吴文川 作品数:90 被引量:273 H指数:10 供职机构: 复旦大学附属中山医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市基础研究重大(重点)项目 上海市浦江人才计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
国外胰腺移植现状 2009年 胰肾联合移植是治疗1型糖尿病伴终末期肾功能衰竭的有效方法。根据美国器官分配网络(United Network for Organ Sharing,UNOS)和国际胰腺移植登记中心(International Pancreas Transplant Registry,IPTR)(http://www.OPTN.org)的资料,至2004年,全球胰腺移植已〉25000例。目前在欧美胰腺移植技术非常成熟,以德国波鸿的鲁尔大学Knappschafts医院外科为例,12年间即施行了340例胰腺移植。本文将近几年胰腺移植的主要进展作一简要回顾。 吴文川 楼文晖关键词:胰腺 胰腺癌MUC1-VNTR核酸疫苗的构建和体外转染 被引量:10 2005年 目的探索胰腺癌MUC1VNTR核酸疫苗的构建,以进一步研究对胰腺癌的治疗作用。方法首先对VNTR编码基因进行了重组设计,氨基端插入人单核细胞趋化蛋白Ⅰ信号肽基因序列,起始码前插入KOZAK促真核翻译序列。将人工合成的重组人VNTR基因定向克隆入真核表达载体pcDNA3.1/Mychis(+)A质粒的MCS中。将通过测序鉴定的含有准确插入序列的pcDNA3.1VNTR/Mychis(+)A重组质粒转染COS7细胞,进行体外转染实验和Westernblot检测VNTR在细胞内外的表达。结果自转化平板筛选的阳性克隆通过测序鉴定,pcDNA3.1VNTR/Mychis(+)A重组质粒含有完整的阅读框架和目的基因。重组质粒可在COS7细胞内外表达VNTR,以胞内为主。所表达的VNTR分子量比人工合成的VNTR多肽大。结论自行构建的胰腺癌MUC1VNTR核酸疫苗序列准确,可在哺乳动物细胞中表达VNTR。 吴文川 靳大勇 秦新裕 楼文晖 王单松 倪晓凌 吴肇汉关键词:胰腺癌 核酸疫苗 MUC1 体外转染 VNTR 人单核细胞 新型胰腺癌MUC1 DNA疫苗的优化构建及体外转染研究 2013年 目的优化构建新型胰腺癌MUC1 DNA疫苗。方法目的基因增加重复序列可变数目串联重复序列(VNTR),并分别插入乙型肝炎病毒(HBV)核心抗原基因(C1-144)和/或小鼠白细胞介素(IL)-18基因序列,插入真核表达载体pIRES2-EGFP,构建成优化重组质粒,酶切及测序鉴定。4种优化重组质粒分别体外转染2×10^6个293T细胞和Panc-02细胞,观察转染后48h后绿色荧光表达,评估转染效率。收集转染后的细胞,裂解后Western blot检测目的基因的表达,验证各优化重组质粒在真核细胞中的表达。结果双酶切鉴定证实了pIRES2-EGFP—A—B插入了1100bp大小片段,pIRES2-EGFP—A—C和pIRES2-EGFP—A—B—C重组质粒都插入了1200bp大小片段,分别与目的基因大小一致。在转染转染后48h后,293T和Panc-02均可见绿色荧光。Western blot检测可见在Panc-02细胞中pIRES2-EGFP-A—B质粒、pIRES2-EGFP—A—B—C质粒均可表达乙肝病毒核心抗原C1—144,pIRES2-EGFP—A—C质粒、pIRES2-EGFP—A—B-C质粒均可表达小鼠IL-18(mIL-18)。在293T细胞中,pIRES2-EGFP—A质粒、pIRES2-EGFP—A—B质粒、pIRES2-EGFP—A—C质粒、pIRES2-EGFP—A—B—C质粒均表达VNTR。结论优化构建的4个重组质粒均可在真核细胞中表达插入的目的抗原。 吴文川 靳大勇 楼文晖 戎叶飞 王单松 秦新裕关键词:胰腺癌 DNA疫苗 细胞转染 MUC1-VNTR基因修饰树突细胞对胰腺癌细胞株体外杀伤效应的研究 被引量:1 2008年 目的:通过体外杀伤试验,研究转染黏液蛋白核心肽-连续重复序列(MUC1-VNTR)基因的树突细胞(DC)诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)对人胰腺癌细胞株的特异杀伤效应。方法:选取人淋巴细胞A抗原(HLA-A2)阳性健康人外周血单个核细胞,体外诱导成熟DC,脂质体介导MUC1-VNTR基因转染入DC(DC-VNTR),以转染空质粒pcDNA3.1(DC-pcDNA3.1)及Lipofectamine处理之DC(DC-Lipo)作为对照,用Western印迹法检测MUC1-VNTR的表达,体外刺激同源T细胞,Elispot检测DC-VNTR诱导分泌IFN-γ和Gramzyme B之CTL能力,细胞毒试验检测DC-VNTR诱导的CTL对Capan2和AsPC-1胰腺癌细胞株的杀伤作用。结果:Western印迹法检测到MUC1-VNTR的表达;DC-VNTR诱导的分泌IFN-γ、Gramzyme B的CTL数高于用DC-pcDNA3.1及DC-Lipo作对照者(P<0.05);DC-VNTR诱导的CTL对HLA-A2、MUC1均阳性的Capan2细胞有显著杀伤效应,且显著高于DC-pcDNA3.1组及DC-Lipo组(P<0.05),该CTL对HLA-A2阴性、MUC1阳性的AsPC-1细胞无明显杀伤效应。结论:以MUC1-VNTR基因转染的DC可以诱导具特性的CTL,并能特异地杀伤Capan2胰腺癌细胞株。 戎叶飞 靳大勇 吴文川 楼文晖 秦新裕关键词:树突细胞 基因 MUC1 胰十二指肠切除术后肠内营养与肠外营养治疗费用的比较 被引量:11 2002年 目的 从临床经济学角度比较胰十二指肠切除术后肠内营养与肠外营养治疗费用的差别 ,评价早期肠内营养支持作用。方法 回顾分析 1999年 7月至 2 0 0 1年 6月间 32例胰十二指肠切除术后早期营养支持临床资料 ,其中早期肠内营养 (EEN)组 11例 ,术后第 1天开始EEN支持 ;肠外营养组 (TPN) 2 1例。结果 术后平均住院日EEN组较TPN组为短 (2 5 0天vs 36 3天 ,P <0 0 1) ,且平均费用明显少于TPN组 (2 836 8元vs 40 494元 ,P<0 0 1)。并发症发生率EEN组虽少于TPN组 ,但无统计学差异 (P >0 0 5 )。费用效果分析及敏感性分析提示EEN较TPN优越。结论 胰十二指肠切除术后EEN支持可减少并发症 。 吴文川 靳大勇关键词:胰十二指肠切除术 空肠造口术 肠内营养 营养支持 胰腺粘液性囊性肿瘤诊治体会 被引量:11 2006年 目的:探讨胰腺粘液性囊性肿瘤的诊断和治疗。方法:对2000年6月-2005年6月复旦大学附属中山医院收治的 12例胰腺粘液性囊性肿瘤的临床资料进行回顾性分析。结果:胰腺粘液性囊性肿瘤好发于女性,无特征性临床表现。B 超和CT对胰腺粘液性囊腺瘤的诊断正确率为89%(8/9),而囊腺癌的诊断正确率分别为33%(1/3)和67%(2/3)。本组 9例粘液性囊腺瘤中,胰十二指肠切除术4例,远端胰腺切除术5例;3例囊腺癌中行扩大的胰十二指肠切除术1例,远端胰腺切除术2例。本组均获随访,1例囊腺癌因复发转移于术后11个月死亡,其余均存活,无复发。结论:B超和CT是胰腺粘液性囊性肿瘤主要的影像学检查方法。胰腺粘液性囊性肿瘤因有恶变倾向及临床不能鉴别其良恶性,需手术治疗。胰腺粘液性囊腺瘤手术切除后可获治愈,囊腺癌术后疗效也较满意。 王单松 靳大勇 楼文晖 许雪峰 匡天涛 倪晓凌 吴文川 纪元关键词:囊腺瘤 囊腺癌 胰腺癌MUC1-VNTR核酸疫苗的实验研究 该文以VNTR为靶抗原构建胰腺癌核酸疫苗,探索疫苗所诱生的免疫应答,以进一步研究疫苗对胰腺癌的治疗作用.实验共分为三部分:第一部分 胰腺癌MUC1-VNTR核酸疫苗的构建和体外转染实验;以人胰腺癌肿瘤相关抗原MUC1的最... 吴文川关键词:胰腺癌 核酸疫苗 MUC1 VNTR GM-CSF 一种化疗相关基因表达特征在预测胰腺癌预后中的应用 本发明涉及一种化疗相关基因表达特征在预测胰腺癌预后中的应用,属于生物医药技术领域。本发明提供了一种化疗相关基因表达特征在预测胰腺癌化疗反应应答、免疫细胞浸润及预测模型中的应用,通过检测胰腺癌患者术后肿瘤组织中BCHE,A... 浦宁 吴文川 陈强达 张继成 殷瀚霖 楼文晖GM-CSF增强胰腺癌MUC1-VNTR核酸疫苗免疫效果的研究 被引量:3 2006年 目的研究 GM-CSF 作为免疫佐剂对胰腺癌 MUC1-VNTR 核酸疫苗免疫效果的增强作用。方法 45只 C57BL/6小鼠随机分3组,在胫前肌注射100μg/100μl质粒 DNA 生理盐水溶液(VG 组接种 pcDNA3.1-VNTR/Myc-his(+)A 质粒联用 rmGM-CSF,V 组单纯接种 pcDNA3.1-VNTR/Myc-his(+)A 质粒,G 组单纯接种 rmGM-CSF)进行免疫接种。4周后加强免疫1次,6周后取血清 ELISA 法测抗体,取脾细胞悬液体外以 VNTR 合成肽特异刺激,6d 后进行杀伤试验。结果VG 组小鼠脾细胞 CTL 的特异性杀伤率显著高于 V 组(P<0.01)和 G 组(P<0.01),表明 GM-CSF增强了疫苗所诱发的 CTL 应答。而 CTL 对未经 VNTR 合成肽孵育的靶细胞 EL4-VNTR^-杀伤较低(P<0.01),VU 3C6可抑制 CTL 对经 VNTR 合成肽孵育的靶细胞 EL4-VNTR^+的杀伤活性(P<0.01),表明具有 VG 组诱生的 CTL 应答依然保持 VNTR 特异性。VG 组小鼠血清抗 VNTR 抗体等效浓度(3119.0±110.6)μg/ml 高于Ⅴ组(2323.5±238.3)μg/ml 和 G 组(2023.9±169.0)μg/ml,差别极为显著(P<0.01)。结论 GM-CSF 可增强自行构建的胰腺癌 MUCl-VNTR 核酸疫苗所诱生的 VNTR 特异的 CTL 应答和抗体应答。 吴文川 靳大勇 秦新裕 楼文晖 王单松 倪晓凌 吴肇汉关键词:胰腺肿瘤 核酸疫苗 MUC1 GM-CSF 局部进展期胰腺癌综合治疗一例 2022年 胰腺癌恶性程度高,预后差,5年生存率低于10%,预计到2030年将成为全球第二大致死癌症[1-3]。80%~85%的患者在确诊时已发展为不可切除或转移阶段,丧失了手术机会,即使施行了根治性切除,术后5年生存率也仅仅10%~15%,绝大多数患者均要面临术后复发转移的现实困境[2]。因此,不管确诊时胰腺癌是否可切除,均需要综合治疗。不同个体在疾病进展过程中也要面临各种状态并需要进行治疗决策。 张继成 赵过超 张磊 施晨晔 吴莉莉 王明亮 张轶群 刘凌晓 纪元 周宇红 王单松 楼文晖 吴文川关键词:胰腺肿瘤 肿瘤转移