宋传生
- 作品数：26 被引量：47H指数：5
- 供职机构：中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家林业科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学化学工程更多>>
- 苦楝丛枝植原体质粒的测定与分子特征被引量：4
- 2011年
- 【目的】测定苦楝丛枝植原体(CWB植原体)质粒并分析其分子特征。【方法】扩增苦楝丛枝植原体质粒片段并进行系统进化分析,预测质粒编码蛋白的跨膜区、亚细胞定位;以质粒pCWBFq repA为模板制备探针,利用Southern blot方法检测苦楝丛枝植原体及其他几种植原体的质粒。【结果】测定了苦楝丛枝植原体福清株系的一个质粒pCWBFq,该质粒全长4446 bp,A+T含量为73.5%,编码6个蛋白,其中pCWBFq P2-P5五个编码蛋白分别含有3、2、1和2个跨膜区,其信号肽(Singnal Peptide,SP)信号值分别为0.989、0.505、0.918和0.914。氨基酸序列相似性比较表明:pCWBFq RepA蛋白与其他植原体质粒RepA的同源性在9.6%-85.6%之间,而pCWBFq SSB蛋白与其他植原体质粒SSB的同源性在74.0%-89.4%之间。用pCWBFq repA探针检测到苦楝丛枝植原体中质粒的存在,同时也能够检测到16SrI组的泡桐丛枝植原体(PaWBNy),海南长春花绿变植原体(PeVHn),苦楝丛枝植原体福州株系(CWBFz)和桑树萎缩植原体濮阳株系(MDPy)中的质粒,但16SrV组的枣疯植原体北京株系(JWBBj)、樱桃致死黄化西昌株系(CLYXc)和重阳木丛枝南昌株系(BiWBNc)中未能检测到任何杂交信号。【结论】苦楝丛枝植原体质粒pCWBFq编码的6个蛋白中,除与质粒复制有关的RepA和SSB外,另外4个均为含有疏水结构的分泌蛋白或膜蛋白。植原体质粒的同源基因间存在程度不同的变异,其中repA基因在所有植原体质粒上均存在,但变异性相对较大,而ssb基因仅存在于16SrI组植原体质粒中,且变异相对较小。16SrI组的CWBFq、PaWBNy、PeVHn、CWBFz和MDPy中均存在数量和大小不同的质粒,而16SrV组的JWBBj、CLYXc和BiWBNc中或含有的质粒因与pCWBFq repA探针的同源性较低而不能被检测到。
- 宋传生林彩丽田国忠赵文军朱水芳牟海青胡佳续王曦茁郭民伟
- 关键词：质粒系统进化DNA杂交
- 四种植物植原体病害病原质粒全序列测定及分子特征
- 根据已发表植原体质粒序列设计引物,经两次PCR扩增,获得大小不同的两段DNA片段,测序后拼接得到了4个完整的环状质粒,分别是桑树萎缩植原体濮阳株系质粒(pMDPy)、长春花绿变植原体海南株系质粒(pPeVHn)、泡桐丛枝...
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- 泡桐丛枝植原体pPaWBNy-1-ORF5编码蛋白的原核表达和抗体制备
- 2013年
- 利用含泡桐丛枝植原体质粒pPaWBNy-1的3.0 kb片段的克隆为模板,PCR扩增pPaWBNy-1-ORF5的亲水性肽段编码区。目的片段连接到原核表达载体pET28a(+),重组质粒pET28a-ORF5-5转化大肠杆菌(Escherichia coli)Rosseta(DE3)感受态细胞,菌液处在对数生长期时(OD600=0.52),添加IPTG诱导5 h后收集菌体,提取蛋白并进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。用六聚组氨酸标签抗体进行Western blot检测,发现分子量约为15 kDa的含多聚组氨酸标签的目的蛋白得到表达。切胶回收融合蛋白,免疫德国大白兔以制备抗血清,间接ELISA法测定抗血清的效价约为1∶8 100。用制备的ORF5编码蛋白的抗血清进行Western blot分析,结果在带菌的介体昆虫茶翅蝽(Halyomorpha halys)中检测到大小约为17 kDa的特异蛋白条带,但在健康和感病泡桐(Paulownia sp.)及无菌茶翅蝽中均未检测到,由此推测pPaWBNy-1-ORF5蛋白与介体昆虫传播植原体有关。
- 耿显胜田国忠宋传生胡佳续林彩丽
- 关键词：泡桐丛枝病植原体茶翅蝽原核表达
- 泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶基因的克隆及序列分析
- 胸苷酸激酶(thymidylate,dTMP kinase or TMK),国际系统命名为:EC2.4.7.9,广泛存在于细菌、病毒和哺乳动物中,在ATP和Mg~(2+)参与的条件下,催化磷酰基从ATP转移到dTMP形成...
- 宋传生胡佳续林彩丽耿显胜田国忠
- 北京怀柔板栗黄化皱缩病原鉴定
- 中国板栗(Castanea mollissima BL.)属壳斗科(Fagaceae)栗属(Castanea Mill),是我国重要的经济树种之一。1990年首先在怀柔区马道峪种植的板栗上发现一种叶部病害,表现症状为叶片...
- 林彩丽朱晓清张国珍李志朋田国忠宋传生胡佳续周涛范在丰王合陶万强
- 泡桐丛枝植原体质粒pPaWBNy-1 ORF5编码蛋白的原核表达
- ＜正＞质粒（Plasmid）是能够稳定遗传的染色质外DNA元件,通常存在于细菌和真菌细胞中。典型的质粒由必要区及非必要区组成,必要区编码与质粒存活、独立复制和不相容性等相关的基因,具有高度特异性。非必要区主要编码影响宿主...
- 耿显胜林彩丽田国忠胡佳续宋传生
- 关键词：泡桐丛枝病植原体质粒原核表达
- 文献传递
- 北京市丰台区主栽枣品种对枣疯病抗性试验被引量：6
- 2011年
- 采用以感染枣疯病的枣树作砧木嫁接健康休眠接穗的方式,对丰台区8个主栽枣品种进行了抗病性鉴定,并应用DAPI荧光显微方法和PCR方法对接穗进行了枣疯病植原体检测。结果表明,8个供试品种均能被感染,并表现丛枝症状,对枣疯病植原体均无免疫性,其中金芒果枣和冬枣为易感病品种,尜尜枣和京枣39为相对抗性品种。
- 赵京芬胡佳续宋传生朱京驹田国忠
- 关键词：枣疯病抗病性
- 植原体病害诊断与病原检测和鉴定技术与方法评价
- 本文就当前植原体病害的诊断、病原检测和鉴定的技术与方法进行了系统的评估和分析，主要包括病害症状鉴别诊断、电子显微镜观察病原形态、抗生素处理、嫁接传病和介体昆虫传病、组织学和生物化学技术、植原体抗体制备与血清学测定技术、核...
- 田国忠赵文军朱水芳林彩丽宋传生牟海青胡佳续
- 关键词：植原体病害病原检测
- 北京怀柔区板栗黄化皱缩病害调查被引量：7
- 2011年
- 在怀柔板栗主要产区对中国板栗黄化皱缩病进行了2 a的系统调查,结果为发病村占94.7%2,009年和2010年发病地块依次为34.6%和35.7%,发病株分别为3.58%和3.77%,平均病情指数分别为0.0147和0.0149。病害分为发病初期、发病盛期、滞留期、稳定期和落叶期5个阶段,用PCR扩增16S rRNA基因检测植原体,检出率81.2%;在感病板栗林内采集到蝽类、叶蝉和栗斑蚜共11种刺吸式昆虫。
- 朱晓清林彩丽李志朋田国忠宋传生王合
- 关键词：植原体介体昆虫RDNA
- 木本植物黄化类植原体的检测鉴定及苦楝丛枝植原体质粒的测定
- 中国植物种类资源丰富，植原体病害频发，过去被认为由生理性病害造成的许多黄化类病害目前已发现是由植原体引起，有些植原体病害已给林木生产和林业经济带来很大的危害和损失。木本植物黄化类植原体病害与典型的丛枝类植原体病害的很大不...
- 宋传生
- 关键词：植原体病害质粒DNA系统进化树
