韩雪松
- 作品数：7 被引量：35H指数：2
- 供职机构：中国医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅基金资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用m2-Gi1α融合蛋白鉴别M2受体的特异性药物被引量：2
- 2005年
- 目的表达m2-Gilα融合蛋白,通过检测GDP与m2-Gilα融合蛋白的亲和力大小来鉴别m2受体的特异性激动剂、拮抗剂和反向激动剂。方法用两步PCR反应重组m2-Gilα融合蛋白cDNAs,并插入到pBacPAK9病毒载体中,利用Sf9细胞表达M2受体蛋白和m2-Gilα融合蛋白,通过[3H]QNB结合饱和实验及[35S]GTPγS竞争性替代结合实验,检测受体表达水平及GDP 与m2-Gilα融合蛋白的亲和力。结果m2-Gilα融合蛋白表达水平是(18.14±0.17)pmol·mg(膜蛋白)-1。m2-Gilα融合蛋白与[3H]QNB的结合量随着[3H]QNB浓度的升高而增加,10 μmol·L-1GTDγS使m2-Gilα融合蛋白与[3H]QNB的饱和结合曲线明显下移。Ach使m2-Gilα融合蛋白与[35S]GTPγS竞争性替代结合曲线明显右移,Pilo稍次之,alcuronium,AF—DX116,Iso及atropine 则使曲线左移,GDP的IC50值分别是168.4,152.3,6.84,6.12,5.59,4.52 μmol·L-1,无配体存在时为14.7μmol·L-1。结论表达的m2-Gilα融合蛋白具备M2配体结合的特性及G蛋白耦联受体的信号转导功能,对于有基础活性的m2-Gilα融合蛋白,Ach, Pilo是完全激动剂;atropine,alcuronium。
- 韩雪松郭政东刘洪瑞叶洪飞郭政礼王海波
- 关键词：融合蛋白
- 人结直肠癌平滑肌组织毒蕈碱受体特性的变化被引量：1
- 2003年
- 郭政东王海波刘洪瑞韩雪松
- 关键词：人结直肠癌平滑肌毒蕈碱受体
- m受体融合蛋白表达、信号转导及鉴别亚型特异性配体
- 郭政东王海波王昊郭政刘洪瑞赵立斌韩雪松
- 应用PCR方法将人m1/m3/m5或m2/m4的i3环cDNAs与G11α或Gilα亚单位的cDNAs分别重组，经[3H]QNB放射配体结合实验证明融合蛋白中的m1-m5受体保持了药理学特性,在融合蛋白中G11α/Gil...
- 关键词：
- 关键词：毒蕈碱受体融合蛋白亲和性
- 肺炎支原体P1蛋白结构基因的克隆与鉴定
- 2001年
- 目的 :在大肠杆菌中克隆肺炎支原体P1蛋白结构基因 ,为实现肺炎支原体P1蛋白结构基因的大量扩增及表达奠定基础。方法 :PCR方法获取肺炎支原体P1蛋白结构基因 ,并与 pUC19载体DNA连接 ,转入大肠杆菌JM10 9菌株。X -Gal平板筛选转化子 ,用PCR方法和限制性核酸内切酶酶切图谱分析方法鉴定重组克隆。结果 :PCR和限制性核酸内切酶图谱分析均证实所获重组质粒中含有P1蛋白基因。结论 :获得了含有肺炎支原体P1蛋白结构基因的克隆菌株。
- 王桂珍李保强董占双刘忠顺刘洪瑞韩雪松
- 关键词：P1蛋白肺炎支原体基因克隆
- 滨蒿内酯对离体大鼠主动脉平滑肌作用的研究被引量：15
- 2002年
- 目的 :研究滨蒿内酯 (scoparone ,Scop)对离体大鼠主动脉平滑肌张力的影响。方法 :通过测定离体血管环张力变化 ,观察Scop对主动脉平滑肌的舒张作用及与苯肾上腺素 (PE)、普萘洛尔 (Prop)和氯化钾 (KCl)之间的相互作用。结果 :Scop舒张离体主动脉平滑肌 ,并且对内皮完整 (EC +)标本的舒张作用明显大于去内皮 (EC - )标本 ,半抑制浓度 (IC50 )分别为 (10 0± 0 4 ) μmol/L(CE +)与 (83 2± 0 8) μmol/L(EC - ) (P <0 0 1) ;Scop使PE量效曲线下移 ,呈非竞争性抑制 ,亲和力指数 (PD2 )分别为 4 93± 0 0 5 (EC +)与 2 94± 0 14 (EC - ) ;Prop(1μmol/L)对Scop舒张血管平滑肌作用无影响 ;Scop不能抑制Prop所致血管平滑肌收缩 ;Scop对血管平滑肌的依内钙及依外钙性收缩均有明显抑制作用。结论 :Scop可舒张离体大鼠主动脉平滑肌 ,此作用与内皮细胞的功能有一定关系。
- 李智刘洪瑞杨海玲丛华滕赞韩雪松
- 关键词：离体大鼠主动脉滨蒿内酯血管舒张血管平滑肌
- 滨蒿内酯对豚鼠气管平滑肌细胞细胞内钙离子浓度的影响被引量：18
- 2002年
- 目的 :探讨滨蒿内酯 (Scop)松弛豚鼠气管平滑肌的机制。方法 :进行豚鼠气管平滑肌细胞分离 ,通过负荷钙离子荧光指示剂fluor 3 AM进行 [Ca2 + ]i 测定。结果 :Scop可直接降低豚鼠气管平滑肌 [Ca2 + ]ii,并且能抑制磷酸组织胺 (His)和咖啡因 (caffeine)对气管平滑肌 [Ca2 + ]i 的升高作用。结论
- 刘洪瑞李智王晓红韩雪松滕赞孙哲
- 关键词：滨蒿内酯细胞内钙离子浓度气管平滑肌
- 应用m_5AChR-G_(11α)融合蛋白鉴别M_5受体亚型的特异性药物被引量：2
- 2006年
- 目的采用Sf9细胞系统表达m5AChRG11α融合蛋白,通过检测GDP与m5AChRG11α融合蛋白的亲和力大小来鉴别m5AChR的特异性激动剂和拮抗剂。方法用两步PCR反应重组m5AChRG11α融合蛋白cDNAs,并插入到pBacPAK9病毒载体中,利用Sf9细胞表达m5AChR受体蛋白和m5AChRG11α融合蛋白,通过[3H]QNB结合饱和实验及[35S]GTPγS竞争性替代结合实验,检测受体表达水平及GDP与m5AChRG11α融合蛋白的亲和力。结果m5AChRG11α融合蛋白表达水平是(47.6±3.2)nmol·g-1膜蛋白。不同配体的存在使融合蛋白中G11α与GDP的亲和力发生变化。ACh、YM796、Oxotremorine、Methixene、Dextimide及atropine存在以及无配体存在时,GDP的IC50值分别是128.0,72.1,68.5,16.2,14.9,9.7和20.8μmol·L-1。结论Sf9细胞系统表达的m5AChRG11α融合蛋白具备M受体配体结合的特性和组分间偶联功能。m5AChRG11α融合蛋白对GDP的亲和性决定于M受体配体的性质。对于m5AChRG11α融合蛋白,ACh是m5AChR完全激动剂,YM796和Oxotremorine是部分激动剂;atropine,Methixene和Dextimide是拮抗剂。
- 刘洪瑞郭政东韩雪松王海波李智
- 关键词：G蛋白融合蛋白激动剂
