李莉莉
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：北京生物制品研究所更多>>
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- 不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6的重组表达及免疫保护作用研究被引量：6
- 2010年
- 目的研究不可分型流感嗜血杆菌（NTHi）重组外膜蛋白P6的理化性质和对小鼠的免疫保护作用。方法利用PCR技术，以NTHi基因组为模板，扩增出编码外膜蛋白P6的基因片段；构建pET-32a—P6重组质粒；转化到大肠杆菌B121（DE3）中进行表达，并对表达条件进行了优化。通过阴离子交换和凝胶过滤层析对蛋白进行纯化。经SDS—PAGE、Western blot等对蛋白的理化性质进行初步分析，继而免疫BALB／c小鼠，用同源菌经腹腔攻击，比较免疫组和对照组小鼠死亡率。结果实现了该蛋白在大肠杆菌中的高效表达，产物表达形式为可溶性表达，纯化后蛋白纯度可达95％，收率可达5mg／g（蛋白／湿菌），相对分子质量（Mr）为14145．848，Western blot证实重组P6蛋白能与菌源提纯P6蛋白免疫小鼠后的抗血清发生特异性反应。动物实验结果表明重组P6蛋白在小鼠体内能诱生高滴度的抗体，显示免疫组小鼠存活率明显高于对照组（P〈0．01）。结论重组NTHi外膜蛋白P6的原核表达产物为可溶性蛋白，在小鼠体内能诱生高效价抗体，在小鼠感染模型中具有保护作用，为NTHi疫苗的研发提供了基础资料。
- 陈祥鹏王健李莉莉陈敬张振龙
- 关键词：不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白克隆表达免疫保护
- 人干扰素epsilon(IFN-ε)研究进展被引量：1
- 2009年
- 人干扰素epsilon(IFN-ε)属于Ⅰ型干扰素,具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等生物学作用,目前国内外对其研究不多,是一种有待开发的新型干扰素。本文就IFN-ε的基因结构、表达方式、表达位置、受体、受体配体的作用途径、生物学作用以及临床应用的前景等方面,进行了比较系统的归纳和总结。
- 李莉莉郑凡张振龙
- 关键词：干扰素基因结构
- 人IFN-ε的表达、纯化及生物学特性研究被引量：2
- 2008年
- 目的表达并纯化人IFN-ε，并对其理化特性和生物学特性进行初步研究。方法利用PCR技术以人基因组DNA为模板，获得目的片段的全基因序列后，克隆到原核表达载体pET-32a（＋）上，构建重组表达载体pET-32a（＋）／IFN-ε，转化到大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达，并对表达进行了优化。产物的表达形式为包涵体，经过纯化复性后，获得高纯度的活性蛋白IFN-ε。对IFN-ε的理化性质和抗病毒活性、抑制肿瘤细胞增长活性、刺激细胞产生抗病毒蛋白的活性进行了鉴定。结果IFN-ε以包涵体形式表达，纯化后纯度大于95％，抗病毒活性为1．2×10^5 IU／mg，能够抑制肿瘤细胞的生长，并能诱导细胞产生抗病毒蛋白MxA。结论成功表达了人IFN-ε蛋白，并证明此蛋白质具有抗病毒和抗细胞增殖的活性。
- 李莉莉张振龙
- 关键词：干扰素包涵体蛋白复性
- 肺炎链球菌蛋白疫苗候选蛋白研究进展
- 2012年
- 肺炎链球菌能够引起肺炎、脑膜炎、中耳炎等疾病,在世界范围内具有很高的致病率和致死率。患者主要集中在婴幼儿、老年人和免疫力低下的人群。据统计,每年大约有一百万的五岁以下儿童死于肺炎链球菌引起的疾病。抗生素是肺炎链球菌引起疾病最常用的治疗药物,但是,耐青霉素和多重耐药菌的出现使这些疾病的治疗难度大大增加，同时，
- 李莉莉郑凡王健
- 关键词：肺炎链球菌蛋白疫苗治疗药物免疫力低下多重耐药菌耐青霉素
- 重组人乳头瘤病毒16型L1 VLP的初步纯化、鉴定及免疫效果的初步研究
- 2010年
- 目的 对昆虫细胞-杆状病毒系统表达的人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）16型L1蛋白病毒样颗粒（virus-like particle,VLP）进行初步纯化研究,并在小鼠中检测纯化VLP的免疫原性.方法 采用蔗糖-氯化铯密度梯度超速离心纯化方法纯化HPV16 LI VLP.对纯化得到的VLP分别进行蛋白印迹法、十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及电镜鉴定.然后用VLP免疫6周龄BALB/c小鼠.将小鼠随机分成6组（3个剂量组、2个佐剂组和1个对照组）,间隔2周免疫3次,3次剂量相同.取血分离血清,采用间接ELISA法检测抗HPV16 L1 VLP抗体滴度.结果 经蔗糖-氯化铯密度梯度超速离心纯化后,用SDS-PAGE鉴定纯化的HPV16 LI VLP,纯度达到90%.电镜观察可见完整的VLP颗粒.间接EUSA检测结果显示,剂量组及佐剂组小鼠血清中均可检测到特异性抗HPV16 L1 VLP抗体,且抗体滴度随针次和剂量的增加而增高.结论 采用蔗糖-氯化铯密度梯度超速离心纯化法得到的HPV16 L1 VLP可用于免疫学初步研究.通过昆虫细胞表达产生的HPV16 LI VLP 具有较强的免疫原性,能诱导小鼠产生强的体液免疫应答.
- 孙丽媛张婷于世荣陈祥鹏刘君李莉莉张夕燕张振龙许雪梅
- 关键词：人乳头瘤病毒16L1蛋白病毒样颗粒
