张文东 作品数:70 被引量:164 H指数:7 供职机构: 云南省动物疫病预防控制中心 更多>> 发文基金: 云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目 云南省科技攻关计划 公益性行业(农业)科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
云南边境禽流感病原监测及H5N1亚型病毒进化分析 1.前言禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类的感染和疾病综合征。高致病性禽流感是由部分禽流感H5、H7亚型病毒侵袭家禽、野禽,引起高发病率、高死亡率的烈性传染病,并可感染人、马、猪等哺乳动物。A型流感病毒为分节段的单股R... 张富强 张文东 宋建领 齐绣花 赵焕云 吕粤 岳亮 张应国 范泉水文献传递 2013年云南省禽流感病毒H9N2亚型监测及其血凝素基因序列分析 被引量:4 2015年 为了解H9N2亚型禽流感病毒(AⅣ)的变异情况,本研究对2013年云南省16个地区的3 622份家禽临床样品进行AⅣ的鸡胚分离和RT-PCR检测,其中分离鉴定到97份H9N2亚型AⅣ分离株,并选取21个分离株进行HA基因测序及系统进化分析,结果表明:21份H9N2亚型AⅣ分离株的HA基因核苷酸序列同源性为86.0 %~99.4%,均属于欧亚分支的类A/Chicken/BeiJing/1/1994亚分支,而且又进一步划分为Ⅲ-1、Ⅲ-2两个小分支.其中Ⅲ-2分支为云南地区新出现的进化分支.氨基酸比对分析显示,测序的21个HA基因编码蛋白的裂解位点基序均具有低致病性病毒分子特征;与现用疫苗株相比,HA推导氨基酸序列中存在多个氨基酸位点差异;其中,Ⅲ-1与Ⅲ-2分支的AⅣ的HA氨基酸序列多个位点存在各自特有的点突变(氨基酸替换),这种变异具有一定的进化(亚)分支特异性.此外,HA基因多个受体结合位点氨基酸存在变异,其中234位氨基酸全部变为L,呈现了人流感受体结合特性;部分糖基化位点、抗原表位关键性氨基酸也存在变异. 胡媛媛 张文东 宋建领 刘庆亮 曾伟 王锐 郑锦玲 彭洁 保志鹏 张应国 范泉水 赵焕云 张富强关键词:禽流感监测 H9N2亚型 血凝素 云南省狂犬病病原监测及病毒遗传多样性分析 被引量:3 2013年 目的阐明2006~2011年期间云南省狂犬病病原分布状况和病毒基因结构特征。方法 2006~2011年期间,在云南省不同地点采集疑似狂犬病犬脑组织样品或唾液拭子样品,开展狂犬病病原监测;选择代表性阳性样品,对G基因、G-L间隔区进行克隆、测序,并与参考毒株序列进行比对及系统发育分析。结果云南省11个地州30个县检出狂犬病病毒阳性样品,云南省狂犬病病毒均属于血清Ⅰ型和基因Ⅰ型毒株,至少存在4个不同遗传(亚)谱系(ChinaⅠ-1、ChinaⅠ-2、ChinaⅠ-3、Thailand)、7种基因结构类型。结论云南省狂犬病病毒G基因和G-L间隔区具有遗传多样性,ChinaⅠ-1毒株已成为当前流行的优势毒株。 杜传海 张文东 胡挺松 赵焕云 张应国 范泉水 张富强 刘勇关键词:狂犬病病毒 糖蛋白 云南边境地区禽流感H5N1亚型病毒NS基因进化分析 被引量:1 2013年 目的阐明云南边境地区禽流感H5N1亚型病毒NS1、NS2基因变异特征及遗传进化关系。方法在云南边境地区采集境外家禽和野生鸟类棉拭子样品,经H5N1亚型特异性多重RT-PCR检测,阳性样品对病毒NS基因进行扩增,克隆至pMD18-T载体测序,获得NS1、NS2基因序列,并与已知参考毒株序列进行序列比对及系统发育分析。结果自1240份样品中检出H5N1亚型阳性样品71份,阳性率为5.72%;30份代表性阳性样品病毒NS基因测序获得17种序列,存在3个不同进化(亚)分支(Ⅰ-1、Ⅰ-2、Ⅱ);NS1/NS2基因与病毒血凝素(HA)基因呈现不同进化关系;NS1蛋白涉及核定位信号区、RNA结合区、效应区及其他致病性相关的关键性氨基酸位点存在替代或突变。结论云南边境地区H5N1亚型病毒NS1/NS2基因具有遗传差异,2010年以来NS基因进化分支Ⅰ-2、Ⅱ已成为当地流行的优势毒株。 肖雪 张文东 段博芳 赵焕云 刘庆亮 胡挺松 邱薇 冯子良 郑颖 范泉水 张应国 张富强关键词:禽流感病毒 H5N1亚型 牛奇异变形杆菌的分离鉴定及16SrRNA基因系统发育分析 被引量:8 2018年 目的:对发病断奶犊牛分离到的1株致病菌(KMD3)进行鉴定及16Sr RNA基因系统发育分析。方法:对分离菌株进行革兰氏染色、培养特性观察、生化试验、动物试验、药物敏感性试验及16S r RNA序列分析并构建系统发育树。结果:该菌形态、菌落形态、生化鉴定结果与奇异变形杆菌(Proteus mirabilis,PM)一致;接种小白鼠表现出较强的致病性;对氨基糖苷类抗生素等高度敏感,而对β内酰胺类大部抗生素和磺胺类抗生素耐药;分离株16S r RNA基因序列在Gen Bank进行Blast比对,与公布的序列同源高达99.0%,系统发育树中KMD3与13个代表菌株均属同一分支,且与鼠源(HQ169118.1)、牛源(JQ975907.1)、山羊源(KP401767.1)同源性达100%。结论:此次分离菌株KMD3是奇异变形杆菌,具有较强的致病性和耐药性,该菌是造成此次断奶犊牛发病的主要原因。 曾邦权 段博芳 郑欢莉 张应国 周建国 赵焕云 岳亮 戴玲玲 张文东关键词:RRNA 系统发育分析 禽流感病毒H5亚型特异性抗原捕捉ELISA 张文东关键词:禽流感病毒 2009年-2014年云南边境禽流感病毒H5N1亚型神经氨酸酶基因进化分析 被引量:2 2015年 为了解云南边境禽流感病毒H5N1亚型神经氨酸酶(NA)基因变异及进化特征,2009年-2014年期间在云南边境采集境外家禽和野生鸟类棉拭子样品1 500份,经禽流感H5/N1亚型病毒特异性多重RT-PCR检测,对阳性样品进行病毒NA基因扩增、纯化、克隆和测序,并与已知毒株和参考毒株进行序列比对及系统进化分析。结果从1 500份样品中检出禽流感病毒H5N1亚型阳性样品60份;60阳性样品病毒HA基因测序获得21种NA序列,可划分为4个不同进化分支。NA基因与HA基因呈现不同进化关系;云南边境毒株NA aa275位点未发生变异,因此变异毒株对神经氨酸酶抑制剂Oseltamivir(达菲)类抗病毒药物可能无抗性或耐药性;2009年-2014年期间云南边境H5N1亚型病毒NA间具有遗传差异,NA基因进化分支4已成为当地流行的优势毒株。 曾伟 刘庆亮 孔强 张文东 胡媛媛 胡挺松 赵焕云 段博芳 邱薇 范泉水 张应国 宋建领 张富强关键词:禽流感病毒 H5N1亚型 神经氨酸酶 基因 猪瘟、猪O型口蹄疫、高致病性猪蓝耳病疫苗联合免疫效果评价 被引量:14 2011年 采用猪瘟脾淋苗、猪O型口蹄疫多肽苗(或灭活苗)和高致病性猪蓝耳病灭活苗同时分点注射。对40—50日龄健康仔猪进行联合免疫,观察其免疫反应,并经正向间接血凝和ELISA试验评价其免疫效果。结果发现:三种疫苗联合免疫,临床上未发现严重的免疫反应,对猪瘟脾淋苗、猪O型口蹄疫多肽苗的免疫效果无明显的干扰或抑制作用,对高致病性猪蓝耳病和猪O型口蹄疫灭活苗免疫效果有显著的干扰或抑制作用。研究表明:三种疫苗联合免疫具有较高安全性,猪瘟脾淋苗、猪O型口蹄疫多肽苗可进行联合免疫,但高致病性猪蓝耳病灭活疫苗、猪O型口蹄疫灭活苗应单独使用。 黄文忠 徐志斌 吕粤 赵金葵 赵焕云 岳亮 张文东关键词:猪瘟 高致病性猪蓝耳病 联合免疫 云南省动物狂犬病病原监测及分子流行病学研究 构建云南省狂犬病病原诊断、监测预警技术及分子流行病学的研究平台,开展动物狂犬病病原监测预警及流行病学、分子流行病学研究,阐明了2006年-2011年期间云南省动物狂犬病病原时空分布、流行特点、病毒基因结构及变异特征,发现... 张富强 张文东 范泉水 张应国关键词:狂犬病 流行病学 文献传递 云南2008~2009年H9N2亚型禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶基因序列分析 被引量:4 2011年 禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)是病毒粒子表面抗原,是亚型划分的重要依据。从云南分离的H9N2亚型禽流感病毒感染鸡胚尿囊液中提取总RNA,采用特异性引物经RT-PCR分别扩增云南毒株10个HA和9个NA基因,纯化后克隆至pMD18-T载体,并对其进行测序。序列比对及系统发育分析结果表明:云南H9N2毒株HA基因核苷酸序列同源性为95.0%~99.7%;NA基因核苷酸序列同源性为86.2%~99.6%。在进化分枝中HA基因均属于欧亚分枝的类CBJ194亚分枝,与CBJ194的核苷酸序列同源性为92.0%~99.1%,NA基因属于CK/BJ/1/94和QaHKG1/97两个分枝。云南毒株HA裂解位点结构具有低致病性病毒分子特征;HA受体结合位点143、145、198和234位氨基酸存在变异,尤其234位氨基酸全部变为L,呈现了人流感受体结合特性。NA糖基化位点61~63、86~88部分毒株存在缺失,部分毒株在143~145位出现新的糖基化位点。 宋建领 叶丛华 田建国 张文东 赵焕云 吕粤 岳亮 邱薇 刘加茂 冯子良 张思东 范泉水 张应国 张富强关键词:禽流感病毒 H9N2亚型 血凝素 神经氨酸酶