雷景迈
- 作品数:12 被引量:34H指数:4
- 供职机构:华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 细胞培养液中微量多胺的高效液相色谱荧光检测法被引量:2
- 1995年
- 先采用C18样品预处理小柱浓缩培养液中的微量多胺,经DNS-Cl荧光衍生,高效液相色谱分离,荧光检测,结果可使腐胺、精脒、精胺等组份得到完全分离。精密度批内CV分别为2.49%、2.95%、4.26%;批间CV为4.29%、4.69%、5.16%;回收率为103.6%、101.6%、99.0%。我们发现,许多常用人工合成培养基中均含有极低浓度的多胺,本法可分析培养细胞前后培养基中微量多胺的变化,为研究多胺对细胞增殖的调控作用提供了有用的手段。
- 王淳本柴锡禄雷景迈何善述
- 关键词:培养基多胺分光光度法高效液相色谱
- DDPH对HECCM促PASMC增殖后的逆转效应研究被引量:2
- 2002年
- 利用低氧内皮细胞条件培养基 (HECCM)建立猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)的增殖模型 ;以四甲基偶氮唑盐 (MTT)比色法、α平滑肌肌动蛋白 (α- SM- actin)为指标 ,用免疫细胞化学染色及透射电镜等方法观察不同浓度DDPH[1- (2 ,6 - dim ethylphenoxy) - 2 - (3,4 - dimethoxy phenylethylamino) propane hydrochloride]对 HECCM促 PASMC增殖后的逆转效应。结果表明 :HECCM促 PASMC增殖后 ,PASMC的表型发生转化 ,由收缩表型转化为合成表型 ,PASMC胞质内的 α- SM- actin含量下降 ;而 DDPH能使 HECCM促 PASMC增殖后的表型逆转 ,即由合成表型逆转为具有执行正常收缩功能的收缩表型 ,PASMC胞质内的 α- SM- actin含量回升 ;且 DDPH的这种作用具有浓度相关性。透射电镜结果从形态学上也证明 PASMC由合成表型逆转为收缩表型 ,由此推测 ,DDPH对 HECCM促
- 张红胜王西明陈蓓蓓雷景迈何善述
- 关键词:DDPH逆转效应丙烷盐酸盐Α-平滑肌肌动蛋白降压药
- PLP-组氨酸脱羧酶的纯化与晶体制备
- 1989年
- 本文成功地改进了依赖磷酸吡哆醛的组氨酸脱羧酶(PLP-Histidine Decarboxylase;PLP-HDCase)的纯化方法。通过采用离子交换层析,减少浓缩及透析次数,方法简便。同时,增加Aminohexyl-sepharose层析柱床体积,使一次获得纯化PLP-HDCase量增加10~15倍。在获得足够优质PLP-HDCase的基础上,找到了稳定结晶及晶体生长条件,首次获得大单晶。
- 雷景迈ML Hackert
- 关键词:离子交换层析
- 蛋白激酶及DDPH对HECCM促PASMC增殖的影响被引量:2
- 2002年
- 应用猪肺血管的内皮细胞进行常氧 /低氧培养 ,制备常氧 /低氧内皮细胞条件培养基 (Norm oxic/ Hypoxial en-dothelia cell conditional m edium,NECCM/ HECCM) ,分别观察蛋白激酶 A(protein kinase A,PKA)、蛋白激酶 C(proteinkinase C,PKC)和受体酪氨酸蛋白激酶 /胞浆酪氨酸蛋白激酶 (recepror tyrosine protein kinase/ plasma tyrosine protein ki-nase,RTK/ PTK)及 DDPH对 HECCM促肺动脉平滑肌细胞 (pulmonary arterial smooth m uscle cell,PASMC)增殖的影响。探讨这些蛋白激酶在促 PASMC增殖中的作用 ,以及 DDPH抑制这种促增殖的机理。结果提示 :PKC是 HECCM促 PASMC增殖的关键性效应分子 ,但其被激活的上游信号转导分子除了 RTK/ PTK外 ,还有其它非 RTK/ PTK介导的信号转导方式 ;DDPH对 HECCM促 PASMC增殖的抑制点在 PKC上游 ,可能直接作用于 RTK/ PTK,或者阻断 Ca2
- 何声秀段秋红陈蓓蓓雷景迈何善述陈娟
- 关键词:DDPH增殖肺动脉平滑肌细胞蛋白激酶
- DDPH抑制HECCM促PASMC增殖时第二信使变化的研究被引量:4
- 2000年
- 采用 MTT比色、荧光技术和放免技术观察了猪肺动脉低氧内皮细胞条件培养液 (HECCM)和 1- (2 ,6 -二甲基苯氧基 ) - 2 - (3,4-二甲氧基苯乙胺基 )丙烷盐酸盐 (DDPH)对猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)增殖、第二信使 ([Ca2 +]i 和 c AMP)的影响。结果显示 :1HECCM促进 PASMC增殖 ,而 DDPH可抑制之 ,抑制率为 77.46 %。 2HECCM升高 PASMCs内 [Ca2 +]i,而 DDPH可对抗此作用。 3HECCM组 PASMCs内 c AMP含量明显低于对照组(NECCM组 ) ,而 HECCM+DDPH组 PASMCs内 c AMP与
- 段秋红廖国宁雷景迈何善述
- 关键词:慢性低氧性肺动脉高压丙烷盐酸盐DDPH
- DDPH对HECCM促PAS MC增殖后的逆转及时间相关性的研究
- 2002年
- 目的 研究DDPH对肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖后的逆转效应与DDPH的作用时间依赖性。方法采用细胞培养、四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT)、免疫细胞化学染色测定α SM actin等方法观察低氧内皮细胞条件培养基(HECCM )促猪肺动脉平滑肌细胞的增殖作用 ,以及DDPH对肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖后的逆转效应与DDPH的作用时间依赖性。结果 (1)在HECCM促使PASMC增殖后 ,PASMC的表型发生转化 ,由收缩型转化为合成型 ,而DDPH能使HECCM促PASMC增殖后的表型 ,由合成型逆转为具有执行正常收缩功能的收缩型 ;(2 )在HECCM促PASMC增殖 2 4h ,36h ,4 8h后 ,各加入DDPH2 4h ,36h ,4 8h后 ,MTT法测定OD值下降 ;免疫组织化学测定α SM actin的吸光度上升 ,并具有时间依赖性。
- 王西明陈蓓蓓张红胜雷景迈何善述
- 关键词:肺动脉平滑肌细胞肺动脉高压降压药DDPH逆转
- 荧光微量检测细胞内DNA与蛋白质含量被引量:6
- 1999年
- 应用荧光试剂(33258Hoechst)微量测定细胞内DNA含量,应用荧光胺(Fluorescamine)微量测定细胞内蛋白质含量。结果:荧光试剂与DNA的A-T碱基形成复合物后,其激发波长(EX)由320nm移至350nm,发射波长(EM)由480nm移至460nm,且荧光强度大为增强。荧光胺与蛋白质反应生成强荧光化合物,在EX390nm,EM475nm条件下最低检测限为0.5μg/μl。该法操作简便,微量快速,重复性好。可用于荧光微量测定DNA与蛋白质含量,还可用于观察细胞的增殖。
- 王炜廖国宁季金林雷景迈何善述
- 关键词:荧光光度测定法蛋白质细胞增殖
- 血清酶组检法对原发性肝癌和肝血管瘤的鉴别诊断研究被引量:1
- 1993年
- 本文对82例原发性肝癌(PHC),48例肝血管瘤(HH)和正常对照者的4种血清酶活性进行了测定,经微机统计分析,求得对PHC和HH的鉴别结果;单独检测的鉴别率:血清胆碱酯酸(SChE)为75.56%,血清α-L-岩藻糖苷醇(SαFU)为78.46%,血清β-葡萄糖醛酸苷酶(Sβ Ga)为65.75%。联合检测的鉴别率:SChE和SαFu为 80.00%;SβGa和SChE为 77.32%;SChE、SαFu和SβGa 3联检测为 84.04%。
- 柴锡禄王天才乐桂蓉吴德媛雷景迈王炜何善述
- 关键词:原发性肝肿瘤血管瘤胆碱酯酶
- 用紫外与可见光分光分析仪测定PASMC增殖的MTT比色法被引量:16
- 2000年
- 为使 MTT比色法得到更广泛的应用 ,对紫外与可见光分光分析仪测定细胞增殖 MTT比色法的实验条件进行了探索。结果发现 :以 5 mg/ m l MTT在 0 .1× 10 4~ 2 .4× 10 4细胞范围内进行检测 ,可获得较好的线性检测结果 (γ=0 .9872 )。与酶标仪直接测定比较 ,具有灵敏度高、数据准确、检测范围广 ,值得推广应用。
- 廖国宁雷景迈何善述
- 关键词:MTT比色法细胞增殖
- PDGF在低氧内皮细胞条件培养基促猪肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用被引量:2
- 2000年
- 为了探索低氧条件下猪肺动脉内皮细胞 (PAEC)对猪肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)增殖调控关系 ,应用MTT比色法 ,DNA荧光测定法观察了外源性 PDGF促 PASMC增殖作用 ,以及 Suram in抑制 PDGF促增殖作用的效应 ,并在此基础上研究了猪肺动脉内皮细胞条件培养基 (HECCM)中 PDGF促 PASMC增殖的作用。结果表明 ,HECCM促 PASMC增殖作用的效应可被 Suramin部分抑制 ,由此证明 ,PDGF是低氧刺激 PAEC产生的一种促 PASMC增殖的重要因子。
- 廖国宁陈蓓蓓雷景迈何善述
- 关键词:低氧PDGF细胞增殖