黄启欣
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
- 供职机构:华南农业大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金广州市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:理学轻工技术与工程更多>>
- 二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药单链抗体的制备及广谱特异性被引量:7
- 2012年
- 从分泌抗二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药(DPPs)单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞系(12C2)中提取了总RNA,经RT-PCR反转录成cDNA,设计带linker引物,采用重叠延伸PCR制备单链抗体(scFv)基因,将其克隆到噬菌体载体p3MH中,构建成噬菌体单链抗体表达载体,转化大肠杆菌表达出噬菌体表面展示scFv,对经过Phage-ELISA鉴定的阳性克隆进行噬菌体外壳蛋白基因geneⅢ的去除,用IPTG诱导其可溶性表达,对表达产物进行SDS-PAGE,Western-Blot及ELISA鉴定,并与亲本MAb进行性能对比.结果表明,可溶性表达的scFv分子量为27000;scFv与DPPs的交叉反应率比其亲本MAb提高了1.3~3.5倍,表明其广谱特异性有所提高.由于scFv与MAb相比具有诸多优点,因此本研究为有机磷农药多残留检测方法的建立提供了一种更广谱、更灵敏的新型识别分子.
- 周丽君黄启欣雷红涛王欲晓王强徐振林王弘孙远明
- 关键词:单链抗体噬菌体展示
- 一种三聚氰胺抗原及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种三聚氰胺抗原及其制备方法和应用。本发明三聚氰胺抗原是采用2,4-二氨基-6-肼基-1,3,5三嗪与蛋白质偶联得到。采用本发明三聚氰胺抗原免疫实验动物得到的三聚氰胺特异性抗体,最低检测限(LOD值)为0.9...
- 雷红涛孙远明王强黄启欣
- 三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫分析法被引量:2
- 2013年
- 用三聚氰胺半抗原(MEL)与异硫氰酸荧光素乙二胺(EDF)反应合成了荧光示踪物MEL-EDF,示踪物与三聚氰胺抗体反应得到稳定的单试剂免疫复合物,考察了其结合动力学和置换动力学过程,建立了一种三聚氰胺单试剂荧光偏振免疫分析方法(SR-FPIA).该方法的检出限(LOD)为3.2 ng/mL,半抑制浓度(IC50)为157.1 ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为12.2~1012.4 ng/mL,能够满足国家标准和国际食品法典委员会(CAC)对于食品中三聚氰胺最高残留限量的检测要求.整个检测过程在15 min内完成,并且单试剂免疫复合物在4℃下至少可稳定保存30 d以上.本研究对开发三聚氰胺新型免疫检测方法具有重要意义.
- 王强黄启欣孙远明刘英菊徐振林雷红涛
- 关键词:三聚氰胺
- 抗左旋氧氟沙星Fab及scFv的构建、表达与鉴定
- 左旋氧氟沙星(S-f(-)-Ofloxacin),是第三代氟喹诺酮类药物氧氟沙星(Ofloxacin,OFL)的左旋光学异构体,具有生物利用度高、抗菌能力强、价格便宜等特点被广泛使用。但是,目前药品市场上左旋氧氟沙星的滥...
- 黄启欣
- 关键词:左旋氧氟沙星单链抗体噬菌体抗体可溶性表达
- 一种三聚氰胺抗原及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种三聚氰胺抗原及其制备方法和应用。本发明三聚氰胺抗原是采用2,4-二氨基-6-肼基-1,3,5三嗪与蛋白质偶联得到。采用本发明三聚氰胺抗原免疫实验动物得到的三聚氰胺特异性抗体,最低检测限(LOD值)为0.9...
- 雷红涛孙远明王强黄启欣
- 文献传递