李素丽
- 作品数:6 被引量:14H指数:3
- 供职机构:新疆大学生命科学与技术学院生物资源基因工程重点实验室更多>>
- 发文基金:新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金国家自然科学基金教育部“春晖计划”更多>>
- 相关领域:生物学农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 荒漠昆虫小胸鳖甲抗冻蛋白MpAFP698对酿酒酵母的低温保护作用被引量:2
- 2017年
- 昆虫抗冻蛋白作为天然无毒副作用的低温和冷冻保护剂,在发酵菌种的保藏方面具有很好应用前景。为了验证荒漠昆虫小胸鳖甲(Microdera punctipennis)抗冻蛋白Mp AFP698对酵母菌的抗冻和抗低温保护效果,对Mp AFP698抗冻蛋白进行原核表达和纯化,获得了具有活性的融合抗冻蛋白MBP-Mp AFP698。将质量浓度为1、10、30μg/m L的MBP-Mp AFP698添加到酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中,在-7和-20℃冷冻处理酵母菌液不同时间;以10μg/m L的抗冻蛋白在4、0、-50℃处理酵母菌液,在-20℃反复冻融处理,观察菌落形态并统计菌种存活率。结果表明,添加抗冻蛋白组的酵母存活率显著优于未加抗冻蛋白的对照组,1μg/m L就有保护效果,10μg/m L保护效果最好,说明昆虫抗冻蛋白能以极低的浓度发挥低温保护作用。
- 张凤娟孙琳洁李素丽马纪
- 关键词:酿酒酵母细胞存活
- 花粉管介导的准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白转基因棉花的筛选被引量:4
- 2008年
- 利用新疆荒漠昆虫抗冻蛋白基因进行遗传转化是培育新疆棉花抗寒品种的新途径。研究采用RT-PCR结合RACE技术从新疆荒漠昆虫准噶尔小胸鳖甲(Microdera puntipennis dzungarica)中克隆获得抗冻蛋白(Antifreeze protein)基因MpAFP149。将MpAFP149克隆至pBI121上,获得重组质粒后采用电转化法将重组质粒转入农杆菌EHA105内,PCR筛选鉴定重组子,并测序确定抗冻蛋白植物表达载体构建正确。将pBI121-MpAFP通过田间的花粉管导入技术转化棉花,收取转化的棉花种子,经检测证明在转化10 000朵花中,卡那霉素抗性筛选出13株,PCR检测有2株阳性植株。实验结果为进一步开展抗冻蛋白基因转化棉花的研究奠定了基础。
- 马纪李春平邱立明徐建辉赵干李素丽
- 关键词:准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因转化棉花
- 准噶尔小胸鳖甲融合抗冻蛋白活性的比较研究被引量:4
- 2008年
- 为了比较准噶尔小胸鳖甲Microdera punctipennis dzhungarica原核表达的不同融合抗冻蛋白活性是否存在差异,分别利用重组表达质粒pGEX-4T-1-Mpafp5和pMAL-p2x-Mpafp5在大肠杆菌Escherichia coliBL21(DE3)中诱导表达融合抗冻蛋白GST-MpAFP5和MBP-MpAFP5,并利用亲和层析纯化蛋白。SDS-PAGE分析结果证明获得了两种高效表达纯化的GST-MpAFP5和MBP-MpAFP5融合蛋白。在浓度为0.5mg/mL时,两种蛋白的热滞值分别为0.51℃和1.336℃,其溶液冰晶形态均为棱型。抗冻保护实验结果显示:准噶尔小胸鳖甲两种融合抗冻蛋白均能够显著提高细菌在低温下的存活率,并且MBP-MpAFP5对细菌的保护效果显著高于GST-MpAFP5。研究结果对于准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白的应用具有重要的理论意义。
- 李素丽张富春孙琳杰刘璇马纪
- 关键词:准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白原核表达热滞活性
- 新型食品原料--抗冻蛋白被引量:1
- 2008年
- 阐述抗冻蛋白的特性及分类,讨论抗冻蛋白作为一种新的食品原料在食品工业中的应用及前景。
- 孙琳杰李素丽马纪李友广张富春
- 关键词:抗冻蛋白食品原料
- 新疆黄精凝集素基因的克隆、序列分析和表达被引量:4
- 2008年
- 用百合科黄精属植物凝集素基因的保守序列为引物,从新疆黄精的叶中克隆出黄精凝集素的全长cDNA。序列分析表明,克隆获得的新疆黄精凝集素(Polygonatum roseum agglutinin,PRA)基因完整的ORF片段大小为550 bp,编码1条长159个氨基酸肽链,没有内含子,其中N端的28个氨基酸是信号肽。对新疆黄精凝集素cDNA序列同源性的分析比较发现,黄精属植物凝集素基因之间有很高的同源性(92%)。氨基酸序列比对和SWISS-MODEL同源模建分析表明,PRA由12个β-折叠片组成的β-桶结构,具有与单子叶植物甘露糖结合凝集素相似的空间结构。重组质粒pGEX-4T-1-PRA和pMAL-p2x-PRA,分别转化E.coli BL21进行原核表达,新疆黄精凝集素能够以可溶性融合蛋白形式表达,分子量约为14kD。构建真核表达载体pcDNA3-PRA,免疫小鼠后获得了抗血清。免疫印迹结果显示为单一的条带,证明该抗血清具有针对PRA抗原的专一性。新疆黄精凝集素基因的克隆、原核和真核的表达以及抗血清的制备,为进一步研究凝集素蛋白的性质和功能,并为植物抗病虫基因工程研究提供有用的实验材料。
- 孙素荣张智李素丽胡俊张富春
- 关键词:凝集素原核表达
- 不同结构荒漠昆虫抗冻蛋白表达及其活性比较
- 抗冻蛋白(antifreeze proteins, AFPs)是一类可以抑制冰晶生长的功能性生物大分子,它能以非依数性形式降低溶液的冰点而不影响其熔点,从而导致溶液冰点和熔点的差异,这种差异称为抗冻活性或热滞活性(the...
- 李素丽
- 关键词:抗冻蛋白蛋白结构
- 文献传递