周栋
- 作品数:33 被引量:27H指数:3
- 供职机构:中国农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:山东省优秀中青年科学家科研奖励基金中国博士后科学基金山东省博士后创新项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 应用重组MSG1蛋白检测猪附红细胞体抗体的ELISA检测方法的建立被引量:3
- 2011年
- 【目的】针对猪附红细胞体g1基因编码的MSG1表面粘附蛋白(rMSG1)和以此蛋白制备的多克隆抗体,建立相应的ELISA方法进行猪附红细胞体的临床检测,并进行效果评估,以获得一种猪附红细胞体感染的有效检测手段。【方法】将MSG1-pET28c_E.coli BL21菌株,在适宜的条件进行诱导表达,经菌体破碎、层析等步骤获取纯化的目的蛋白。以纯化的rMSG1制备免疫原接种小鼠,获取符合要求的多克隆抗体。以rMSG1和多克隆抗体建立ELISA检测方法,分析其敏感性、特异性、符合性和重复性。【结果】接种后获得了符合效价的抗血清;基于rMSG1的间接ELISA方法临床检测猪附红细胞体感染率为46.25%,其中阳性样本对已知小鼠抗血清有明显的阻断作用,并且与其它一些抗原无交叉反应;此ELISA方法的特异性和敏感性分别可达到97.06%和95.92%,较间接血凝试验(IHA)有更高的检出率。【结论】结果显示MSG1具有良好的抗原性,建立的ELISA方法具有较高的敏感性、特异性、符合性和可重复性,在临床检测中可以取得理想的效果。
- 刘永夏刘建柱成子强周栋王振勇刘海涛王林柴同杰
- 关键词:猪附红细胞体ELISA
- 母猪产后瘫痪的防治
- 产后瘫痪又称产后风,是母猪分娩后突发或渐进性发生的一种以知觉丧失和四肢瘫痪为主要特征的急性低血钙症。产后瘫痪是农村散养户和集约化猪场中常见到的一种疾病,它并非是一种独立的疾病,而是由多种因素所引起的一种症状表现,主要发生...
- 周栋刘海涛周川刘永夏
- 关键词:母猪产后瘫痪急性低血钙症
- 猪附红细胞体ORFs基因合成、表达及鉴定
- 猪附红细胞体(Mycoplasma suis,M.suis)在伯杰氏手册中被划分为立克次氏体,但目前国际上根据其16sRNA序列,普遍认为应属于支原体。M.suis是一种寄生于猪红细胞上的微生物,能够引起猪的溶血性贫血、...
- 周栋
- 关键词:猪附红细胞体基因序列蛋白功能基因合成
- 猪附红细胞体ORF4基因片段的人工合成及基因表达
- 2011年
- 目的本研究通过人工合成猪附红细胞体ORF4基因,使其在大肠杆菌中高效表达。方法选择GenBank注册的AJ504999序列的ORF4基因,应用Graphical Codon Usage Analyser选择大肠杆菌偏爱的密码子,改变基因的transl_table,设计并合成3对寡核苷酸链,用PCR-based accurate synthesis(PAS)法进行人工合成。经测序正确后,连接到表达载体PET28a,获得重组表达质粒PET28a/ORF4,导入大肠杆菌BL21(DE3),在30℃,IPTG终浓度1mmol/L的条件下诱导表达,经SDS-PAGE分析,在11 kDa附近出现目的片段。结果结果表明ORF4基因在大肠杆菌中能够得到高效的表达,通过生物信息学软件分析表明,该蛋白存在19个配基结合位点;在21~22位氨基酸可能存在信号肽裂解位点;为胞内蛋白,没有糖基化位点。结论 ORF4基因能够在大肠杆菌中表达,推测其在M.suis蛋白质的形成,M.suis的生物功能方面有着重要的作用。
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- 关键词:猪附红细胞体
- 猪传染性水疱病的流行机制及预防控制被引量:3
- 2010年
- 猪水疱病病毒感染猪体后,在机体内随血液、淋巴液迅速扩散至其他组织器官,并通过病猪的分泌物、粪便、水疱皮等排出大量病毒,进而借助传播媒介引起疫病的流行,给养猪业造成较大的危害,通过对其病原特点、流行病学特征,总括了猪传染性水疱病的流行概况,并根据本病的发病及流行机制对本病的控制给出了相应的防控措施。
- 刘永夏周川周栋刘建柱
- 关键词:猪水疱病
- 猪附红细胞体重组MSG1蛋白ELISA检测方法的建立
- 目的:针对猪附红细胞体gl基因编码的MSG1表面粘附蛋白(rMSG1)和以此蛋白制备的多克隆抗体,建立相应的ELISA方法进行猪附红细胞体的临床检测并进行效果评估,以获得一种猪附红细胞体感染的有效检测方法。方法:将MSG...
- 刘永夏刘建柱成子强周栋王振勇刘海涛王林柴同杰
- 关键词:附红细胞体
- 乳酸杆菌表层蛋白生物学功能研究进展
- 乳酸杆菌表层蛋白有调控肠上皮细胞生物学功能的作用,目前已有相关研究探究此问题。现结合相关研究,在乳酸杆菌表层蛋白结构、分离鉴定、生物学效价,包括促进乳酸杆菌黏附、维持肠道黏膜屏障、调节免疫应答等方面做一基本综述。
- 张伟杨金彩周栋朱要宏王九峰
- 关键词:乳酸杆菌肠上皮细胞生物学效价
- 文献传递
- 猪沙门氏菌病易淆疾病的鉴别诊断被引量:4
- 2010年
- 猪沙门氏菌病是危害养猪业发展的重要疾病之一,为了对该病能够做出快速、准确地诊断,对该病的发生能够做到及时发现、及时治疗,主要从该病以及与之有类似症状的疾病的流行病学、临床症状、病理变化等方面的区别进行论述。
- 刘海涛周栋刘建柱
- 关键词:沙门氏菌
- 猪传染性水疱病的流行机制及预防控制
- 疱病病毒感染猪体后,在机体随血液、淋巴液迅速扩散至其他组织器官,并排出大量病毒,进而借助其他媒介引起疫病的流行,给养猪业造成了不小的危害,现通过对其病原特点、流行病学特征的研究,总括了猪水疱病的流行概况,并根据本病的发病...
- 刘永夏刘海涛周栋陈甜甜周川
- 关键词:猪水疱病流行病学病原特征
- 猪附红细胞体MSG1部分基因片段的全基因合成及克隆表达
- 人工合成猪附红细胞体MSG1基因的编码序列,提高目的基因在大肠杆菌中的高效表达。根据GenBank注册的AM407404的544-942氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成了12条寡核苷酸片段.用PAS方法,...
- 陈甜甜刘建柱周栋柴同杰
- 关键词:猪附红细胞体克隆表达