于士颜
- 作品数:6 被引量:6H指数:2
- 供职机构:上海市公共卫生临床中心更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划上海市科委科研计划项目上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 乙型肝炎病毒多聚酶抑制Ⅰ型干扰素诱生机制的研究
- 乙型肝炎病毒目前依然是影响广大发展中国家人民健康的重要病原体。据统计,全球仍然有3亿5千万人感染乙型肝炎病毒,其中我国携带乙型肝炎病毒人数约占23%。尽管大规模的计划内疫苗接种已经大大降低了新生儿感染乙型肝炎病毒的风险,...
- 于士颜
- 关键词:乙型肝炎病毒干扰素调节因子3
- 蛋白质棕榈酰化修饰及其研究方法被引量:3
- 2008年
- 蛋白质棕榈酰化是蛋白质翻译后脂质共价修饰的一种重要形式,对象主要是胞质蛋白质,对蛋白质功能产生多重影响。近年来由于相关新技术引入,对蛋白质棕榈酰化主要修饰酶及其对靶蛋白功能调节方面的研究已渐成为新热点。本文主要对近几年来蛋白质棕榈酰化修饰及其研究方法作了综述。
- 秦静于士颜李锦军
- 可调控性uPA诱导表达系统的构建及功能鉴定
- 2015年
- 目的构建可调控性尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,u PA)诱导表达系统并进行相关鉴定,可为进一步构建可诱导型肝脏人源化u PA-SCID动物模型奠定基础。方法可调控性u PA诱导表达系统即在强力霉素(doxycycline,Dox)诱导下通过tet-on系统调控u PA表达。为此,需要构建两个重组质粒,分别为p LNHXO1O2-Alb-GLUC-FMN2A-rt TA和p LNHXO5O6-TRE2-u PA-IRES-Zs Green,前者引入Gaussia荧光素酶(gaussia enzyme fluorescent element,Gluc)与四环素反式激活因子(reverse tetracycline transactivator,rt TA)偶联表达,以便于监测rt TA表达水平;后者同时偶联表达Zs Green,以便于用荧光显微镜观察基因表达。重组逆转录病毒载体进行表达功能鉴定后,将构建质粒与病毒包装衣壳蛋白VSV-G质粒共转染GP2-293包装细胞系后获得具有感染能力的病毒颗粒,利用该病毒感染NIH/3T3细胞,并用G418筛选出阳性细胞;期间各取部分细胞,使用PCR方法鉴定其基因组内是否含有相应基因转录调控本。结果成功构建p LNHXO1O2-Alb-GLUC-FMN2A-rt TA和p LNHXO5O6-TRE2-u PA-IRES-Zs Green克隆。功能鉴定显示,p LNHXO1O2-Alb-GLUC-FMN2A-rt TA克隆可表达rt TA;p LNHXO5O6-TRE2-u PA-IRES-Zs Green克隆转染Hep G-Tet-on细胞,加Dox可诱导u PA表达。包装病毒感染NIH/3T3细胞后通过G418筛选获得单细胞克隆,通过PCR方法鉴定表明其基因组内含有相应转录本,从而成功构建u PA诱导表达稳定细胞株。结论本研究初步建立了可调控性u PA诱导表达系统,从而为可诱导肝损的u PASCID转基因小鼠的构建及在此基础上的肝脏人源化动物模型的建立奠定了基础。
- 陈丽香周晓静刘文文周文江任晓楠于士颜周晓辉
- 关键词:ALBUPA
- 乙型肝炎病毒(HBV)拮抗IFN-α信号通路的初步研究
- 乙型肝炎病毒(HepatitisBVirus,HBV)是困扰我国人民健康的重要传染性疾病,其中相当一部份发展成为慢性乙型肝炎,有些还可能进一步演变为肝硬化、肝细胞癌等。目前临床上常使用拉咪呋叮(3TC)与干扰素-α(IF...
- 于士颜
- 关键词:乙型肝炎病毒IFN-Α免疫调节蛋白表达
- 文献传递
- 不同来源人肝细胞系β干扰素诱生及其信号通路的比较被引量:3
- 2009年
- β干扰素(IFN-β)是一种在抗病毒固有免疫应答过程中具有重要作用的细胞因子,而肝细胞作为肝炎病毒的宿主细胞被认为具有IFN-β诱生的能力,但目前尚未建立合适的体外人肝细胞模型用以研究乙型肝炎病毒(HBV)与肝细胞干扰素系统的相互作用。为此,本研究选取了3株人肝细胞系PH5CH8、Huh7、HepG2作为研究对象,以IFN-β诱生剂新城疫病毒(NDV)与多聚次黄苷酸-胞苷酸〔poly(I∶C)〕处理细胞,从转录、蛋白水平及功能学角度检测产生IFN-β的能力。结果显示,与Huh7和HepG2细胞相比,PH5CH8细胞经NDV与poly(I∶C)诱导可产生高水平的IFN-β。进一步利用蛋白免疫印迹法比较3株细胞系内IFN-β诱生信号通路相关蛋白的表达水平,结果显示,与PH5CH8细胞相比,Huh7和HepG2细胞内多种信号蛋白的表达水平偏低。本研究结果为选择合适肝细胞系用于HBV与干扰素系统作用的研究提供了实验依据,并为重建IFN诱生系统选择性缺陷的肝细胞系提供了理论基础。
- 陈辉邬敏于士颜陈捷亮袁正宏
- 关键词:肝细胞Β干扰素
- 乙型肝炎病毒多聚酶蛋白影响肝细胞产生I型干扰素诱生的初步研究
- @@肝细胞是乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染、复制和完成生活周期的宿上细胞,近年来报道表明肝细胞除了产生维持机体机能的蛋白外还具有产生干扰素并对细胞因子应答等固有免疫功能。HBV可在患者肝细...
- 邬敏于士颜陈捷亮陈辉袁正宏
- 关键词:乙型肝炎病毒肝细胞I型干扰素信号通路
- 文献传递