体衣壳蛋白RNA包装位点的亲和力,可以成功构建耐RNA酶的病毒样颗粒,本研究所构建的病毒样颗粒具有耐RNA酶的特性和良好的稳定性,为轮状病毒实时荧光定量逆转录-PCR的标准品和质控品的研究提供了一个可行的方法。; 常乐张括张瑞谢洁红李金明王露楠; 关键词：轮状病毒属病毒粒子核糖核酸酶类

标本处理对聚合酶链反应测定乙肝病毒核酸的影响被引量：32: 2000年; 目的　研究对血清标本进行乙型肝炎病毒 (HBV)DNA聚合酶链反应 (PCR)测定前的最佳标本处理方法。方法　使用煮沸裂解方法和核酸纯化方法同时处理 2份HBVDNA含量不同血清标本及 3份溶血和正常血清标本 ,比较荧光定量PCR测定的重复性及测定值的差异。结果　煮沸裂解法处理 2份标本所得结果的重复性 (变异系数CV分别为 0 2 16 5和 0 32 6 2 )明显差于对样本进行核酸纯化后的测定重复性 (CV分别为 0 0 6 99和 0 10 92 ) ;并且 ,当标本中血红蛋白含量大于 5 .89μg/L时 (肉眼未见有明显溶血 ) ,采用煮沸裂解法处理标本所得HBVDNA量较核酸纯化方法所得值低约 2个数量级 (P <0 .0 5 )。结论　在HBVDNAPCR检测时 ,煮沸裂解法不适合用来处理血清标本。; 李金明王露楠邓巍; 关键词：聚合酶链反应标本制备

用不同的ELISA试剂盒检测抗-HCV弱阳性血清标本的结果分析被引量：8: 2004年; 目的　了解目前国内用于抗 HCV检测的ELISA试剂盒现状。方法　使用四家国产和一家进口抗 HCVELISA试剂盒检测 ,结果不一致的样本再用CHRONRIBA3 .0SIA检测确认 ,并对RIBA测定阴性及不确定的样本用RT PCR方法测定HCVRNA。结果　对所选择的 2 8份抗 HCV弱阳性样本 ,五家ELISA试剂盒测定的假阴性率为 2 5 .0 %～82 .1%;不同试剂盒间的测定结果有较大程度的不一致性。随机两家试剂组合 ,测定的假阴性率降至 14 .3 %～ 46.4%。两家国产和一家进口试剂组合使用 ,可使测定的假阴性率降低至 3 .6%～ 14 .3 %(P <0 .0 1)。结论　目前国内使用的抗 HCVELISA试剂盒对弱阳性样本的检出率差异明显 ,因此对于抗 HCV初检阴性的献血员站应使用不同于初检试剂的国产或进口试剂盒进行复检 ,以降低HCV感染的经输血传播的可能性。; 胡翠华李金明王露楠邓巍; 关键词：ELISA 试剂盒抗-HCV 血清标本

抗体或抗原的固相化方法研究进展被引量：3: 1997年; 抗体成抗原的固相化是固相免疫测定的前提．应用最广的固相化方法是被动吸附，但其有难以避免的缺陷，蛋白A：抗体、链亲合素：生物素化抗体等间接非共价吸附方法的出现，大为提高了抗体或抗原固和化的有序性和均一性。共价吸附一般是利用聚苯烯表面的羧基、氨基等基因在水溶性碳二亚胺或戊二醛等存在下与抗体或抗原等生物分子的氨基反应而成，尤为适用于多肽等分子量相对较小的生物分子的固相化。; 李金明; 关键词：抗体抗原

抗核抗体的检测程序与结果报告及解释被引量：9: 2009年; 抗核抗体（ANA）的间接免疫荧光（ⅡF）检测，是临床最为常用的自身免疫病（AID）初筛指标。本期发表的北京协和医院李永哲实验室的2篇文章，是在其长期日常工作的基础上的总结，结果表明，实验室根据所用测定试剂及其系统，建立其自身的ⅡF-ANA测定的参考范围，并有相应测定程序及对测定结果的合理解释，对提高ANA检测的临床应用价值有关键性作用。; 李金明; 关键词：抗体抗核荧光抗体技术自身免疫疾病

一种检测沙眼衣原体的质控物: 本发明公开了一种检测沙眼衣原体的质控物，属于临床检验学和生物技术领域。一种检测沙眼衣原体的质控物，含有序列表SEQ ID No.1至SEQ ID No.4所示的核苷酸序列或其互补序列。本发明的优点是：(1)利用重叠PCR...; 李金明霍虹王露楠张括张瑞; 文献传递

一种病毒RNA检测引物的设计方法及试剂盒: 本发明涉及一种病毒RNA检测引物的设计方法及试剂盒，尤指一种新型的病毒RNA小片段引物设计方法和以此方法设计的HCV？RNA检测试剂盒，属于临床检验学领域。本发明通过对HCV？RNA的5’–UTR区不同位置的引物设计，发...; 李金明陈利达李文丽; 文献传递

酶免疫试验(EIA)测定的放大系统研究进展被引量：1: 1996年; 为提高EIA测定的敏感性,可使用多种测定放大系统。本文在概括了EIA放大系统建立的一般原则的基础上,着重对生物素-亲合素、碱性磷酸酶(AP)、双酶级联反应、酶激活、凝固因子酶级联反应等EIA放大系统及其近来的研究进展作了简要介绍。; 李金明徐锡霞; 关键词：酶免疫试验 EIA 放大系统

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李金明