韩晓燕
- 作品数：36 被引量：128H指数：8
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学理学更多>>
- 全血染色法和分离外周血单个核细胞染色的五聚体技术检测抗原特异性CTL的比较被引量：5
- 2006年
- 目的分别采用分离外周血单个核细胞(PBMC)法和全血直接染色法的组织相容性抗原-肽五聚体(MHCpentamers)流式细胞技术定量分析慢性乙型肝炎(下称慢性乙肝)患者体内乙型肝炎病毒(HBV)特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL),并对两种方法进行比较。方法从慢性乙肝患者外周血中分离PBMC,用HLA-A2HBcAg抗原表位肽-MHCPentamers及CD8单克隆抗体染色后,用流式细胞仪检测HBV特异性的CTL细胞,部分患者同时采用全血直接染色方法进行HBV特异性的CTL细胞的检测。结果32例HLA-A2阳性的慢性乙肝患者外周血均可检测到HBV特异性的CTL细胞,五聚体阳性细胞占CD8阳性细胞的比例平均为(1.34±1.06)%,两种染色方法检测的特异性的CTL细胞无统计学差异。结论全血直接染色结合五聚体流式细胞技术检测抗原特异性CTL是一种简便、敏感和可行的抗原表位特异性CTL检测方法。
- 邓洪韩晓燕陈幼明张富程高志良姚集鲁
- 关键词：T淋巴细胞细胞毒性HLA抗原
- 慢性HBV感染患者抗原表位特异性CTL与ALT水平无关被引量：3
- 2006年
- 【目的】通过定量分析慢性乙型肝炎患者体内乙型肝炎病毒(HBV)特异性的细胞毒性T淋巴细胞,探讨特异性细胞毒性T淋巴细胞水平与血清丙氨酸氨基转移酶水平和病毒复制状态的关系。【方法】从慢性乙型肝炎患者外周血分离外周血单个核细胞(PBMC),用HLA-A2限制的HBcAg抗原表位肽-五聚体复合体及CD8单克隆抗体染色后,用流式细胞仪检测HBV特异性的细胞毒性T淋巴细胞,同时检测患者的肝功能和定量分析HBVDNA。【结果】32例HLA-A2阳性的慢性乙型肝炎患者外周血均可检测到HBV特异性的细胞毒性T淋巴细胞,五聚体阳性细胞占CD8阳性细胞的比例为1.3%±1.1%,统计分析抗原表位特异性细胞毒性T淋巴细胞频率与丙氨酸氨基转移酶水平相关性不显著(r=0.163,P=0.163)。分组对比发现病毒载量低者(HBVDNA定量<105拷贝/mL)抗原表位特异性细胞毒性T淋巴细胞水平(1.96%±1.26%)高于病毒载量高者(0.82%±0.52%,P<0.05)。【结论】慢性乙型肝炎患者外周血中存在抗原表位特异性细胞毒性T淋巴细胞,抗原表位特异性细胞毒性T淋巴细胞可能与控制HBV的复制有关,但主要肝损害并非直接由抗原表位特异性细胞毒性T淋巴细胞引起。
- 邓洪韩晓燕陈幼明张富程彭晓谋高志良姚集鲁
- 关键词：HLA抗原
- 绞股蓝总苷对大鼠心、脑Na^+,K^+-ATP酶的抑制作用及其动力学分析被引量：9
- 2006年
- 目的观察绞股蓝总苷对心、脑微粒体Na+,K-ATP酶活性的抑制作用及动力学分析。方法采用离心法制备大鼠心、脑组织微粒体酶,以比色法测定Na+,K-ATP酶活力,通过酶动力学研究方法分析绞股蓝总苷对心、脑微粒体Na+,K-ATP酶活性的抑制作用。结果绞股蓝总苷体外可逆性抑制大鼠心、脑微粒体Na+,K-ATP酶活性,并呈浓度依赖性,且对脑微粒体Na+,K-ATP酶的抑制作用较强,其IC50分别为(58.79±8.25)、(52.07±6.25)mg/L。降低Na+,K+浓度或增加ATP浓度则增强其抑制酶活性作用。酶动力学分析显示,绞股蓝总苷对微粒体Na+,K-ATP酶的作用近似Na+的竞争性拮抗剂、底物ATP的反竞争性抑制剂、K+的混合性抑制剂。结论绞股蓝总苷通过抑制心、脑Na+,K-ATP酶活性而发挥其强心作用和中枢抑制作用。
- 韩晓燕卫洪波张富程
- 关键词：绞股蓝总苷微粒体酶动力学
- 高校附属医院应加强临床医学学科建设被引量：9
- 2006年
- 医疗、教学和科研是高等院校附属医院的三大职能,也是临床医学学科的三大功能,因而加强临床医学学科建设是医院生存和发展的必由之路。本文介绍了中山大学第三附属医院在加强临床医学学科建设中所采取的措施和取得的经验,以供参考。
- 宁方芹付亚芬韩晓燕韩莉
- 关键词：学科建设
- 丙型肝炎病毒包膜蛋白E2的原核表达及鉴定
- 2006年
- 目的构建丙型肝炎病毒(HCV)包膜蛋白E2基因的重组原核表达质粒,并获得E2蛋白的高效表达。方法通过RT-PCR法从HCVRNA阳性的血清标本中扩增出HCVE2区基因595bp,PCR产物分别经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后连接到经同样酶切的原核表达载体PET22b(+)上,转化大肠杆菌DH5α菌株,获得阳性重组质粒PETB,阳性质粒转化BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Westernblot鉴定。结果成功地克隆了HCVE2区基因,构建了其原核表达质粒,并在BL21(DE3)菌中表达HCVE2重组蛋白,Westernblot显示表达蛋白具有抗原性。结论HCVE2重组蛋白的表达和鉴定为进一步了解HCV糖蛋白E2的功能及其与CD81二者的相互关系打下基础。
- 代志琰李刚徐启桓姚集鲁韩晓燕杨林陈文思
- 关键词：丙型肝炎病毒包膜蛋白原核表达
- 制定临床学科评估标准的思考和实践被引量：19
- 2003年
- 为遴选我院的临床重点学科 ,加强学科建设 ,在参考国家高等学校重点学科点评估体系评分标准的基础上 ,结合临床医学的特点 ,制定既适合我院实际 ,又能与全国接轨的临床学科评估标准。此评估指标由四大部分组成 ,即学术梯队及学科发展方向、科研水平、医疗水平和教学水平。用此评估标准 ,对我院 2 0多个临床学科进行评估 ,选拔出 5个重点学科 ,评选结果合理。本文还对我院临床学科评估标准与国家高等学校重点学科点评估体系评分标准作了比较。
- 宁方芹付亚芬韩晓燕黄倩孙志坚周晓波马前进
- 关键词：临床学科
- PSF1在结肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞增殖的影响被引量：4
- 2013年
- 目的检测PSF1在结肠癌组织中的表达，探讨RNA干扰沉默PSF1表达对人结肠癌细胞增殖的影响及其可能的机制。方法收集2004年5月至2006年12月间经病理确诊的40例结肠癌标本．采用Westerllblot检测标本中PSF1蛋白表达水平；应用脂质体法将靶向PSF1的短发夹RNA（shRNA）干扰质粒转染人结肠癌细胞株LOVO、HT．29和HCT116，Westernblot法检测PSF1蛋白表达变化．分别应用MTY法、软琼脂克隆形成实验及荧光定量PCR检测转染PSF1shRNA干扰质粒对结肠癌细胞增殖活性、锚定非依赖性生长能力及PSF2、PSF3和SLD5mRNA表达的影响。结果结肠癌组织中PSF1蛋白相对表达量为0．485±0．113，显著高于正常黏膜组织的0．056±0．014（P〈0．01）。转染PSF1sbRNA干扰质粒后，LOVO、HT-29和HCT116细胞中PSF1蛋白表达水平均显著下降（P〈0．05），细胞增殖能力显著降低，软琼脂克隆形成率明显下降。与阴性对照组及正常生长组细胞比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。转染PSF1shRNA干扰质粒后．LOVO、HT-29和HCT116细胞中PSF2、PSF3和SLD5mRNA表达均明显下降（P〈0．05）。结论PSF1与结肠癌的发生发展具有一定关系。利用RNA干扰技术能有效抑制结肠癌细胞中PSF1表达。并抑制结肠癌细胞增殖。PSF1基因有望成为结肠癌靶向治疗的新靶点。
- 温机智韩晓燕魏波张实卫洪波
- 关键词：结肠肿瘤RNA干扰细胞增殖
- HPLC-MS检测荔枝果皮中的根皮苷被引量：1
- 2014年
- 目的高效快速地检测荔枝果皮中根皮苷含量。方法新鲜荔枝果皮阴干,用70%乙醇溶液以超声波浸提法提取,经过D101大孔树脂吸附层析、C18小柱固相萃取分离后,采用高效液相色谱—质谱联用技术(HPLC-MS)检测提取液中根皮苷含量。结果通过与根皮苷标准品对照,高效液相色谱—质谱在提取液中检测到根皮苷。结论采用70%乙醇溶液超声波浸提法可成功从荔枝果皮中提取到根皮苷,用高效液相色谱—质谱可高效快速地检测出其中含量。
- 侯雪瑞谢阳赖维韩晓燕
- 关键词：HPLC-MS荔枝果皮
- 乙型肝炎病毒HBx蛋白抑制阿霉素诱导的HepG2细胞凋亡被引量：8
- 2008年
- 目的探讨乙型肝炎病毒HBx蛋白对阿霉素诱导的肝癌细胞凋亡的影响。方法将adr亚型HBx基因片段定向插入绿色荧光蛋白（GFP）真核表达载体pEGFPCl，构建重组体pGFP—HBx。将pEGFPCl、pGFPHBx转染HepG2细胞，采用G418筛选抗性克隆、荧光显微镜观察及RT—PCR检测HBx基因表达情况以建立稳定表达细胞株HepG2／GFP、HepG2／GFPHBx。用阿霉素（2．5μg／m1）分别处理HepG2、HepG2／GFP、HepG2／GFPHBx细胞，处理后不同时间在显微镜下观察细胞形态变化，并用锥虫蓝染色计数死亡细胞；流式细胞仪检测阿霉素处理36h后细胞凋亡率。结果HepG2／GFP、HepG2／GFPHBx细胞传70代后，仍表达强的GFP；RTPCR检测显示在HepG2／GFP—HBx细胞有HBx基因转录表达。锥虫蓝染色检测表明阿霉素处理的HepG2、HepG2／GFP细胞发生了明显的时间依赖性细胞死亡，而在HepG2／GFPHBx和对照组细胞未见明显细胞死亡；流式细胞仪检测显示阿霉素处理36h后，HepG2／GFP—HBx细胞凋亡率为3．94％，明显低于HepG2（59．03％）、HepG2／GFP细胞（61．38％）（P〈0．01），而与未处理对照组细胞凋亡率（2．12％，2．78％，2．55％）差异无统计学意义（P〉0．05）。结论成功建立了稳定表达GFP、GFPHBx的HepG2细胞株；HBx能够抑制阿霉素诱导的HepG2细胞凋亡。
- 范红梅杨林谢奇峰韩晓燕吴盟张富程姚春斓李刚高志良
- 关键词：细胞凋亡HBX蛋白阿霉素绿色荧光蛋白
- 结直肠癌组织中GINS复合物的表达及其临床意义被引量：2
- 2011年
- 目的探讨GINS复合物在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法运用实时荧光定量PCR方法检测76例结直肠癌标本中GINS复合物4个基因PSF1、PS砣、PSF3和SLD5的mRNA表达情况．并分析其与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系。结果结直肠癌组织中PSF1、PSF2、PSF3和SLD5mRNA的相对表达量（0．001853±0．000651、0．007757±0．004260、0．000967±0．000481、0．003248±0．001721）均明显高于正常黏膜组织（0．000352±0．000169、0．002951±0．001216、0．000472±0．000271和0．001675±0．001156）（均P〈0．01）。PSF1mRNA表达与肿瘤大小（p〈0．01）有关；PSF2mRNA表达与患者年龄（P〈O．05）和淋巴结转移（P〈0．05）有关；PSF3mRNA表达与患者临床病理特征无关（P〉0．05）；SLD5mRNA表达与患者淋巴结转移（P〈0．01）有关。PSFl、PSF2和SLD5高表达组患者的5年生存率分别为57．1％、54．3％和54．3％，均明显低于低表达组患者的77．1％、80．O％和80．0％，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。Cox回归分析结果提示，PSFlmRNA表达是影响结直肠癌患者预后的独立因素之一（P〈0．05）。结论GINS复合物在结直肠癌组织中高表达，且与患者临床病理特征有密切关系．其中PSFlmRNA表达可作为预测结直肠癌患者预后的生物学指标。
- 卫洪波温机智魏波韩晓燕张实
- 关键词：结直肠肿瘤预后实时荧光定量PCR
