张春青
- 作品数：3 被引量：10H指数：3
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 建立结核分枝杆菌抗原K6IFN-γ ELISPOT用于结核病辅助诊断被引量：4
- 2013年
- 目的:建立结核分枝杆菌抗原K6作为刺激源的IFN-γELISPOT检测方法,并初步评价该方法用于结核病辅助诊断价值。方法:结核病患者和非结核性肺部相关疾病患者外周血单核细胞(PBMC)分别加入预包被ELISPOT板对应孔,分别加入抗原K6、T-SPOT.TB试剂盒抗原A和B,每个PBMC样品设阴性对照孔和阳性质控孔。37℃、5%CO2培养20～24小时,弃细胞,依次加入酶标检测抗体、底物显色获得斑点。ELISPOT读板仪进行斑点计数和分析。结果:K6和T-SPOT.TB试剂盒检测敏感度分别为80.0%和85.9%、特异度分别为83.9%和73.2%,两者比较差异均无统计学意义。K6作为刺激原的IFN-γELISPOT诊断结核病阳性预示值为88.3%,阴性预示值为73.4%。结核病组,抗原B刺激PBMC分泌IFN-γ的细胞斑点数(SFC)平均值分别高于抗原A和K6(P=0.011和P=0.004),抗原A和K6刺激PBMC分泌IFN-γ的SFC平均值比较差异无统计学意义(P>0.05)。非结核性肺部相关疾病组,抗原A、抗原B和K6刺激PBMC分泌IFN-γ的SFC平均值两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:K6可作为结核病IFN-#ELISPOT诊断候选抗原之一。
- 蒋丽气黄香玉陈红兵李静何珂邵进士张春青何秀云
- 关键词：结核病ELISPOTIFN-Γ
- 复合佐剂 MF59／hBCG 对结核病蛋白疫苗免疫原性的影响被引量：3
- 2014年
- 目的：探讨复合佐剂[MF59和热灭活BCG（hBCG），MF59/hBCG]对结核分枝杆菌重组融合蛋白PstS1-LEP 免疫原性的影响。方法 BALB/c 小鼠分为6组，1组：MF59＋PstS1-LEP；2组：MF59/hBCG＋PstS1-LEP；3组：hBCG＋PstS1-LEP；4组：MF59；5组：PstS1-LEP；6组：hBCG。分别于第0、2、4周皮下免疫小鼠。末次免疫2周后解剖小鼠，PstS1-LEP体外刺激培养脾细胞和腹腔巨噬细胞。间接ELISA检测血清抗PstS1-LEP抗体，夹心ELISA检测培养上清细胞因子含量。结果1组IFN-γ、IL-1β、IgG、IgG1和IgG2a水平显著高于4组、5组和6组（P＜0.05），IL-2和IL-4水平显著高于4组和6组（P＜0.05）。2组IFN-γ、IL-1β、IL-12、IgG、IgG1和IgG2a水平显著高于4组、5组和6组（P＜0.05），IL-2水平显著高于4组和6组（ P＜0.05）。3组IL-4水平显著高于4组（ P＝0.05），IL-1β水平显著高于4组和5组（ P＜0.05），IgG水平显著高于4组和6组（ P＜0.05）， IgG1水平显著高于4组、5组和6组（ P＜0.05）。结论以PstS1-LEP为抗原，hBCG佐剂偏向诱导Th2型免疫反应，MF59佐剂诱导Th1/Th2型免疫反应，MF59和hBCG联合抑制脾细胞分泌IL-4，但增强巨噬细胞分泌IL-12。
- 张春青黄香玉邵进士李军丽宋庆德庄玉辉何秀云
- 关键词：结核分枝杆菌重组融合蛋白佐剂免疫原性
- MF59佐剂增强热灭活卡介苗的免疫原性被引量：4
- 2014年
- 目的 研究MF59佐剂[一种由角鲨烯、山梨糖醇三油酸酯（Span85）、吐温80和柠檬酸缓冲液组成的水包油乳剂]对热灭活BCG（hBCG）免疫小鼠诱导免疫应答的影响,验证自制MF59增强hBCG诱导细胞免疫反应的作用.方法 BALB/c （SPF级）小鼠分成A～G组,每组8只,于第0、2、4周皮下注射0.2 ml MF59、低剂量hBCG（0.025 mg/ml）、中剂量hBCG（0.25 mg/ml）、高剂量hBCG（2.5 mg/ml）、MF59＋低剂量hBCG、MF59＋中剂量hBCG、MF59＋高剂量hBCG.末次免疫2周,解剖小鼠.取小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞,并在体外经BCG PPD刺激培养,ELISA检测培养上清γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-1β、Ib-2、IL-4、IL-12含量,酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测脾细胞分泌IFN-γ、IL-2和IL-4的斑点形成细胞数（SFCs）.所有试验组的平均值比较采用一元方差分析、每两组平均值比较采用最小显著差异法,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 MF59作为高剂量hBCG的佐剂（G组）免疫小鼠,其脾细胞体外经BCG PPD刺激培养,分泌IFN γ的SFCs[（151.3±66.6）个]、IL-2的SFCs[（247.8±58.0）个]和IL-4的SFCs[（65.8±24.6）个]显著高于其他组[其他组IFN-γ、IL-2和IL-4的SFCs的最高平均值分别为（30.4±13.0）个、（37.1±10.8）个和（16.4±9.7个）]（分泌IFN-γ的SFCs比较,t=3.2,P=0.007;分泌IL-2的SFCs比较,t=3.6,P=0.003;分泌IL-4的SFCs比较,t=3.0,P=0.01）.MF59与不同剂量hBCG联合免疫小鼠,其腹腔巨噬细胞体外经BCG PPD刺激培养,培养上清IL-1β水平分别为（663.3±177.5） pg/ml、（813.8±193.4）pg/ml和（742.3±316.1）pg/ml,均显著高于A、B和C组[分别为（104.7±65.8）pg/ml、（82.9±54.8） pg/ml和（66.5±53.5） pg/ml]（E、F和G与A组比较：t=2.9,P=0.01;t=3.5,P=0.004;t=2.5,P=0.031.E、F和G与B组比较：t=3.1,P=0.007;t=3.6,P=0.003;t=2.6,P=0.024.E、F和G与C组比较：t=3.0,P=0.01;t=3.5,P=0.004;t=2.5,P=0.031）.A、C和G组小鼠的腹腔巨噬细胞体外经
- 黄香玉张春青李军丽邵进士何秀云
- 关键词：卡介苗细胞因子类
