李皎
- 作品数：40 被引量：83H指数：6
- 供职机构：陕西省微生物研究所更多>>
- 发文基金：西安市科技局应用发展研究资助项目西安市科技计划项目中国科学院西部之光基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程理学更多>>
- 环糊精葡萄糖基转移酶工业发酵染菌(Bacillus cohnii strain PGRS7)的鉴定及防治被引量：2
- 2020年
- 环糊精生产厂家β-环糊精葡萄糖基转移酶(β-cyclodextrin glycosyltransferase,β-CGTase)发酵过程中频繁染菌,为解决这一问题,从发酵异常的发酵液中分离得到1株不产酶的杂菌H03S。研究杂菌发酵过程中的菌体密度、pH值、酶活等指标,发现杂菌生长速度明显低于正常菌,发酵液pH值下降速度也慢于正常菌。结合厂家实际生产情况分析:若发酵过程规范操作,则正常菌会优先形成生长优势,抑制杂菌生长;如果发酵罐实消后放置时间过长或者突发停电导致发酵终止后重新启动,杂菌会形成优势菌群,降低发酵液pH值,不利于正常菌的增殖。16S rDNA鉴定杂菌序列与正常菌不同,应归属于Bacillus cohnii strain PGRS7。因此,发酵前应预先采用16S rDNA分析鉴定菌种,排除杂菌,避免发酵中断和延迟,防止发酵染菌。
- 李皎杨国武段梦露邓媛毛勇刘清利
- 关键词：Β-环糊精染菌
- 高效液相色谱法测定混合环糊精中α-环糊精的含量被引量：2
- 2010年
- 环糊精在工业生产中的产物是由α-CD,β-CD,γ-CD和糖类等混合而组成,α-CD相对于β-CD,γ-CD具有更小的空腔,更适于包结相对较小分子量的化合物。目前在实际工作中α-环糊精的测定主要利用紫外分光光度计显色法进行,由于混合环糊精中还含有β,γ-CD及麦芽糊精,互相间有很大干扰,耗时长,操作复杂。为准确测定产物中α-CD的含量,本研究利用高效液相色谱法测定混合环糊精中α-环糊精的含量。色谱柱为Spherrigel C6H5(5μm 300×3.9mm),采用流动相为v(甲醇)∶v(水)(5∶95)溶液进行洗脱,流速为1.0mL/min,检测器为示差折光检测器,柱温40℃。α-环糊精的线性范围为0.1mg/mL^10mg/mL,加样回收率(n=6)为98.46%,RSD(n=6)0.12%。本方法简便、灵敏、准确,可用于α-环糊精的含量测定和质量控制。
- 毛勇邓媛李皎
- 关键词：Α-环糊精高效液相色谱
- 纳他霉素-羟丙基-β-环糊精包合物的制备方法
- 本发明涉及一种纳他霉素-羟丙基-β-环糊精包合物的制备方法。纳他霉素存在两种典型构型：烯醇式结构和酮式结构，在许多溶剂中具有低溶解性，限制了其的推广应用。本发明将纳他霉素溶解于碱；加入羟丙基-β-环糊精，在15℃-40℃...
- 毛勇邓媛李皎杨国武汪大敏王燕李飞张美丽
- 文献传递
- γ-环状糊精葡萄糖基转移酶产生菌菌种筛选
- 杨国武李皎谢薇梅汪大敏徐颐玲谢伯泰
- 利用γ-环状糊精葡萄糖基转移酶（γ-cyclodextrin glucanotransferase，简称γ-CGTase）降解、环化淀粉得到γ-CD是目前唯一可行途径。Γ-CD的生产原理是特殊的菌株以淀粉、小分子低聚糖，...
- 关键词：
- 关键词：产生菌
- 啤酒酵母可溶性1,3-β-D-葡聚糖的生物提炼及纯化方法
- 本发明涉及一种啤酒酵母可溶性1,3-β-D-葡聚糖的生物提炼及纯化方法。目前对酵母细胞壁中可溶性1,3-β-D-葡聚糖的提取，工艺不具备连续性。本发明在同一反应体系中，利用超声波、中性蛋白酶、甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶将酵...
- 李皎杨国武汪大敏邓媛
- 文献传递
- Bacillus clarkii 7364 γ-环糊精葡萄糖基转移酶的可溶性表达及其催化特性分析被引量：2
- 2017年
- 按照大肠杆菌偏爱密码子对Bacillus clarkii 7364来源的γ-环糊精葡萄糖基转移酶(γ-CGTase)进行优化,构建γ-CGTase原核表达菌株,摸索γ-CGTase的可溶性表达条件及纯化条件,并对其催化特性进行研究。结果表明:在28℃条件下实现了γ-CGTase的高效可溶性表达,可溶性蛋白占总蛋白表达量的63%,酶活可达3 830 U/mL。经(NH4)2SO4沉淀和α-CD-Sepharose 6B亲和柱纯化后,酶蛋白纯化了12.97倍,酶收率20.31%。使用该酶对木薯淀粉进行转化,转化产物中γ-环糊精(γ-CD)的比例可达90.9%,几乎无α-环糊精(α-CD),与天然酶的79%相比提高了15%。将该基因工程菌在20 L发酵罐中发酵,10 h后酶活达到4 375 U/mL,证实了其工业化放大的可能。该酶具有非常高的转化专一性,有非常好的工业化前景。
- 王琰万一李皎杨国武邓媛王军
- 关键词：BACILLUSCLARKII可溶性表达
- 一种精制β－葡萄糖苷酶发酵液的生产方法
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及β－葡萄糖苷酶发酵液精制的生产方法。本发明要克服现有技术存在的步骤复杂、成本较高和难以实现工业化生产的问题。一种精制β－葡萄糖苷酶发酵液的方法，本发明所述的制备原理以枯草芽孢杆菌(Baci...
- 汪大敏杨国武李皎邓媛
- 文献传递
- 发酵生产β-环状糊精葡萄糖基转移酶的气球菌(Aerococcus sp·P3-2)污染及防治被引量：3
- 2012年
- 我们从环状糊精生产厂家的β-环状糊精葡萄糖基转移酶发酵失败的发酵液中分离出一株气球菌。此菌可以在发酵专用碱性培养基上生长,但不生产β-环状糊精葡萄糖基转移酶。通过研究该菌种在碱性培养基上的发酵过程中的pH、OD、酶活,同时使用16SrDNA进行分析,证明此菌种为气球菌(Aerococcussp.P3-2),其在发酵过程中可以明显降低发酵培养基的pH,对正常生产菌形成抑制。通过对发酵生产可能染菌的环节进行微生物取样分析,该菌种大量存在于空气过滤系统的积水中,从而找到污染源,由此判断是由于空气净化系统被污染所导致的发酵失败。在实际生产中定期对空气净化系统中的积水进行排放处理,同时对发酵过程中的酶活和pH进行监控,可以做到发酵污染的早发现直至杜绝发酵污染。
- 李皎杨国武汪大敏王琰毛勇邓媛
- 关键词：纯培养发酵
- 柚苷酶在制备具有抗内毒素活性的药物中的应用
- 本发明涉及柚苷酶的医药新用途，具体涉及柚苷酶在制备具有抗内毒素活性的药物中的应用。柚苷酶由α‑L‑鼠李糖苷酶和β‑D‑葡萄糖苷酶组成，目前主要应用于柑橘、葡萄等果汁的脱苦。本发明涉及柚苷酶在制备具有抗内毒素活性的药物中的...
- 邓媛毛勇杨国武李皎李飞王燕张美丽
- 文献传递
- β-环状糊精葡萄糖基转移酶发酵染菌的分离和16srDNA分析被引量：4
- 2011年
- 目的:解决β-环状糊精葡萄糖基转移酶发酵生产过程中频繁出现的不明原因的酶活降低问题。方法:我们采用特异性酚酞筛选培养基对发酵异常的发酵液进行菌种分离,对分离得到的菌株进行16 srDNA基因序列分析,同时研究他们的发酵过程中光密度、酸碱度、酶活指标。结果:分离得到了一株可以在碱性条件下与正常生产菌共生的芽孢杆菌。经过对发酵过程进行研究,在不同的发酵时期中该菌的光密度的变化和正常生产菌有明显差异,最终酶活仅为正常菌的1/6。通过对16 srDNA基因序列进行分析,确定其为芽孢杆菌,和正常生产菌基因相似度达到93.81%。结论:在生产中采用16 srDNA基因序列分析,可以排除染杂的的生产菌种。只要严格控制发酵出发菌株和严格保证发酵环境的纯培养条件,可以防止染菌的发生。
- 李皎杨国武汪大敏王琰毛勇邓媛
- 关键词：芽孢杆菌纯培养发酵
