文剑明
- 作品数：133 被引量：478H指数：12
- 供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人肝再生磷酸酯酶2(PRL-2)的原核表达及其鸡卵黄抗体的制备被引量：1
- 2004年
- 目的 :原核表达人肝再生磷酸酯酶 2 (PRL 2 )与谷胱甘肽S转移酶 (GST)和 6个串联组氨酸 (6×His)的融合蛋白 ,并制备GST PRL 2特异性鸡卵黄抗体。方法 :将人PRL 2cDNA的全长蛋白编码序列 ,克隆入两种原核表达载体pGEX 4T 2和pET2 1a中 ,在大肠杆菌BL2 1中诱导表达融合蛋白。用Glu tathioneSepharose 4B和Ni NTAagarose亲和柱分别纯化目的蛋白。以纯化的GST PRL 2融合蛋白免疫产蛋母鸡制备多克隆抗体 ,应用 6×His PRL 2对抗体进行亲和层析纯化 ,纯化产物用Westernblot进行分析。结果 :得到高表达量的融合蛋白 ,经亲和层析柱纯化后获得较高纯度的GST PRL 2和 6×HisPRL 2融合蛋白。以GST PRL 2融合蛋白免疫鸡得到抗PRL 2的多克隆抗体 ,Westernblot证实 ,经 6×HisPRL 2亲和层析纯化的抗体 ,能够识别 6×His PRL 2和GST PRL 2融合蛋白 ,但不同GST蛋白起反应 ,表明具有较高的特异性。结论 :利用原核表达的人PRL 2融合蛋白制备的抗PRL 2多克隆抗体具有较好的特异性 ,为研究PRL
- 郭爱林曹云新王文丁波黄郁强文剑明
- 关键词：融合蛋白鸡卵黄抗体
- 显色原位杂交评价乳腺癌HER-2状态的意义及其免疫组化评价建议
- 目的检测乳腺癌人表皮生长因子受体2(HER-2)基因扩增和蛋白表达,为临床使用分子靶向药物Trastuzumab(Herceptin)治疗乳腺癌提供依据。方法采用显色原位杂交法检测71例福尔马林固定石蜡包埋的乳腺癌组织H...
- 叶玉清文剑明黄香婷陈建勇韦洁贞冼丽芳
- 关键词：乳腺癌HER-2显色原位杂交免疫组化
- 文献传递
- 蛋白激酶C的活性变化对人肝癌细胞增殖及端粒酶表达的影响被引量：4
- 2004年
- 目的 :揭示蛋白激酶C(PKC)活性变化对人肝癌细胞增殖及端粒酶表达的影响。方法 :体外以PKC激活剂PMA(phorbol- 12 -myristate - 13-acetate)及其抑制剂星形孢菌素 (staurosporine,SP)作用于人肝癌细胞系 (BEL- 74 0 2 ) 4 8h后 ,运用TRAP -银染 (telomericrepeatamplificationprotocolsilverstaining)与计算机图像凝胶扫描记录技术结合的方法来揭示细胞端粒酶活性、PKC变化与细胞增殖的关系。结果 :PMA与SP的作用 ,促进其细胞增殖抑制的同时 ,抑制其细胞端粒酶活性表达。结论 :PKC的活性变化与人肝癌细胞增殖相关 。
- 张海伟罗英儒郑佩娥文剑明
- 关键词：增殖蛋白激酶C端粒末端转移酶
- 骨髓基质干细胞在骨形成蛋白诱导下异位成骨及应用于人造骨的实验研究被引量：10
- 2001年
- 目的 研究经分离培养的骨髓基质干细胞 (MSC)在骨形成蛋白 (BMP)诱导下在体内外的异位成骨效应 ,为研制一种本身具有成骨能力的人造骨材料提供实验依据。方法 分离、培养 Wistar大鼠 MSC,体外实验将 MSC+ BMP分别在培养板和弥散小室内培养 ,体内实验将 MSC+ BMP与人工珊瑚骨 (CHA)制成复合移植体 ,种植在大鼠背肌内 ,用形态学、组织化学和免疫组化方法观察其成骨效应。结果 MSC在体外 (培养板和弥散小室 )只形成软骨基质 ,在体内复合移植体 (CHA + BMP+ MSC)形成骨质 ,其成骨效应比对照组 A(CHA + MSC)和对照组 B(CHA )强。结论 复合移植体 (CHA+ BMP+ MSC)有可能被研制成本身具有成骨能力的人造骨材料。除 BMP外 ,移植体植入的机体和局部还存在其它诱导成骨的因子 ,进一步探讨这些因子的作用 ,将对研制这种理想的人造骨材料具有重要意义。
- 董书堃文剑明毕熲董愉
- 关键词：骨髓基质干细胞骨形成蛋白人造骨
- 口腔鳞癌中端粒酶活性和P53与Bcl-2的表达
- ＜正＞目的:测定口腔鳞癌组织端粒酶活性及P53和Bcl-2的表达,并探讨它们之间的关系。方法: 对31例口腔鳞癌新鲜活体组织分别用TRAP-银染法测定其端粒酶活性,用免疫组化S-P法检测 P53和Bcl-2的表达。结果:...
- 何一青张志光文剑明张萌吴惠茜
- 关键词：端粒酶P53BCL-2口腔鳞状细胞癌
- 文献传递
- 病理学实习课因人施教法的尝试被引量：7
- 1998年
- 在本科生的一个班进行了实习课因人施教的尝试 :采用学习类型分类法对学生进行分类 ,然后根据每个学生的不同学习类型在实习课中进行不同教学方法的施教。实验表明 ,实验班的学生实习课、理论课成绩和总成绩都比对照班高。实践提示 ,这种教学方法能针对不同的学习对象施教 。
- 文剑明谢丹韩安家林汉良钟思陶
- 关键词：实习课教学因人施教
- 5Aza-dC对肝癌细胞A431侵袭能力影响的体外实验研究
- 2006年
- 目的探讨5Aza-dC对肝癌细胞A431侵袭运动能力影响。方法用不同浓度5Aza-dC处理培养的A431细胞,观察其形态变化,并采用肿瘤细胞-基质黏附实验和细胞体外侵袭及运动实验检测癌细胞的黏附及侵袭能力变化。结果各不同浓度处理组细胞形态虽无显著变化,但其细胞-基质黏附能力、侵袭和运动能力均较对照组明显降低,差异有显著性(P<0.05)。结论5Aza-dC对肝细胞癌A431细胞的黏附侵袭等恶性生物学行为可起到抑制作用,可能为HCC的治疗开辟一条新途径。
- 周奇吕国丽苏才坤许峰峰邓亮甄宇洋文剑明
- 关键词：肝细胞肝肿瘤
- 端粒酶及蛋白亚单位在骨巨细胞瘤中的表达被引量：2
- 2005年
- 【目的】检测人端粒酶活性和端粒酶蛋白亚单位(human telomerase catalytic subunit,hTERT)基因在不同分级骨巨细胞瘤组织中的表达情况。【方法】收集骨巨细胞瘤样本并进行病理学分级,采用 TRAP 方法检测端粒酶活性,RT-PCR方法检测各样本中 hTERT 基因的表达,经薄层分析扫描进行定量分析。【结果】约80%的骨巨细胞瘤组织中有端粒酶活性表达,与表达组织学分级差异无统计学意义(P>0.05)。4例骨巨细胞瘤Ⅰ级样本不表达 hTERT 基因或表达极弱,13例骨巨细胞瘤Ⅱ级与3例骨巨细胞瘤Ⅲ级的样本有较高的 hTERT 基因表达水平,与骨巨细胞瘤Ⅰ级的表达差异有统计学意义(P<0.05),骨巨细胞瘤Ⅱ级与Ⅲ级的 hTERT 表达差异无统计学意义(P>0.05)。术后复发样本 hTERT 基因表达亦较其他样本明显增高。【结论】骨巨细胞瘤组织中可检测到端粒酶活性和 hTERT 基因,hTERT 基因表达量可为骨巨细胞瘤分级及生物学行为的预测提供参考。
- 王林董书堃文剑明
- 关键词：端粒酶基因表达
- 组化和免疫组化对易误诊的脂质储积性肌病和糖原储积性肌病鉴别诊断
- 目的脂质储积性肌病和糖原储积性肌病的常规病理形态十分相似,在临床和病理上容易引起误诊。本文探讨这2种肌肉疾病组织化学和免疫组化反应,寻找其鉴别诊断的形态差异。方法采用三磷酸腺苷(ATP)酶、还原性尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(...
- 张萌胡少为文剑明
- 关键词：组织化学免疫组织化学
- 文献传递
- 中国广东人CYP2F1基因遗传多态性研究被引量：4
- 2006年
- 目的检测广东地区正常人群和鼻咽癌患者中细胞色素P450酶系CYP2F1基因的多态性，并分析该基因遗传多态性与鼻咽癌易感性的关联。方法采用直接测序法检测40例鼻咽癌患者全血标本中CYP2F1基因全部10个外显子的多态性变化。对于等位基因频率较高的多态性位点，进一步采用错配聚合酶链反应．限制性片段长度多态性检测368例鼻咽癌患者和344名正常对照人群中该位点的等位基因频率。结果在40例鼻咽癌样本中，共检测到CYP2F1基因的35个单核苷酸多态性。其中，10个单核甘酸引起编码的氨基酸改变，1个移码突变，15～16bp之间插入C引起移码突变（15-16ins C），该等位基因频率为25％。但病例-对照分析却未能显示该位点突变与鼻咽癌易感的相关性（P〉0．05）。结论中国广东人的CYP2F1基因遗传多态性位点较多，但暂未发现与鼻咽癌的易感性关联的单一多态位点，多个多态性位点或不同基因多态性位点的协同互补作用可能才是鼻咽癌发生发展的关键影响因素。
- 姜桔红李智苏广贾卫华张如华余杏娟张萌文剑明曾益新
- 关键词：鼻咽肿瘤细胞色素P450遗传多态性
