冼华
- 作品数:17 被引量:142H指数:5
- 供职机构:重庆医科大学中医药学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市渝中区科技计划项目更多>>
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- 雷公藤甲素对大鼠坐骨神经冷保存后细胞活性及异体移植后神经再生的影响被引量:1
- 2018年
- 目的探讨雷公藤甲素(T10)对冷保存大鼠坐骨神经生物活性和异体移植后神经再生的影响。方法取对数生长期施万细胞(SCs),CCK-8检测1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L T10溶液对SCs增殖的影响。取Sprague-Dawley大鼠双侧坐骨神经15 mm,分别在含0 mol/L、1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L T10的DMEM液中,4℃或37℃放置24 h (n=6),Western blotting检测神经生长因子(NGF)、神经胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达。另取大鼠坐骨神经15 mm,随机分成新鲜神经组(A组, n=30)、DMEM保存组(B组, n=30)、T10保存组(C组, n=30)、T10预处理后DMEM保存组(D组, n=30)、T10预处理后T10保存组(E组, n=30),4℃保存4周,Calcein-AM/PI双染激光共聚焦显微镜观察、流式细胞术检测神经活细胞、死细胞数,Western blotting检测主要组织相容性复合体-Ⅰ(MHC-Ⅰ)、MHC-Ⅱ、细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)表达。用上述坐骨神经修复Wistar大鼠坐骨神经10 mm缺损(A′组、B′组、C′组、D′组、E′组, n=10),设立同系移植新鲜组(F′组, n=10)。术后16周,电生理检测肌肉复合动作电位(CMAP)和运动神经传导速度(MNCV);取移植段神经,观察神经纤维数和神经超微结构。结果 SCs在浓度为1×10-9~1×10-7mol/L T10溶液下,细胞增殖与对照组无显著性差异(P> 0.05)。各浓度T10溶液下,大鼠坐骨神经各神经营养因子表达均37℃明显高于4℃;相同温度时,1×10-8mol/L组各神经营养因子表达均高于其他浓度组(P <0.05)。大鼠坐骨神经冷保存4周后,与B、C、D组相比,E组神经活细胞数量多,MHC-I、MHC-II、ICAM-1表达降低(P <0.05)。移植术后16周,E′组CMAP、MNCV、再生有髓神经纤维数量均优于A′、B′、C′、D′组(P <0.05),E′、F′组有髓神经纤维数量多,粗细均匀,分布广泛,髓鞘厚。结论一定浓度T10体外能诱导大鼠坐骨神经神经营养因子表达,�
- 汪一黄英如张松李子健曾欢欢冼华
- 关键词:异体神经移植冷保存损伤雷公藤甲素神经再生坐骨神经
- 电针对失神经骨骼肌萎缩及纤维化的影响被引量:23
- 2016年
- 目的:观察不同强度电针对失神经支配骨骼肌萎缩及肌纤维化的影响。方法:32只SD大鼠随机等分为4组(n=8):A组(模型组)、B组(0.5m A电针组)、C组(1.0m A电针组)、D组(1.5m A电针组)。切断坐骨神经干造成失神经支配腓肠肌模型,术后1天,B、C、D组术侧分别给予相应强度电针(针刺"足三里"和"承山")治疗,每次治疗10min,隔天1次,每周3次,共治疗4周,A组不行治疗。术后8周,测定术侧腓肠肌湿重比,Masson染色测定腓肠肌结缔组织截面积率、肌纤维直径和截面积,Western blot检测转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、Bcl-2和Bax表达,透射电镜观察腓肠肌超微结构。结果:A组与B、C、D组间,D组与B、C组间腓肠肌湿重比差异均有显著性意义(P<0.05),但B、C组间差异无显著性意义(P>0.05)。A组与B、C、D组间,以及D组与B、C组间结缔组织截面积率差异均有显著性意义(P<0.05),但B、C组间差异无显著性意义(P>0.05)。A组与B、C、D组间,以及B、C、D组间肌纤维直径和截面积差异均有显著性意义(P<0.01)。A组最高、D组最低,A组与B、C、D组间,以及B、C、D组间TGF-β1、CTGF蛋白表达差异均有显著性意义(P<0.01)。Bcl-2蛋白表达,A组最低、D组最高,而Bax蛋白表达,A组最高、D组最低;Bcl-2/Bax比值A组最低,B、C、D组依次升高,且A组与C、D组间,以及B、C、D组间差异均有显著性意义(P<0.01)。透射电镜显示,A组肌丝排列紊乱、溶解严重,Z线断裂,线粒体空泡化;B、C、D组肌丝排列基本整齐,肌丝溶解、Z线断裂较轻,B组可见线粒体肿胀、空泡化,但轻于A组。结论:电针可减轻失神经骨骼肌萎缩程度,其机制可能与抑制靶肌肉结缔组织增生,调节Bcl-2、Bax蛋白表达有关。
- 吴珍元黄英如冼华邓熊高伟峰米庆高张军孙永博
- 关键词:失神经骨骼肌萎缩电针结缔组织增生细胞凋亡
- 也从久病成瘀谈无症之瘀
- 2004年
- 瘀血证是临床常见证,久病成瘀已为历代医家大量临床实践证明。久病提示疾病的漫长过程,成瘀是其漫长过程的必然结果, "无症之瘀"是古今中医的共识;而且"无症之瘀"有据可推、有征可查、有证可鉴、有药可治;明确"无症之瘀"的概念,并进行理论上的系统性研究,升华为中医基本理论,注入到教学中,成为指导临床实践的依据具有积极意义。
- 洪蕾冼华
- 关键词:中医诊断学
- 人参皂甙Rb1对玻璃化保存坐骨神经异体移植后神经再生的影响被引量:4
- 2013年
- [目的]探讨人参皂甙Rb1(Ginsenoside Rb1,G-Rb1)对大鼠坐骨神经玻璃化保存及异体移植后神经再生的影响。[方法]Wistar大鼠坐骨神经在0、50、100、200μg.L-1G-Rb1玻璃化液(A、B、C、D组)中,-20℃保存4周,透射电镜观察超微结构,TUNEL法检测细胞凋亡。用玻璃化保存后的坐骨神经修复对应组SD大鼠(A’、B’、C’、D’组)坐骨神经10 mm缺损。术后4、8、14周坐骨神经功能指数观察,术后16周电生理检测、再生神经组织学观察及靶肌肉运动终板观察。[结果]坐骨神经玻璃化保存4周后,A组神经脱髓鞘严重,施万细胞质膜和基底膜破坏,B、C、D组髓鞘轻微变性,施万细胞质膜和基底膜保持完整;细胞凋亡B、C、D组轻于A组,C、D组轻于B组(P<0.05),C、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后不同时间坐骨神经功能指数,16周运动神经传导速度、动作电位潜伏期及波幅,运动终板数量、面积、着色,B’、C’、D’组与A’组间,C’、D’组与B’组间,差异均有统计学意义(P<0.05),而C’、D’组间差异无统计学意义(P>0.05)。透射电镜显示,A’、B’组再生有髓神经纤维较少、髓鞘较薄,结缔组织增生明显,C’、D’组再生有髓神经纤维较多、髓鞘厚,无明显结缔组织增生。[结论]G-Rb1对玻璃化保存大鼠坐骨神经具有保护作用,并能促进异体移植后神经再生。
- 黄英如蒋电明冼华黄剑陈增刚王雷
- 关键词:人参皂甙RB1异体神经移植神经再生
- 人参皂甙Rb1冷保存大鼠坐骨神经修复周围神经缺损的实验研究被引量:3
- 2015年
- [目的]探讨人参皂甙Rb1(Ginsenoside Rb1,G-Rb1)冷保存大鼠坐骨神经对同种异体移植后受体神经再生的影响。[方法]3个月龄SPF级雄性Wistar大鼠和SD大鼠分别作为供体和受体。切取供体大鼠双侧坐骨神经15 mm长,随机在G-Rb1溶液(0、50、200 mg·L-1)中4℃保存4周(A4、B4、C4组)和6周(A6、B6、C6组),Western-blot检测供体神经Bcl-2表达,Calcein-AM染色LSCM观察冷保存6周供体神经生物活性。用冷保存6周的供体神经(A6、B6、C6组)修复对应的受体(A、B、C组)坐骨神经10 mm缺损,术后分期行大体观察、坐骨神经功能指数检测,第20周行电生理检测、再生神经组织学观察。[结果]Western-blot检测Bcl-2表达,冷保存4周时,B4组高于A4、C4组(P<0.05),冷保存6周时,B6、C6组高于A6组,且B6组高于C6组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Calcein-AM染色LSCM观察,B6、C6组荧光强度与A6组比较,B6组与C6组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。移植术后各期坐骨神经功能指数,20周电生理检测、再生有髓神经纤维数目、髓鞘厚度,B、C组与A组比较,B组与C组比较,差异有统计学意义(P<0.05);术后20周透射电镜显示,A组再生有髓纤维少、髓鞘薄,结缔组织增生明显,B、C组有髓纤维较多、髓鞘厚,无明显结缔组织增生。[结论]G-Rb1对冷保存大鼠坐骨神经具有保护作用,G-Rb1冷保存的坐骨神经能改善同种异体移植后神经再生效果。
- 李沿江黄英如王雷冼华吴珍元余学东
- 关键词:人参皂甙RB1冷保存施万细胞同种异体神经移植神经再生
- 中医“治未病”的理论研究
- "治未病"的思想首现于春秋战国时期的《黄帝内经》。《素问·四气调神大论》所谓:"圣人不治已病治未病,不治已乱治未乱,此之谓也。夫病已成而后药之,乱已成而后治之,譬犹渴而穿井,斗而铸锥,不亦晚乎!"。唐代医家孙思邈把疾病分...
- 洪蕾冼华
- 关键词:亚健康状态养生学
- 文献传递
- 热休克蛋白70对冷冻保存大鼠坐骨神经细胞活性及异体移植后神经再生的影响
- 2021年
- 目的·探讨热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)对冷冻保存大鼠坐骨神经细胞活性及异体移植后神经再生的影响。方法·将SD大鼠双侧坐骨神经置于DMEM培养基中,分别于37、42、45℃体外预处理1 h(记为37℃组、42℃组、45℃组),并设置未经热应激处理的对照组(Con组),每组神经36根。蛋白质印迹(Western blotting)检测各组坐骨神经中HSP70的表达。将上述4组神经于液氮冷冻保存液中保存4周,Western blotting检测主要组织相容性复合体Ⅰ(major histocompatibility complex classⅠ,MHC-Ⅰ)、MHC-Ⅱ和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9的表达,流式细胞术检测坐骨神经活细胞存活情况。取冷冻保存的坐骨神经,于37℃、5%CO_(2)培养7 d,Western blotting检测脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)的表达。用上述4组冷冻保存4周的坐骨神经和SD大鼠新鲜坐骨神经(Fresh组),移植至Wistar大鼠对应坐骨神经10 mm缺损处对其进行修复(分别为37℃-Allo组、42℃-Allo组、45℃-Allo组、Con-Allo组、Fresh-Allo组),并设置Wistar大鼠坐骨神经同系移植组(Fresh-Iso组),每组大鼠6只。移植术后20周,电生理检测肌肉复合动作电位(compound muscle action potential,CMAP)和神经传导速度(nerve conduction velocity,NCV),甲苯胺蓝染色观察再生有髓神经纤维数,透射电镜观察再生神经超微结构。结果·42℃组HSP70表达水平高于37℃组、45℃组和Con组(均P<0.05)。冷冻保存4周后42℃组MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ表达水平与37℃组、45℃组、Con组差异均无统计学意义,但42℃组caspase-3、caspase-9表达水平较37℃组、45℃组、Con组降低,坐骨神经细胞存活率较高(均P<0.05)。培养7 d后,42℃组BDNF、GDNF表达水平较37℃组、45℃组、Con组升高(均P=0.000)。移植术后20周,42℃-Allo组CMAP、NCV、有髓神经纤维数、髓
- 石一峰黄英如刘云霄张松冼华
- 关键词:热应激预处理热休克蛋白70异体神经移植神经再生
- 内源性神经营养因子促进冷冻保存大鼠坐骨神经异体移植后神经再生的作用被引量:6
- 2020年
- 目的探讨内源性神经营养因子(ENTFs)对冷冻保存大鼠坐骨神经同种异体移植后神经再生的影响。方法 15 mm雌性Sprague-Dawley大鼠坐骨神经置于DMEM溶液中,37℃、5%CO2分别体外预处理1 d、3 d、7 d、14 d和21 d (A组、B组、C组、D组和E组),设置新鲜神经对照组(F组)。Western blotting检测神经的胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、神经生长因子(NGF)、Bcl-2、Bax、Caspase-3、主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ、MHC-Ⅱ蛋白表达。将上述6组神经置于冷冻保存液中液氮保存4周,Calcein-AM/Propidium Iodide染色、激光共聚焦显微镜观察保存后神经活细胞和死细胞情况。用上述冷冻保存4周的坐骨神经和新鲜坐骨神经(G组),同种异体移植修复雌性Wistar大鼠坐骨神经10 mm缺损(A′组、B′组、C′组、D′组、E′组、F′组和G′组),设置同系移植组(H′组)。移植术后1周,免疫荧光染色观察CD8+T细胞、巨噬细胞入侵移植物情况,ELISA法检测受者血清白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;移植术后20周,电生理检测肌肉复合动作电位(CMAP)和神经传导速度(NCV),称重计算腓肠肌湿重比,神经丝(NF)200免疫荧光染色、甲苯胺蓝染色和透射电镜观察再生神经组织学。结果与F组相比,C组、D组和E组GDNF、NGF蛋白表达均增加(P <0.05);B^E组Bcl-2蛋白表达降低(P <0.05),Bax和Caspase-3蛋白表达均增加(P <0.05);A组~E组MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ蛋白表达均降低(P <0.05)。坐骨神经冷冻保存4周后,与F组和G组相比,C组、D组和E组活细胞数量降低。同种异体移植术后1周,与F′组和G′组相比,C′组、D′组和E′组移植物CD8+T细胞、巨噬细胞减少,受者血清IL-2、TNF-α水平降低(P <0.05)。移植术后20周,C′组、D′组和E′组CMAP、NCV、腓肠肌湿重比、再生有髓神经纤维数及髓鞘厚度均显著优于F′组和G′组(P <0.05),C′组、D′组和E′组移植神经NF200表达�
- 张松黄英如石一峰刘云霄冼华
- 关键词:周围神经损伤同种异体移植神经再生
- 血中骨代谢生化指标在骨质疏松症诊治中的意义被引量:23
- 2007年
- 冼华曹文富
- 关键词:骨代谢生化指标骨质疏松症全身性骨骼疾病诊治骨量减少骨吸收
- 补骨防疏汤对骨质疏松症大鼠骨组织OPG表达的影响被引量:9
- 2012年
- 目的:观察补骨防疏汤对骨质疏松症大鼠骨组织骨保护素(OPG)的影响。方法:Wistar大鼠分为4组,采用维甲酸70 mg.kg-1.d-1ig连续2周,制备大鼠骨质疏松模型,观察灌服中、高剂量补骨防疏汤(40,20 g.kg-1)治疗4,8,12周后大鼠骨组织OPG的变化及骨小梁形态计量学变化。结果:维甲酸ig 2周后,模型对照组大鼠骨小梁明显稀疏,骨小梁面积为(22.52±3.15)%,骨组织OPG的面积积分吸光度(IA)为0.29±0.15,均显著低于正常组(P<0.01),说明造模成功。补骨防疏汤治疗后中、高剂量组大鼠骨小梁面积为(36.41±1.40)%,(37.58±1.40)%,显著高于模型对照组(P<0.01),骨组织OPG的IA为2.41±1.40,3.07±0.40,OPG阳性表达明显增多(P<0.01),骨组织病理变化明显改善。结论:补骨防疏汤能显著提高骨质疏松症大鼠OPG表达,改善骨质疏松的病理变化。
- 冼华曹文富
- 关键词:骨质疏松症骨小梁骨保护素