李丽丽 作品数:37 被引量:164 H指数:8 供职机构: 东北林业大学园林学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 哈尔滨市科技创新人才研究专项资金 中央高校基本科研业务费专项资金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 天文地球 更多>>
苹果茎痘病毒外壳蛋白的原核表达及抗血清制备 被引量:5 2010年 利用基因重组技术将苹果茎痘病毒Applestempittingvirus(ASPV)完整cp基因在大肠杆菌中表达,以纯化蛋白为抗原免疫新西兰兔制备其抗血清,并采用ACP-ELISA法测定其效价和应用PAS-ELISA法对其抗血清的有效性进行初步鉴定。结果显示,cp基因获得了高效表达,表达产物与Anti-His抗体产生特异性免疫反应。制备的抗血清具有较强的特异性,效价为1:800。PAS-ELISA检测结果显示,9个苹果样品中有8个样品与RT-PCR检测结果一致,仅1个样品RT-PCR检测为阳性,而PAS-ELISA检测为阴性。表明所制备的抗血清具有一定的应用潜力。 李丽丽 张志宏 董雅凤 张尊平 范旭东 裴光前关键词:苹果茎痘病毒 外壳蛋白 抗血清 果树病毒核酸检测技术研究进展 被引量:7 2007年 病毒的核酸检测技术发展非常迅速,主要有PCR技术、分子杂交技术、dsRNA技术、NASBA技术和基因芯片技术。综述了这些技术的原理、特点及其在果树病毒检测中的应用情况。基于PCR技术的检测方法是目前果树病毒检测的主要方法,许多果树病毒的PCR检测体系已经建立。NASBA技术也已开始用于果树病毒的检测。 杨洪一 李丽丽 张志宏关键词:果树 病毒 PCR NASBA 大豆根际解磷细菌的分离及筛选 被引量:1 2014年 解磷菌对于提高土壤中可溶性磷的含量、促进植物对磷的吸收具有重要作用。利用PVK培养基对黑龙江省海伦、北安地区大豆根际土壤中的解磷细菌进行初筛,共分离得到8株具有解无机磷能力的菌株。利用NBRIP培养基进行摇瓶复筛,培养3 d后,根据摇瓶中上清液的可溶性磷量的高低,筛选出5株解磷能力较强的菌株。其中海伦Ⅳ号的解无机磷能力最强,其培养液上清中的溶磷量可提高约10倍。研究中的技术体系可有效获得溶磷的细菌菌株,为进一步开发细菌磷肥打下了基础。 李丽丽 郎敬 杨洪一 邰飞飞 来永才关键词:解磷细菌 大豆 黑龙江省森林植物园药用植物园林应用现状调查 被引量:1 2015年 采用标本采集、分类鉴定、资料考证和实地调研等方法对黑龙江省森林植物园药用植物资源进行了系统调查,以期为药用植物在北方园林应用中的推广提供参考。调查结果表明:黑龙江省森林植物园现有药用植物165种,分别隶属于55科122属,其中药用植物的观赏部位仍以观花为主,占被调查植物的77%。夏季开花的药用植物最多,有78种,占被调查植物的47%,春季和秋季开花的植物分别占被调查植物的22%和31%。在花色调查中,复色花卉占被调查植物的29%,单色花卉中的冷色系花卉应用较少,如蓝色系花卉仅占8%。 李丽丽 宗茹梦关键词:森林植物园 药用植物 苹果茎痘病毒RT-PCR检测及分子变异分析 被引量:7 2010年 利用RT-PCR技术对采自6个苹果品种和7个梨品种的33个样本中的苹果茎痘病毒(Applestem pitting virus,ASPV)进行了检测,ASPV感染率为63%(19/33)。对6个ASPV中国分离物外壳蛋白(Coat protein,CP)基因进行了扩增、克隆和测序,测序结果显示CP基因全长为1191nt,编码397个氨基酸。中国分离物与GenBank中其他分离物核苷酸序列同源性为70.2%~91.7%。系统进化分析显示不同ASPV分离物分为3个大的类群,呈现一定的寄主相关性,并未呈现明显的地理相关性。第一和第三大类群的寄主皆为苹果,第二大类群包含6个梨分离物和2个苹果分离物。不同ASPV分离物的抗原指数差异较大,推断可能由于序列变异引起抗原表位变异,从而引起血清型差异。 李丽丽 董雅凤 张尊平 张志宏 范旭东 裴光前关键词:苹果 苹果茎痘病毒 RT-PCR检测 利用多重RT-PCR技术检测草莓病毒的研究 被引量:9 2007年 Coat protein gene of 12 isolates of Strawberry vein banding virus(SVBV) was studied by multiple sequence alignment and the primers located in conserved region were designed.The detection protocol for SVBV by reverse transcriptase polymerase chain reaction(RT-PCR) was developed.The primers of multiplex RT-PCR were selected by primer-primer interactions and the melting temperature.The annealing temperature,the concentration of PCR buffer,the extension temperature,the extension time and the concentration of pri-mers were optimized,respectively.A multiplex RT-PCR assay was made for simultaneous detecting Strawberry mottle virus(SMoV),Strawberry mild yellow edge virus(SMYEV) and SVBV.Both field-grown strawberries and microplants were detected effectively.It was the first report that multiplex RT-PCR was used to assay the efficacy of strawberry viruses elimination. 杨洪一 张志宏 李丽丽 赵敏关键词:草莓镶脉病毒 PCR技术 斑驳病毒 混合侵染 3种苹果潜隐病毒多重RT-PCR检测体系的建立 被引量:12 2009年 研究建立了能同时检测苹果茎沟病毒(Applestem grooving virus,ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)和苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)的多重RT-PCR方法。以复合感染3种病毒的苹果‘望山红’组培苗为试材,对影响多重PCR的反应条件进行了一系列的调整和优化。多重RT-PCR体系灵敏性测验显示,最低能从RNA总量187.5ng的样品中检测3种病毒的存在。多重RT-PCR产物的序列与报道的病毒序列有较高的同源性,12个田间苹果样品的多重RT-PCR检测结果与单一PCR的结果一致,初步证明了多重RT-PCR检测的准确性。 范旭东 董雅凤 张尊平 李丽丽 裴光前关键词:苹果 多重RT-PCR 苹果茎沟病毒 苹果褪绿叶斑病毒 苹果茎痘病毒 草莓离体再生研究新进展 被引量:7 2007年 对草莓离体再生研究中的一些新进展作了介绍,从TDZ的高效利用、AgNO3、活性碳、重金属离子等附加物的作用、光对叶片再生的影响等方面进行了探讨,还对影响外植体器官发生的生理因子如活性氧和抗氧化酶与再生的关系进行了分析。当前存在的问题主要在于积累的技术要点多是经验性的,对再生机理知之较少,有必要对再生机理及遗传转化相关研究进行深入的、综合性的研究。 杨洪一 李丽丽关键词:草莓 离体再生 活性氧 TDZ 草莓斑驳病毒分子变异及PCR检测技术研究 被引量:5 2008年 【目的】明确草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV)的分子变异特点;探索利用嵌套PCR和转录增强技术检测SMoV的方法。【方法】利用RT-PCR扩增SMoV3′非编码区(non-coding region,NCR)和大外壳蛋白(large coat protein,LCP)基因特异片段,并对扩增产物进行克隆测序。利用生物信息学软件分析不同地区分离物变异特点及系统发育关系。参考测序结果,在SMoV基因组保守区设计引物,利用嵌套PCR和转录增强技术检测SMoV。【结果】获得了SMoV中国分离物的NCR区和部分LCP基因核酸序列,不同分离物部分LCP基因核酸序列同源性为76.8%~99.7%。系统进化分析显示不同分离物呈现轻微的地理相关性。3个波兰分离物,4个中国分离物中的3个,7个荷兰分离物中的4个分别聚集成一簇;2个德国分离物与其它分离物亲缘关系较远,形成一个独立的分支。建立了利用半嵌套PCR和转录增强技术检测SMoV的技术体系,灵敏度高于常规PCR。【结论】SMoV不同分离物变异复杂,德国分离物可能是一个代表特殊株系的群体;基于定位基因组保守区引物,利用嵌套PCR和转录增强技术可有效检测SMoV。 杨洪一 李丽丽 代红艳 张志宏关键词:RT-PCR 系统进化分析 杜仲京尼平苷的高效分离及磁载催化转化技术研究 杜仲(Eucommia ulmoides)是我国特有植物资源,药用历史悠久,含有多种天然活性成分,具有广泛的药理作用。但目前,杜仲资源多用于杜仲茶、饮品、食品、饲料添加剂等初产品的加工,缺乏市场竞争力。如何能将我国特有的... 李丽丽关键词:京尼平苷