朱克军
- 作品数：9 被引量：49H指数：6
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- 人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38经^(60)Co照射后线粒体量与功能的改变
- 2005年
- 目的:检测人胚肺二倍体成纤维细胞WI38受到60Coγ射线照射后线粒体DNA(mtDNA)的相对含量和线粒体功能的改变;探讨γ射线照射后细胞线粒体的变化规律。方法:四氮唑盐(MTT)比色法测细胞活力;采用竞争PCR法测定mtDNA的相对含量;荧光染料R123和TMRM分别标记,流式细胞仪测定线粒体膜电位的变化;酶标分光仪测定线粒体呼吸链氧化酶NADH氧化酶反应2min内活性变化。结果:与正常细胞相比,60Coγ射线照射后,照射组细胞明显肿胀,变短,边缘不整齐,排列紊乱,数量减少;细胞活力(0.359±0.02)明显低于正常组(0.598±0.03,P<0.05);线粒体膜电位约下降为原来的50%;NADH氧化酶活性也降低,最大反应速度由48.93μmol/(mg·min)降为27.80μmol/(mg·min);以核18SrDNA为内参照,照射组mtDNA相对含量为(1.680±0.082),明显高于正常组的(1.296±0.077)。结论:γ射线照射后,WI38细胞mtDNA相对含量的增高可能是线粒体功能下降的一种代偿性反应。
- 孙青菊王学敏朱克军龙建刚缪明永焦炳华
- 关键词：Γ射线膜电位
- 线粒体与衰老相关研究进展被引量：8
- 2005年
- 孙青菊朱克军王学敏
- 关键词：线粒体线粒体DNA衰老
- 不同条件下人乳白蛋白YAC的高效定点打靶修饰
- 2004年
- 目的?对人乳白蛋白酵母人工染色体(HLA-YAC)进行定点改造,以便进一步利用该载体作与基因表达调控相关的 研究。方法:借助kar1突变使YPH925菌株与异交配型菌株交配时丧失核融合的能力,把HLA-YAC由酵母AB1380转移到 his3缺陷的YPH925菌株。分别以HIS3(对YPH925菌株)和G418R(对YPH925和AB1380两种菌株)为选择标记,用含 HLA-YAC的酵母基因组为模板,PCR克隆人乳白蛋白(HLA)基因的5′和3′端非翻译区各684bp和940bp为同源臂,构建 打靶载体,线性化的打靶载体经电转化或醋酸锂转化转入酵母内,以菌落PCR为鉴定方法,辅以测序验证。结果:HLA-YA 在目的位置完成了定点打靶修饰,G418R的筛选效率高于HIS3,醋酸锂转化方法的打靶效率稍高于电转化。结论:对YA 的成功修饰为在动物体内的表达及调控研究打下了基础。
- 张绪峰吴国祥朱克军焦炳华成国祥
- 关键词：YAC酵母人工染色体
- 一种改进的提取人外周血和组织线粒体DNA的方法被引量：7
- 2004年
- 目的 :建立一种简便、快捷地从人外周血和组织中制备高质量线粒体 DNA的方法。 方法 :以差速离心法分离线粒体 ,用碱性 SDS法裂解线粒体膜 ,释放线粒体 DNA后用酚 /氯仿抽提 ,TE或 dd H2 O溶解。然后将所得线粒体 DNA进行纯度鉴定并和其他现有方法制备的线粒体 DNA用 PCR进行长片段扩增 ,比较扩增效果。结果 :用改进的方法制备的线粒体 DNA中没有检测到核 DNA,并能有效扩增 8kb长的目的片段。 结论 :改进后的方法简便、快捷 ,制备的线粒体 DNA纯度高 ,也有利于长片段
- 朱克军汪振诚王学敏缪明永焦炳华
- 关键词：外周血线粒体DNA聚合酶链反应骨骼肌
- 线粒体DNA修复系统相关酶的研究进展被引量：10
- 2004年
- 线粒体DNA(mtDNA)编码线粒体电子传递系统的亚单位以及构建翻译机器所需的各种rRAN和tRNA。mtDNA编码的每一个亚单位都是线粒体完成正常的氧化磷酸化过程所必需的,因此,线粒体DNA的完整性对于生物体的生存十分重要。长期以来,人们一直认为线粒体中不存在DNA的修复。近年来在线粒体提取物中却检测到了一定数量的修复因子,提示线粒体中存在DNA的修复。主要对线粒体修复系统中相关酶的研究进展进行综述。
- 朱克军汪振诚王学敏
- 关键词：线粒体DNAMTDNA修复系统电子传递系统
- 血小板活化因子乙酰水解酶基因Val279Phe突变与银屑病的相关性研究被引量：7
- 2005年
- 目的探讨血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)在银屑病发病机制中的作用。方法等位基因特异性聚合酶链反应技术分析银屑病患者及健康对照者PAF-AH基因Val279Phe位点的多态性,并对含有突变等位基因的多态性片段进行DNA测序分析。采用PAF-AH活性检测试剂盒测定血浆PAF-AH的活性。结果所有研究对象中发现3例Val279Phe突变型杂合子,未发现突变型纯合子;银屑病组的突变等位基因频率与健康对照组差异无统计学意义(P>0.1);银屑病患者血浆PAF-AH活性低于健康献血者,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论本研究结果提示PAF-AH基因的Val279Phe突变与银屑病无明显的相关关系,可能不是银屑病患者血浆PAF-AH活性降低的主要原因。
- 林大东毕新岭朱克军缪明永米庆胜顾军
- 关键词：银屑病PAF血小板活化因子乙酰水解酶突变型AH
- 人线粒体DNA缺失突变检测的研究
- 人线粒体DNA(mtDNA)是存在于线粒体内的双链环状DNA分子,长16,569bp,基因编码产物包括2种rRNA、22种tRNA及13种多肽链.其中多肽链均是氧化磷酸化酶复合体的重要组成成分,而rRNA和tRNA则参与...
- 朱克军
- 关键词：线粒体DNA缺失突变PCR皮肤
- 文献传递
- 银屑病患者血浆血小板活化因子乙酰水解酶活性变化及其临床意义被引量：7
- 2004年
- 目的 探讨银屑病患者血浆血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)活性变化在银屑病发病机制中的作用。方法 采用酶水解底物显色法测定银屑病患者血浆PAF-AH活性。结果 银屑病患者血浆PAF-AH活性明显低于健康对照者(P<0.01)。进展期银屑病患者的血浆PHF-AH活性明显低于静止期和退行期患者(P<0.01),静止期组和退行期组的差异不具有显著性(P>0.1)。结论 PAF-AH活性不足可能是银屑病发病的重要内源性因素之一,其活性水平与银屑病的病情活动性具有相关性,在进行病情及预后判断时可能具有一定的参考意义。
- 林大东毕新岭缪明永顾军朱克军米庆胜
- 关键词：银屑病血小板活化因子乙酰水解酶
- 大鼠肝再生时线粒体通透性转换的变化被引量：13
- 2004年
- 目的 :研究大鼠肝再生过程中肝细胞线粒体膜通透性转换 (PT)的变化规律。 方法 :SD大鼠肝 70 %部分切除 (PH)制作肝再生模型 ,断头取肝分离线粒体后 ,通过检测静息态和不同浓度钙离子诱导下线粒体悬液在 5 4 0 nm处光密度值 (D540 )变化来观察线粒体 PT的时相变化。结果 :与对照组比较 ,大鼠肝再生早期 (PH后 0～ 2 4 h)和后期 (PH后 1 2 0～ 1 6 8h)都表现为肝线粒体先收缩后肿胀 ,也即通透性先下降后增高 ;同时大鼠肝再生早期肝线粒体可明显抵抗钙离子的诱导作用 ,而 PH后2 4 h和 1 6 8h组的大鼠肝线粒体对钙离子的诱导非常敏感。环孢素 A(Cs A)可阻断钙的诱导作用。结论 :大鼠肝再生过程中线粒体 PT出现明显规律性改变 。
- 缪明永朱克军汪振诚刘军华蒋雷王学敏焦炳华
- 关键词：肝再生线粒体钙离子环孢素A
